ERCCl和RRMl与非小细胞肺癌预后及耐药的相关研究进展

肺癌是各种恶性肿瘤中引起死亡的主要原因之一。尽管治疗措施不断发展，预后仍然不理想。其中非小细胞肺癌占所有肺癌患者的80％，大部分患者发现时已处于晚期（Ⅲ or Ⅳ），总体5年生存率不到5％，早期手术患者，5年生存率约80％左右。

FOLFOX6化疗对结直肠癌患者外周血单核细胞中ERCCl表达的影响

目的探讨奥沙利铂、亚叶酸钙、5-氟尿嘧啶（FOLFOX6）化疗方案对Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌患者外周血单核细胞（PBMC）中ERCCl表达的影响。方法采用Westernblot法检测结直肠癌患者化疗前后PBMC中ERCCl的表达，分析首次化疗前PB-MC中ERCCl表达与临床病理特征的相关性。结果Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌患者化疗前PBMC中ERCCl表达与淋巴结转移及分化程度有关，与其他临床病理特征无关；FOLFOX6化疗后PBMC中ERCCl表达明显增加，与化疗前比较差异有统计学意义（Z=-2．548，P=0．011）。结论FOLFOX6化疗可上调结直肠癌患者PBMC中ERCCl表达，检测ERCCl表达水平有利于结直肠癌患者行含奥沙利铂的化疗方案的治疗。

核苷酸切除修复基因表达低下与肺癌的关系

目的 探讨核苷酸切除修复基因ERCCl(excisionrepaircross -complementing 1 )的表达与肺癌发病的关系。方法 用RT -PCR(reversetranscription -polymerasechainreaction)技术检测 1 50例肺癌组织和 50例正常肺组织中ERCCl基因的mRNA表达 ;免疫组化法检测ERCC1和癌变相关基因P53、C -MYC、K -RAS、BCL - 2和hTERT(端粒酶逆转录酶 )基因的蛋白表达 ;分析有关暴露因素对修复基因ERCCl表达的影响 ,并探讨ERCC1基因与P53、C -MYC、K -RAS、BCL - 2和hTERT等癌变相关基因的关系。结果 30 7% (46/ 1 50 )的肺癌组织和 4 0 % (2 / 50 )的正常肺组织存在ER CC1基因的表达低下 ;修复基因ERCC1表达低下与肺癌发生有关联 ,其危险度OR为 1 0 62 (2 38,65 98) ,P <0 0 0 1 ,人群归因危险度PARP为 8 87%。分析各种可能影响ERCC1基因表达的暴露因素 ,发现吸烟可抑制ERCC1基因的表达。另外发现 ,P53突变蛋白和K -RAS癌基因的过度表达与ERCC1表达低下有关。P分别为 0 0 388和 0 0 4 5 6。ERCC1与C -MYC、BCL - 2和hTERT基因的表达无关联。结论 ERCC1表达低下在肺癌发病中起着重要的作用 。

TP/TC方案新辅助化疗对原发性上皮性卵巢癌ER-CC1、BRCA1及β-tubulinⅢ表达的影响

目的:探讨原发性上皮性卵巢癌患者紫杉醇+铂类(TP/TC)方案的新辅助化疗对核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC l)、乳腺癌易感基因1(BRCA l)及β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)表达的影响及临床意义。方法:应用免疫组化技术检测48例原发性上皮性癌患者组织标本(其中以TP/TC方案行新辅助化疗15例)中ERCC l、BRCA l及β-tubulinⅢ蛋白表达。结果:ERCCl蛋白主要在卵巢癌细胞核表达,细胞浆有少量表达;BRCAl蛋白在细胞核表达;β-tubulinⅢ在细胞胞浆中表达。新辅助化疗组中ERCC1蛋白高表达率(66.67%)显著高于术前未行化疗组(30.30%),差异有统计学意义(P<0.05);新辅助化疗组中BRCA1蛋白高表达率(20%)高于术前未行化疗组(3.03%),但差异无统计学意义(P>0.05);新辅助化疗组中β-微管蛋白Ⅲ高表达率(60%)高于术前未行化疗组(57.58%),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:含铂新辅助化疗可能通过诱导ERCC1的表达增加卵巢上皮癌对铂类的耐药性。TP/TC新辅助化疗可能上调BRCA1及β-tubulinⅢ蛋白在卵巢上皮癌中的表达。

