二妙丸中黄柏薄层色谱鉴别方法的改进

目的:改进二妙丸中黄柏薄层色谱鉴别方法。方法:以盐酸小檗碱为对照品,考察不同展开剂、展开剂比例、点样量、环境温度、环境湿度对二妙丸中黄柏薄层色谱分析的影响,确定二妙丸中黄柏薄层色谱分析的最佳条件。结果:采用乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(10∶1∶1)作为展开剂,点样量1μL,在环境温度25℃,环境湿度范围30%~70%下进行薄层色谱鉴别实验,成分斑点清晰、分离度好,且阴性对照无干扰。结论:该薄层色谱方法操作简便,专属性强,可用于二妙丸中黄柏的薄层鉴别,适合作为制药工程专业药物化学实验项目开展实验教学。

二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型肛门瘙痒症患者的效果

目的探讨二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型肛门瘙痒症(PA)患者的效果。方法选取120例湿热型PA患者,随机分为研究组与对照组,各60例。给予对照组患者外用糠酸莫米松凝胶治疗,研究组在对照组治疗基础上加用二妙丸合五味消毒饮加味熏洗治疗。比较两组患者治疗前后的临床证候评分、生活质量评分,比较两组患者治疗结束后的临床疗效,并记录两组患者治疗期间的不良反应发生情况。结果治疗后,两组患者肛门瘙痒、皮损情况、肛周渗液评分及皮肤病生活质量指标量表各维度评分较治疗前降低,且研究组的肛门瘙痒、皮损情况、肛周渗液评分,以及日常活动、休闲、工作学习维度评分低于对照组(P<0.05)。研究组治疗后临床总有效率高于对照组,治疗期间不良反应总发生率低于对照组(P<0.05)。结论采用二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型PA,可以改善患者肛门瘙痒、皮损、肛周渗液的临床症状,提高临床疗效及生活质量,安全性较好,值得临床应用推广。

二妙丸与三妙丸治疗痛风作用机制的研究进展

痛风是一种常见的风湿免疫病,急性发作时,肢体末端常出现红、肿、热和剧烈疼痛。传统中药具有毒副作用小和多靶点等优点,已成为研治痛风的新方向,但因其治疗机制尚未完全明确而未能普及。二妙丸、三妙丸是主治焦湿热痹证的古老中药复方,是至今治疗痛风的常用中药,但其成分、配比与作用机制的研究仍需不断完善与探索。本文对二妙丸、三妙丸治疗痛风的研究现状与进展进行综述,以期为临床研究提供参考。

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究 Ⅱ.超细粉二妙丸的体外溶出度研究

目的 探讨超细粉体技术对中药制剂体外溶出度的影响 ,以及丸剂的粒径对溶出度的影响。方法 采用分光光度法 ,以盐酸小檗碱为指标成分 ,考察普通粉与超细粉二妙丸及不同粒径的超细粉二妙丸微丸的体外溶出度。结果 超细粉二妙丸的 T50 和 Td 分别为 6 1.6 0 ,19.48,17.84,8.97min和 10 2 .3,33.2 9,2 6 .98,14.77min;粒径为2 .4mm的普通粉二妙丸的 T50 和 Td 分别为 89.6 1,15 5 .6 8m in。结论 超细粉二妙丸的溶出速率明显快于普通粉 ,且随着丸剂自身粒径的降低 ,体外溶出速率加快。

HPLC法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量

目的建立二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量。色谱柱为phe-nomenex Luna C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A:乙腈,流动相B:0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-0.2%三乙胺溶液(磷酸调pH 3.0),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为284 nm。结果在一定浓度范围内,黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱峰面积与浓度呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.09%,98.04%,99.75%,102.74%和104.84%,RSD分别为1.04%,1.36%,0.14%,1.83%和0.62%。结论该方法简便准确,专属性强,可作为二妙丸质量控制方法。

二妙丸多指标化学成分质量研究

目的:建立二妙丸(苍术,黄柏)挥发油中β-桉叶醇含量的气相色谱测定法;对二妙丸单煎合并与合煎的挥发油及提取干膏进行多指标化学成分的测定和比较。方法:以丹皮酚为内标物,采用内标法和程序升温的气相色谱条件对二妙丸单煎与合煎的挥发油中的β-桉叶醇含量进行测定和比较;采用高效液相色谱法对二妙丸中的小檗碱、巴马汀、药根碱成分进行含量测定和比较。结果:二妙丸合煎的挥发油中的β-桉叶醇含量比单煎中的含量略高,分别为73.34 mg/g和70.04 mg/g;但从图谱的峰数和保留时间进行比较,结果无明显差别。单煎合并的小檗碱、巴马汀、药根碱的含量明显高于合煎的含量。结论:确立二妙丸挥发油中β-桉叶醇含量测定的方法。并且说明苍术、黄柏配伍,彼此相互影响。

