鼠脑外伤后人工脑脊液灌洗对ERK通路和神经细胞凋亡的影响

目的:检测人工脑脊液灌洗通过ERK通路对脑外伤后神经细胞凋亡的影响。方法:将SD大鼠192只,随机分为假手术组、脑外伤模型组、局部人工脑脊液灌洗组、局部生理盐水灌洗组,各组又按处死时间即术后6 h,12 h,1 d,3 d分为4个亚组。采用蛋白免疫印迹法检测各组磷酸化细胞外信号调节激酶2(P-ERK2)蛋白的表达、SABC法半定量检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:人工脑脊液灌洗组伤灶区P-ERK2蛋白和TNF-α蛋白的表达以及凋亡阳性细胞数在各时间点均低于模型组和生理盐水灌洗组(P<0.05)。结论:人工脑脊液灌洗可能通过ERK通路减少脑损伤后神经细胞凋亡。

肾素前体激活人肾系膜细胞ERK1/2诱导TGF-β的表达

目的:观察肾素前体(prorenin)能否激活体外培养的人肾系膜细胞(HRMCs)膜表面的肾素(前体)受体[(P)RR],从而活化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路。方法:体外培养HRMCs。以血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)阻断剂olmsartan和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)阻断剂PD123319孵育细胞,再以prorenin刺激细胞,并用ERK1/2抑制剂PD98059和HRP(handle region peptide)干预。用免疫蛋白印迹方法(Western blotting)和酶标记免疫吸附测定方法(ELISA)测定目的蛋白水平,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定mRNA水平。结果:Prorenin作用于体外培养的HRMCs后,在阻断AT1和AT2受体时,能激活(P)RR使ERK1/2磷酸化增强、转化生长因子(TGF-β)水平增高。这种ERK1/2信号通路的激活是(P)RR激活后效应,并可被ERK1/2信号通道阻断剂PD98059阻断。HRP不能阻断(P)RR激活所致的ERK1/2磷酸化,不能使TGF-β表达降低。结论:在体外培养的HRMCs中,prorenin能够激活(P)RR,使ERK1/2信号通道活化导致TGF-β水平增高。而HRP不能阻断(P)RR激活后ERK1/2的磷酸化及TGF-β表达的增多。

癫痫中ERK信号通路的研究进展

ERK信号通路主要包括ERK1和ERK2两种异构体,两者具有80%以上的同源性,可以通过磷酸化后参与神经元的兴奋过程,与癫痫的发病机制相关,研究认为,ERK1/2磷酸化作为癫痫发作过程中的早起反应,可以作为抗癫痫药的治疗靶点,也有助于具体研究癫痫发病机制。本文主要从ERK信号通路的认识、ERK信号通路参与癫痫发病机制和与ERK信号通路相关的癫痫治疗来阐述当前的研究进展。

甘精胰岛素对人结肠癌LoVo细胞作用的研究

目的观察甘精胰岛素在体外对结肠癌LoVo细胞的影响并探讨其可能机制。方法使用不同浓度甘精胰岛素对结肠癌LoVo细胞进行干预,以人胰岛素进行对照,分别通过CCK8法和流式细胞术检测结肠癌细胞的增殖和凋亡,通过蛋白印迹法检测ERK1/2蛋白表达。结果经甘精胰岛素(20、50、100、150、200 n M)处理后LoVo细胞数量明显增加,与空白组比较,甘精胰岛素(100、150、200 n M)和阳性对照组人胰岛素(100 n M)有显著促增殖作用(P<0.05)。空白组早期细胞凋亡率为(13.26±1.34)%,甘精胰岛素(100、150、200 n M)处理后凋亡率分别减少到(11.52±2.18)%、(9.11±1.39)%和(6.08±1.92)%。加入ERK1/2抑制剂PD98059后甘精胰岛素未显示出诱导LoVo细胞增殖和减少凋亡的作用。甘精胰岛素上调ERK1/2磷酸化水平并呈时间和剂量依赖性,但ERK1/2总水平没有改变。结论甘精胰岛素在体外有诱导结肠癌LoVo细胞增殖的作用,其机制可能是通过激活ERK1/2信号转导通路实现的。