ERCC1表达水平与以铂类药物为基础的胃癌新辅助化疗疗效相关性研究

目的通过检测进展期胃癌患者应用铂类药物新辅助化疗后标本组织中ERCCl表达水平变化，结合临床疗效进行相关性分析，探讨其作为新辅助化疗疗效生物学标志物可能性。方法通过对治疗前分期评估为第7版AJCCⅡ-Ⅲ期胃癌患者行口服氟尿嘧啶[替吉奥胶囊80mg／（m2·d），第1～14天]联合奥沙利铂（130mg／m2第l天）新辅助化疗结合外科手术，术中取得新鲜肿瘤、正常组织标本，通过RT-PCR方法从基因水平对ERCC1进行检测，分析其与新辅助化疗疗效之间的关系。结果从2012年6月-2013年3月共入组32例AJCCⅡ-III期胃癌患者，所有入组患者均完成了至少2个周期新辅助化疗，21例患者出现临床缓解（65．6％），10例患者肿瘤为组织学缓解（31．3％）。胃癌新辅助化疗有效率为65．6％。RT-PCR检测结果显示，胃癌新辅助化疗患者ERCC1表达水平病理学缓解者明显低于非敏感者（P〈0．01）。结论ERCC1表达水平变化可能成为反映以铂类药物为基础胃癌新辅助化疗疗效的重要分子生物学指标。

过表达ERCC1蛋白细胞系的建立

[目的 ]建立过表达ERCC1蛋白的细胞系 ,为遗传毒性化合物的研究提供模型细胞系 ,并有可能为具有DNA加合作用化合物提供新的毒理学筛选方法。 [方法 ]应用PCR和DNA重组技术将核苷酸切除修复交叉互补组 1 (Excisionrepaircrosscomplementationgroup1 ,ERCC1 )基因与pT7Blue载体相连接 ,然后构建真核细胞重组表达质粒 pcDNA3.1 /Zeo(+) -ERCC1 ,并导入 2 93细胞。经Zeocin抗性筛选后获得转染ERCC1基因的细胞克隆。细胞增殖后以Western -blot检测目的蛋白的表达。 [结果 ]获得稳定转染ERCC1基因的细胞系 ,并在细胞中检测出有ERCC1蛋白的过表达。 [结论 ]用基因转染法成功建立了过表达ERCC1蛋白的ERCC1 - 2

ERCC1表达与食管癌铂类化疗疗效及预后的相关性研究

目的探讨ERCC1表达(切除修复交叉互补组1)与食管癌铂类化疗疗效及预后的相关性。方法选择2014年2月至2016年2月我院收治的食管癌患者160例,根据患者ERCC1表达情况分为阴性表达组(85例)和阳性表达组(75例)。给予所有患者含铂类化疗方案进行治疗,并检测ERCC1表达情况。比较两组患者化疗疗效及预后情况。结果阴性组与阳性组化疗疗效相比,无明显差异(P>0.05);阴性表达组患者生存期明显长于阳性表达组(P<0.05)。结论 ERCC1表达与食管癌铂类化疗疗效无明显相关性,但阳性表达提示患者预后较差,生存期短。