二妙丸对痛风症大鼠血清炎症介质的影响研究

目的:在二妙丸降低血尿酸抗痛风的作用基础上,探讨二妙丸对痛风症大鼠血清中炎症介质的影响。方法:采用乙胺丁醇和腺嘌呤造模法,开展二妙丸抗痛风的药理药效的研究。同时采用高效毛细管电泳法,对大鼠血清蛋白含量进行测定。结果:二妙丸具有降低血尿酸抗痛风的药效,并初步探究二妙丸治疗痛风的作用与血清蛋白含量有关。结论:通过研究二妙丸对痛风大鼠炎症介质的影响,为二妙丸抗痛风作用机制的研究提供科学依据。

二妙丸的质量标准研究

目的:建立二妙丸中有效成分盐酸小檗碱含量测定方法及定性鉴别方法。方法:采用离子对色谱法测定二妙丸中盐酸小檗碱含量。色谱柱:Damonsi(TM)C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相∶乙腈-0.1%磷酸(50∶50)(每100mL加入十二烷基磺酸钠0.1g),检测波长265nm。结果:建立了HPLC测定二妙丸中盐酸小檗碱含量方法。结论:方法简便快速,准确,为该制剂的质量分析建立了可靠的控制方法。分析方法稳定可靠,能作为本丸剂的质控标准。

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究Ⅰ.扫描电子显微镜技术对超细微粉的表征

目的 为了表征苍术、黄柏及二妙丸的超细微粉 ,了解其理化特性。方法 采用扫描电子显微镜、生物显微鉴别、粒径、松密度及比表面积测定等方法对中药普通粉和超细微粉进行了表征。结果 超细微粉颗粒大小均匀 ,90 %小于 2 0 μm,比表面提高 6 0 %～ 190 % ,松密度约为 0 .42 g/ cm3,绝大多数细胞被破碎。结论 苍术、黄柏及二妙丸经超细微化后 ,粉末颗粒大小均匀 ,球性度及均质度明显改善 ;松密度及比表面显著提高 ,植物细胞破壁率高。

二妙丸治疗痛风症大鼠作用机制研究

目的:在二妙丸降低血尿酸抗痛风作用的基础上,初步探讨二妙丸对痛风症大鼠血清中金属元素代谢的影响及变化规律。方法:采用乙胺丁醇和腺嘌呤造模法,开展二妙丸抗痛风的药理药效研究。并在此基础上采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对药理药效中的各组大鼠血清中金属元素含量进行聚类统计分析,找出具有差异的金属元素。结果:二妙丸具有降低血尿酸抗痛风的药效,并探究了痛风症可能与体内金属离子的作用相关。结论:该实验结果为二妙丸从金属离子的角度对其能够降低血尿酸抗痛风的作用机制研究提供科学依据。

二妙丸、三妙丸、四妙丸中β-桉叶醇和茅术醇的含量测定

目的：建立用毛细管ＧＣ法测定二妙丸、三妙丸、四妙丸中β－桉叶醇和茅术醇含量的方法。方法：以丹皮酚为内标物，用毛细管ＧＣ法对二妙丸、三妙丸、四妙丸中β－桉叶醇和茅术醇的含量进行测定。结果：对３０种成药的含量测定表明，大部分成药中含有β－桉叶醇和茅术醇，β－桉叶醇含量最高的二妙丸为Ｒ４，含量达２．９５％；三妙丸为Ｓ９，含量达３．３１％；四妙丸为Ｆ２，含量达１．３６％。茅术醇含量最高的二妙丸为Ｒ４，含量达１．３９％；三妙丸为Ｓ９，含量达２．５３％；四妙丸为Ｆ２，含量达０．９５％。结论：本法为科学评价二妙丸、三妙丸、四妙丸的质量提供了有效化学手段。

