LXR激动剂和ERK1/2抑制剂诱导PKCε表达的研究

单独使用LXR激动剂T0901317喂食小鼠能减缓动脉粥样硬化发展,但会造成严重的脂肪肝.与ERK1/2抑制剂组合使用治疗能有效防止动脉粥样硬化发展,同时降低了两种药物剂量减轻了副作用.为研究组合药物对身体免疫系统的影响,从蛋白激酶C入手开展实验.在小鼠单核巨噬细胞RAW264.7中,PKCε被T0901317诱导,并呈现一定时间和浓度依赖性,并且用ERK1/2抑制剂U0126处理腹膜巨噬细胞能够上调PKCε.用T0901317和U0126喂食小鼠10 d,研磨心肌后上样,PKCε均未被两种药物上调,因而可见两种药物对PKCε的诱导表达呈现组织和细胞差异性.

肿瘤坏死因子α调控ERK1/2信号通路促进长骨骨样细胞凋亡

背景:肿瘤坏死因子α作为促炎因子可诱导成骨细胞凋亡,增强破骨细胞功能,从而造成炎症性骨破坏,但是其作用机制尚不明确。目的:探讨炎症因子肿瘤坏死因子α对长骨骨样细胞MLO-Y4增殖、凋亡的影响及可能机制。方法:将MLO-Y4细胞分为对照组、肿瘤坏死因子α组、ERK1/2抑制剂组。肿瘤坏死因子α组用含50μg/L肿瘤坏死因子α的α-MEM完全培养基孵育24 h,ERK1/2抑制剂组用含50μmol/L PD98059的α-MEM完全培养基孵育24 h,对照组单纯采用α-MEM完全培养基孵育24 h,采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒检测细胞氧化应激水平,用Western blot法测定PCNA、cleaved caspase-3、p-ERK1/2、ERK1/2的蛋白水平。结果与结论:①与对照组相比,50μg/L肿瘤坏死因子α处理24 h后,细胞增殖能力下降,凋亡率上升;细胞脂质过氧化物丙二醛水平显著增加,而抗氧化物酶超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著降低;②与对照组相比,肿瘤坏死因子α组细胞增殖相关蛋白PCNA的表达显著降低,细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达显著升高,p-ERK1/2的表达降低,而总蛋白ERK1/2的表达基本保持不变。ERK1/2抑制剂组上述指标与肿瘤坏死因子α组无显著差异;③结果表明,50μg/L肿瘤坏死因子α可使长骨骨样细胞MLO-Y4增殖能力下降,细胞凋亡增多,其作用机制可能与抑制MAPK-ERK1/2信号通路的活化有关。