联合检测ERCC1、BRCA1、RRM1表达在非小细胞肺癌选择化疗方案中的意义

目的:探讨检测非小细胞肺癌组织中ERCC1、BRCA1、RRM1的蛋白表达在化疗方案选择中的临床意义。方法:选取确诊非小细胞肺癌患者120例,随机分为两组。常规化疗组(60例)给予吉西他滨/紫杉醇+顺铂化疗;实验组(60例):化疗前检测ERCC1、RRM1、BRCA1蛋白的表达,选用敏感的化疗药物治疗。比较两组的疗效、无疾病进展时间和生存期。结果:实验组中ERCC1蛋白和BRCA1蛋白表达阳性率为28.33%,RRM1蛋白表达阳性率为51.67%。治疗两周期后评价常规化疗组和实验组的化疗客观缓解率分别是35.00%(21/60),43.33%(26/60),无统计学差异(P>0.05)。两组无疾病进展平均时间、中位时间分别为实验组6.653个月、4.8个月;常规化疗组4.35个月、3.5个月,有统计学意义(P<0.05)。生存分析两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:检测ERCC1蛋白、BRCA1蛋白、RRM1蛋白的表达选择化疗方案使非小细胞肺癌患者在临床化疗中获益,可以延长无疾病进展时间。

晚期结肠癌组织中ERCC1和BRCA1的表达与奥沙利铂方案化疗疗效及预后的关系

目的探讨晚期结肠癌组织中切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing gene l,ERCCl)和乳腺癌易感基因l(breast cancer susceptibility gene l,BRCAl)的表达情况及其与临床病理特征、奥沙利铂方案化疗疗效及预后之间的关系。方法采用免疫组织化学方法检测晚期结肠癌组织中ERCCl和BRCAl蛋白的表达状况。结果晚期结肠癌组织中ERCCl和BRCA1蛋白表达阳性率分别为41.2%和47.4%。ERCCl和BRCA1蛋白的表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度和肿瘤部位均无关(P>0.05),结肠癌组织中ERCC1蛋白表达与BRCA1蛋白表达呈正相关(r=0.211,P=0.038)。ERCCl和BRCA1蛋白表达阴性患者奥沙利铂方案化疗有效率高于表达阳性患者(P<0.05)。ERCCl蛋白表达阴性患者化疗后,中位生存期(median survival time,MST)高于表达阳性患者(P=0.014);BRCAl蛋白表达阴性患者化疗后MST高于表达阳性患者,但差异无统计学意义(P=0.201)。Cox回归模型分析结果显示ERCC1蛋白的表达状态和肿瘤分化程度是影响结肠癌预后的独立因素。结论晚期结肠癌中ERCCl和BRCAl蛋白的表达存在相关性,ERCCl和BRCAl的表达对奥沙利铂方案化疗疗效具有预测价值,并且ERCC1的表达状态可作为预后判断依据,而BRCA1在晚期肠癌预后判断中的价值则有待进一步研究。

绿茶多酚对表皮HaCaT细胞光损伤的干预作用研究

目的:本文旨在观察没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)引起的表皮HaCaT细胞损伤,以及对细胞着色性干皮病蛋白A(XPA)和切除修复互补交叉蛋白1(ERCC1)蛋白表达的影响。方法:以30mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞,照光前后加入50g/mL EGCG进行干预,Western blot法检测细胞XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结果:UVB照射后细胞内XPA和ERCC1蛋白表达水平逐渐增高,在照光后4h达到峰值,后逐渐恢复至接近正常值;加入EGCG干预可明显降低XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结论:EGCG对紫外线光损伤的干预作用可能与调控细胞内XPA和ERCC1蛋白的表达有关。

封闭ERCC1基因表达对卵巢癌细胞耐药的影响

目的:探讨通过封闭ERCC1基因表达干扰DNA损伤修复路径及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响。方法:构建ERCC1基因反义表达载体,转染人卵巢癌细胞A2780及A2780/CF70,采用Northern杂交及Western Blot分析人卵巢癌细胞内ERCC1基因RNA及蛋白表达水平变化;利用荧光素酶报告基因系统观察宿主细胞对DNA损伤的修复作用;采用MTT实验研究细胞对铂类药物耐药性的影响。结果:卵巢癌细胞转染反义ERCC1基因后,ERCC1基因转录水平、蛋白表达水平明显下降。荧光素酶报告基因系统结果证明,宿主细胞的DNA修复活性下降。MTT实验表明,伴随ERCC1基因表达水平下降,细胞对顺铂的耐药性降低。结论:转染ERCC1反义基因显著影响宿主细胞的核苷酸切除修复,影响细胞对顺铂的耐药性。