五波长高效液相色谱指纹图谱和紫外指纹图谱联用评价二妙丸质量

目的建立二妙丸（Ermiao pill，EMP）平行五波长HPLC定量指纹图谱（PFW-HPLC—FP），并与紫外定量指纹图谱（wFP）联用，把PFW-HPLC—FP整合后再与UV-FP进行等权融合用以综合评价EMP质量。方法采用RP—HPLC法，记录EMP在246、265、290、326、345nm5个平行波长下色谱图，以小檗碱为参照物峰。分别确立55（246nm）、57（265nm）、54（290nm）、44（326nm）和41（345nm）5个共有指纹峰。以系统指纹定量法全面鉴定EMP质量，采用均方开方法（SRAS）整合5波长下的品和Pm及α，并重新评价12批EMPs质量。用紫外定量指纹图谱和一阶导数定量指纹图谱基于系统指纹定量法进行质量评级。最后把PFW．HPLC—FP的sRAs结果和UV-FP结果等权整合来评价EMP质量。结果PFW-HPLC．FP的SRAS结果和UVFP等权整合后鉴定12批EMPs的S3和S7质量（1级）极好；S1、S9、S10、S11和S12质量（2级）很好；S2、S4、S5、S6和S8质量（3级）好。结论由一元五维波长HPLC定量指纹图谱与一元全区段（190～400nm）连续紫外定量指纹图谱联用构成二元色谱一光谱指纹图谱，按均值法整合后鉴定中药质量既能突出紫外吸收大的化学成分作用，也能避免漏检紫外吸收小的化学组分的贡献，鉴定结果优于简单一元指纹图谱对质量评价的准确度。

二妙丸中盐酸小檗碱的溶出度测试

用杯法测定了二妙丸在人工胃液和人工肠液的溶出度。得到T_(50)、T_α及m两组参数,并通过F检验证明该参数间无显著性差异(P>.05),即说明上述两种释放介质对二妙丸中小檗碱的溶出无显著影响。

二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内药代动力学研究

目的：研究二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内药代动力学的参数,以探讨病理状态中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内的变化规律。方法：以吴茱萸次碱为内标,采用HPLC法测定二妙丸在痛风大鼠体内的盐酸小檗碱含量,色谱柱Agilent C18（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（40∶60）（每100 mL含0.34 g磷酸二氢钾,含0.17 g十二烷基磺酸钠）;流速：1.0 mL/min;检测波长：349 nm;柱温：30℃。结果：二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠血浆中的线性范围为1.5~48.0μg/mL,提取回收率较好,日内日间精密度的RSD均小于10%,其主要的药动学参数：Tmax（h）为1.500,Cmax（mg/L）为3.546,MRT 0~24（h）为9.078,MRT 0~∞（h）为57.639。结论：二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内的药代动力学呈二室模型分布。

二妙丸中挥发油化学成分的GC-MS分析

目的采用GC-MS法分析不同厂家生产的二妙丸中挥发油化学成分。方法采用水蒸汽蒸馏提取挥发油,并使用GC-MS联用技术对其进行化学成分分析。结果鉴别了二妙丸中挥发油成分中大部分色谱峰,经与文献资料比对,对化学结构进行了确证,初步推测5种未见报道的挥发油组分的结构。结论不同来源的二妙丸的挥发油成分略有不同,应加强对药材质量和工艺过程的控制,以保持该药品的质量稳定性;建立的方法可作为挥发性成分的控制方法。

小针刀联合二妙丸加减方治疗湿热浸淫型强直性脊柱炎临床疗效观察

目的：观察小针刀联合二妙丸加减方治疗强直性脊柱炎（AS）的临床疗效。方法：随机的将患AS的60例患者分为治疗组和对照组,各30例。对照组予以二妙丸加减方口服治疗,治疗组予以二妙丸加减＋小针刀闭合性松解术治疗,两组均以6个月为治疗疗程。结果：治疗组治疗效果明显优于对照组,两组比较有显著差异（P〈0.05）。结论：针刀联合中药二妙丸加减方的治疗方法,是对湿热浸淫型AS患者有显著疗效的一种治疗方法。

黄柏、苍术不同提取、配伍方法比较研究

目的:该实验研究黄柏和苍术的不同提取、配伍方法。方法:采用多组分加权分析法判断不同提取、配伍方法(即先配伍后提取的方法和先分别提取后合并的方法)的优劣。采用紫外分光光度法测定不同提取、配伍方法中黄柏的总生物碱的含量;采用HPLC法测定不同配伍方法中主要化学成分的含量。结果:黄柏和苍术采用先分提再合并的配伍方法较好,各评价指标均较高。结论:黄柏、苍术配伍建议采用先分别提取再合并的方法进行配伍。该方法可作为黄柏、苍术药对配伍研究的基础。