HIF-1α及ERCC1基因多态性与晚期非小细胞肺癌铂类化疗近期疗效的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)C1772T(C→T,rs11549465)和切除修复交叉互补基因1(ERCC1)codon 118(C→T,rs11615)基因多态性与接受顺铂方案化疗的晚期非小细胞肺癌患者疗效的关系。方法对经病理确诊的晚期NSCLC患者68例,采用含铂方案化疗2个周期后评价疗效,采用聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测患者外周血HIF-1αC1772T和ERCC1 codon 118进行多态性分析,比较各基因型与晚期非小细胞肺癌患者近期疗效的相关性。结果 HIF-1αC1772T基因型频率分别为:C/C型占83.82%(57/68)、C/T型占16.17%(11/68),未发现T/T型;ERCC1 codon 118基因型频率分别为:C/C型占61.76%(42/68)、C/T型占32.35%(22/68)、T/T型占5.88%(4/68)。68例患者中,完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)21例,疾病稳定(SD)30例,疾病进展(PD)16例;总有效率为32.35%。C/C型HIF-1αC1772T基因型患者采用铂类药物治疗的近期疗效与C/T+T/T基因型比较,差异无统计学意义(P=0.694);C/C型ERCC1基因型患者采用铂类药物治疗疗效是C/T+T/T型患者的4.125倍,差异有统计学意义(95%可信区间:1.208~14.097,P=0.019),同时携带HIF-1αC1772T C/C和ERCC1 codon 118 C/C基因型患者,对铂类药物的疗效存在一定的联合作用(P=0.001)。结论 HIF-1αC1772T和ERCC1 codon 118基因型可能是晚期NSCLC患者铂类药物敏感性的预测因子。

结直肠癌中ERCC1蛋白的表达与预后生存关系的Meta分析

目的评价结直肠癌患者中核苷酸切除修复交叉互补酶1(ERCC1)蛋白的表达与患者预后的相关性进行meta分析。方法采用计算机检索,检索范围包括全文数据库(CNKI),万方数据库,PubMed、Embase和ASCO数据库。收集比较不同核苷酸切除修复交叉互补酶1蛋白表达水平的结直肠癌患者预后相关的文章,采用revman软件,对文献进行Meta分析。结果最终纳入5项研究,对纳入的文献进行异质性检验显示P=0.14,异质性不大,ERCC1蛋白阴性表达的患者的死亡率低于ERCC1阳性的患者,合并相对危险比RR=0.56;95%可信区间0.37～0.86。结论结直肠癌中ERCC1蛋白阴性的患者预后较ERCC1阳性者好。

RNA干扰ERCC1基因表达对人卵巢癌耐药细胞DDP、PGPIPN敏感性的影响

目的探讨RNA干扰核苷酸剪切修复偶联因子1(ERCC1)基因表达对人卵巢癌耐药细胞DDP、PGPIPN敏感性的影响。方法实验分为空白对照组、特异性转染组和非特异性转染组。采用MTT法测定PGPIPN、DDP对3组细胞的增殖抑制率,RT-PCR法检测PGPIPN对3组细胞乳腺癌易感基因1(BRCA1)基因表达的影响。结果 MTT法结果显示,PGPIPN作用人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP 48 h,对其增殖有一定的抑制作用,在浓度为40、60 mg/L时,与浓度为0 mg/L比较,差异有统计学意义(P<0.05);DDP、PGPIPN分别作用特异性转染组细胞48 h,其增殖明显受到抑制,与0 mg/L比较,差异均有统计学意义(P<0.05);RTPCR法结果显示,PGPIPN作用特异性转染组细胞48 h,其BRCA1基因表达随着PGPIPN浓度升高而明显降低,在浓度为40、60 mg/L时,与PGPIPN浓度为0 mg/L比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PGPIPN对SKOV3/DDP细胞的增殖有一定的抑制作用,并且通过干扰ERCC1基因表达可以明显增强SKOV3/DDP细胞对DDP、PGPIPN的敏感性,同时可增强PGPIPN对BRCA1基因的下调水平。

ERCC1表达与Ⅲ期胃癌术后预后的关系

目的探讨切除修复交叉互补基因(ERCC1)蛋白在Ⅲ期胃癌中表达及其与预后的关系。方法采用免疫组化En Vision二步法检测477例Ⅲ期胃癌组织中ERCC1蛋白的表达情况,并分析其与预后的关系。结果胃癌组织中ER-CC1蛋白阳性表达率为67.1%(320/477)。ERCC1阳性表达的320例患者中,化疗组中位生存期(MST)为30.9个月,5年生存率为30%;未化疗组MST为26.3个月,5年生存率为25%,差异无统计学意义(P=0.184)。ERCC1阴性表达的157例患者中,化疗组MST为33.0个月,5年生存率30%;未化疗组MST为18.5个月,5年生存率为9%,差异有统计学意义(P=0.000)。未行术后辅助化疗的131例患者中,ERCC1阳性表达者生存时间长于阴性者(P=0.034)。Cox多因素分析显示,肿块大小、浸润深度、有无脉管神经受侵、淋巴结转移、化疗与否为胃癌的独立预后因素。结论胃癌根治术后患者ERCC1阴性表达者可从含铂方案辅助化疗中获益;ERCC1阳性可能是预后良好的指标,但应用含铂药物化疗后患者似乎未能显著延长生存。

ercc1、rrm1基因在侵袭性非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

目的 探讨ercc1、rrm1基因在侵袭性非霍奇金淋巴瘤中的表达及其与患者临床特征和预后的关系。方法 采用Taqman RT-PCR法检测65例侵袭性非霍奇金淋巴瘤患者肿瘤组织中ercc1和rrm1基因的表达情况，分析其与患者临床特征及无进展生存、总生存的关系。结果 （1）ercc1基因高表达仅出现于侵袭性T细胞淋巴瘤患者，发生率18%，主要表达在T淋巴母细胞性和外周T细胞性； rrm1基因在侵袭性B和T细胞淋巴瘤中均有高表达，B细胞性表达率较T细胞性淋巴瘤高（8/31 vs.2/33，P=0.044）。（2）ercc1、rrm1基因高表达在侵袭性B和T细胞淋巴瘤中均与患者较短的无进展生存期（χ^24.323，P=0.038）和总生存期（χ^25.728，P=0.017）有关。 结论 （1）侵袭性淋巴瘤对铂类与吉西他滨药物敏感。（2）ercc1、rrm1基因的表达对侵袭性非霍奇金淋巴瘤预 后的预测均有意义。

ERCC1 Asn118Asn polymorphism as predictor for cancer response to oxaliplatin-based chemotherapy in patients with advanced colorectal cancer

Objective： To assess whether the polymorphism of ERCC1 Asn118Asn （C → T） had effects on cancer response to chemotherapy and outcome in Chinese patients treated with oxaliplatin as first-line chemotherapy regimen for advanced colorectal cancer. Methods： ERCC1 Asn 118Asn polymorphism was analyzed in 99 patients with stages Ⅲ and Ⅳ advanced colorectal cancer treated with oxaliplatin-based chemotherapy, For all of the patients, ERCC1 Asnl18Asn genotype was analyzed for associations with treatment response and time to disease progress （TTP）. Results： The allele frequencies of the ERCC1 gene codon 118 were C/C 50.51% （50/99）, C/T 41.41% （41/99）, T/T 8.08% （8/99）, respectively. Patients with C/C genotype showed higher response rate than those with C/T ＋ T/T （OR = 3.764, 95% CI： 1.310-10.813）. The median TTP of all patients was 7 months （95% CI： 5.569--8.431）. Patients with C/C genotype showed a median TTP of 10 months （95% CI： 8.924-11.076）, which was longer than 5 months （95% CI： 4.424-5.576） in patients with C/T ＋ T/T genotypes. Conclusion： Our results showed a link between ERCC1 Asn118Asn genetic polymorphism and cancer response to oxaliplatin-based chemotherapy and time to disease progress in Chinese patients with advanced colorectal cancer. ERCC1 Asn 118Asn genotyping may be of predictive benefit in selecting treatment regimen for advanced colorectal cancer.

ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力

目的 探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌细胞修复苯并 (a)芘所致DNA损伤中的作用。方法 构建表达ERCC1反义RNA的重组质粒 ,Lipofectin转染肺癌A5 4 9细胞 ,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆 ;噻唑蓝法检测 2 4h细胞生存力 ;NorthernBlot分析细胞ERCC1基因mRNA表达水平 ;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度 ,每组计算 5 0个细胞损伤情况。结果 筛选出表达ERCC1反义RNA的 7个阳性克隆 ,其生长特性与亲本细胞差别无显著性 ;内源性mRNA表达水平不同程度降低 ,为亲本细胞的 12 %～ 86 % ;DNA损伤修复速度减慢 ,10 μmol/L苯并 (a)芘作用 2 4h后再孵育 2 4h ,修复程度为亲本细胞的 2 9%～ 71% ;相关分析表明DNA损伤修复程度与ERCC1mRNA水平显著相关。结论 ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并 (a)芘所致DNA损伤的修复能力。

氯化镉恶性转化16HBE细胞中ERCC1因表达和序列的变化

目的探讨氯化镉（CdCl2）诱发人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中，ERCCl基因mRNA和蛋白动态变化的规律及其序列变化情况。方法用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组织化学SP法，检测16HBE细胞及其CdCl2恶性转化细胞不同阶段（第5、15、35代细胞及成瘤细胞）ERCCl基因mRNA和蛋白的表达情况。用直接测序法，分析ERCCl基因第3、4外显子的序列情况。结果随着转化代数的增加，ERCCl基因mRNA和蛋白的表达逐渐降低，至第35代细胞后表达明显下调，mRNA表达从16HBE的0．7028±0．0170下降到第35代细胞的0．3480±0．0453，蛋白表达强度从16HBE的8．40±1．34下降到第35代细胞的0．20±0.44，差异均有统计学意义（P〈0．01）。ERCCI基因第4外显子在第1位点出现腺嘌呤（A）缺失，为移码突变。结论镉致癌的分子机制可能与ERCC1基因水平的下调和突变有关。

非小细胞肺癌组织中DNA切除修复交叉互补基因1mRNA的表达及其对预后的影响

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中DNA切除修复交叉互补基因1（ERCC1）的表达水平,及其对NSCLC患者预后的影响.方法 采用实时定量PCR技术检测60例NSCLC患者的癌组织及癌旁正常组织中ERCCI mRNA表达水平,采用Kaplan-Meier单因素与Cox多元回归进行生存分析.结果 NSCLC患者癌组织和癌旁相应正常组织中ERCCI mRNA的表达水平分别为-7.85 4±3.86和-11.194±5.03,差异有统计学意义（t=3.973,P=0.000）.60例NSCLC中,ERCCI mRNA 高表达43例（71.6%）,低表达17例（28.3%）.Kaplan-Meier法生存分析显示,ERCCI mRNA高表达患者的生存率显著低于低表达患者（P=0.0003）,淋巴结转移患者的生存率低于无淋巴结转移患者（P=0.026）,有肿瘤家族史患者的生存率低于无肿瘤家族史患者（P=0.049）,病理分级高的患者生存率低于病理分级低的患者（P=0.031）.Cox回归分析结果显示,ERCCI mRNA表达水平、有无淋巴结转移、病理分级和是否吸烟是影响NSCLC患者术后生存的独立危险因素.结论 NSCLC组织中ERCCI高表达的患者术后生存时间较短.ERCCI mRNA表达水平、有无淋巴结转移、病理分级、肿瘤家族史和是否吸烟可作为评价NSCLC患者预后的参考指标.