超细粉体技术对二妙丸体内吸收、分布的影响

目的 探讨超细粉体技术对二妙丸中指标成分小檗碱在动物体内吸收、分布的影响。方法 采用高效液相色谱法测定服用普通粉或超细粉二妙丸后的家兔血浆和小鼠组织中小檗碱的浓度 ,并用 3P97软件计算相应药动学参数。结果家兔分别给药 2种二妙丸后 ,药物动力学过程均符合二室模型 ,主要参数普通二妙丸组为 :t1/ 2 (Ka) =0 .5 6 6 9h ,C(max)=187.72 6 9ng/mL ,T(peak) =1.4 185h ,AUC =6 897.870 1(ng/mL)·h ;超细粉二妙丸组为 :t1/ 2 (Ka) =0 .5 0 2 3h ,C(max) =2 5 1.6 2 0 8ng/mL ,T(peak) =1.0 70 1h ,AUC =5 4 33.6 2 0 6 (ng/mL)·h。小檗碱在小鼠体内各脏器中分布 ,超细粉组均高于普通粉组。结论 经超细粉碎技术处理的二妙丸在体内吸收、分布明显优于普通二妙丸 ,消除也较普通二妙丸快。

二妙丸不同配伍比例对大鼠高尿酸血症的影响

[目的]研究二妙丸不同配伍比例对高尿酸血症大鼠尿酸的影响。[方法]采用酵母膏15 g/kg+腺嘌呤100 mg/kg+氧嗪酸钾300 mg/kg联合用药制备大鼠高尿酸血症模型。将100只雄性SD大鼠随机分为10组,分别是空白对照组、模型组、苍术∶黄柏1∶1组(简称苍黄1∶1组)、苍术∶黄柏1∶2组(苍黄1∶2组)、苍术∶黄柏2∶1组(苍黄2∶1组)、苍术∶黄柏1∶3组(苍黄1∶3组)、苍术∶黄柏3∶1组(苍黄3∶1组)、苍术∶黄柏1∶0组(苍黄1∶0组)、苍术:黄柏0∶1组(苍黄0∶1组)、阳性药组(别嘌呤醇15 mg/kg)。除空白对照组给予同体积生理盐水外,其他各组大鼠分别连续7 d给予酵母膏15 g/kg+腺嘌呤100 mg/kg灌胃造模,同时各比例组给予生药4.8 g/kg二妙丸,于最后1 d灌胃1次氧嗪酸钾300 mg/kg 1次,1 h后取材,通过检测大鼠血清尿酸(BUA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平,观察大鼠尿液中尿肌酐(UCr)、尿尿素氮(UUN)、24 h尿量(24 h UV)、24 h尿酸排泄量(24 h UUA)水平,及肝肾质量和肝肾脏器系数,研究二妙丸不同配伍比例对大鼠高尿酸血症的影响。[结果]与模型组比较,二妙丸各比例治疗组及阳性药组大鼠的BUA、XOD(除苍黄3∶1、1∶0、0∶1组)、SCr、24 h UV(除苍黄0∶1组、阳性药组)、24 h UUA、T-CHO、TG(除阳性药组)、HDL-C、LDL-C、肝脏质量及肝脏脏器系数(除阳性药组)、肾脏质量和肾脏脏器系数水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各治疗组均能显著提高大鼠UCr(除苍黄1∶0组)、UUN(除苍黄3∶1组)水平(P<0.05或P<0.01),而大鼠ALT(除苍黄1∶2组)、AST水平有升高趋势但并无显著性差异(P>0.05)。[结论]综合以上指标,初步表明二妙丸不同配伍比例具有显著降低高尿酸血症大鼠BUA、XOD水平并促进肾脏尿酸排泄、改善肾功能、调节血脂水平的作用,其中苍黄1∶2组效果较为显著。

高效液相色谱法测定二妙丸中盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量

目的 建立同时测定二妙丸中盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱含量的高效液相色谱方法。方法 采用Agilent Extend C18色谱柱（4．6mm×150mm，5μm），以水-乙腈（55：45，每100mL中含磷酸二氢钾0.34g，十二烷基硫酸钠0.17g）为流动相，紫外检测波长345nm，柱温35℃，流速1mL·min^-1。结果 盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的理论塔板数分别为6085，6995和6970。盐酸药根碱回归方程为Y：141547X-7456．9，r=0．9991，线性范围6．1～122ng；盐酸巴马汀回归方程为Y：93047X＋47140，r=0．9995，线性范围0.128～1．28μg；盐酸小檗碱回归方程为Y=86106X＋87243，r=0、9996．线性范围0．12～1．2μg。3组分的平均回收率分别为99.69％，100．23％和99．32％，RSD分别为3、97％，2．04％和2．25％（H=6）。结论 该法操作简单，可以同时测定盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量，精密度高，重复性好，检测快速，定量准确，可用于二妙丸的质量控制。