淀粉液化芽孢杆菌ES-2发酵产物对贮藏期间“湖锦蜜露”水蜜桃品质和生理特性的影响

研究淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amylolique faciens)ES-2发酵液处理对无锡阳山"湖锦蜜露"水蜜桃贮藏期间品质和生理特性的影响。成熟度一致的果实以生物学效价为29100IU/ml处理液浸泡2min,自然晾干后装入塑料筐,于(1.0±0.5)℃条件下贮藏。每样品20个果实,每处理重复3次。贮藏期间每10d测定果实可溶性固形物、还原糖、呼吸强度、相对电导率、MDA、总酸、VC、超氧阴离子自由基(O2·)、SOD活力、POD活力。结果表明:低温贮藏期间,ES-2发酵液处理可有效降低"湖锦蜜露"果实的腐烂率,减少可溶性固形物、还原糖和VC的损失,抑制呼吸强度和超氧阴离子自由基的增加,维持较高的SOD活性,推迟细胞电导率的上升。但发酵液处理对"湖锦蜜露"果实表面颜色有一定的不良作用。

人内皮抑素部分序列——Es-2的生物活性研究

目的:检测人工合成多肽Es-2抑制血管生成活性及其对肿瘤生长的影响。方法:采用MTT法和鸡胚给药实验,观察Es-2对肿瘤细胞和鸡胚尿囊绒膜(CAM)上血管生成的抑制情况。建立C57BL/6黑色素瘤(B16F10)小鼠模型,以不同剂量皮下注射给药,测量各组小鼠皮下移植肿瘤体积变化和抑瘤率。结果:Es-2对肿瘤细胞无抑制现象;在CAM实验中,新生血管生长受到明显的抑制。C57BL/6小鼠给药10 d后治疗组与对照组相比,Es-2 20 mg/kg组对小鼠黑色素瘤生长有一定抑制作用,其效果相当于10 mg/kg内皮抑素的治疗效果(P<0.05)。结论:Es-2具有开发成抗肿瘤药物的前景。

WorldSID 50^(th)假人与ES-2假人的性能对比分析

为深入了解全球侧碰50百分位男性(WorldSID 50^(th))假人在整车侧面碰撞中的响应,针对整车侧面碰撞工况中使用的WorldSID 50^(th)假人和ES-2假人结构的差异,在摆锤冲击标定工况的基础上进行了扩展,采用不同的冲击速度对WorldSID 50^(th)假人和ES-2假人的胸部、腹部、髋部的评价指标进行了规律性分析,并从伤害得分的难易程度上分析了假人各个部位的承受能力,直观地显示出假人不同部位的响应特性。结果表明:在同样冲击条件下,WorldSID 50^(th)假人的胸部承受能力略好于ES-2假人,但腹部和髋部与ES-2相比具有较好的承受能力。此研究中针对两个假人摆锤冲击工况的研究和解析,为进一步研究WorldSID 50^(th)假人在整车侧面碰撞中的响应提供了基础,具有一定的指导意义。

ES-2(Bacillus amyloliquefaciens)发酵产物对贮藏期间“东方蜜一号”哈密瓜品质和生理特性的影响

研究淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ES-2发酵液处理对"东方蜜一号"哈密瓜贮藏期间品质和生理特性的影响。实验结果表明,低温贮藏期间,ES-2发酵液处理可有效降低"东方蜜一号"哈密瓜果实的呼吸速率,延缓果实硬度的下降,维持可滴定酸的稳定,缩小超氧阴离子的变化;ES-2发酵液处理对"东方蜜一号"哈密瓜果实的可溶性固形物、还原糖、MDA、电导率没有明显影响;但ES-2发酵液处理对"东方蜜一号"哈密瓜果实表面的颜色有一定的不利作用。

转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞迁移、侵袭能力及EGFR表达变化

目的观察转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞迁移、侵袭能力及表皮生长因子受体(EGFR)表达变化。方法将卵巢癌ES-2细胞分为观察组和对照组,观察组转染miR-7类似物,对照组转染无关序列,继续培养24 h,用real-time PCR法检测两组细胞miR-7,用细胞划痕实验检测两组细胞迁移能力,用Transwell细胞侵袭实验检测两组细胞侵袭能力,用Western blotting法检测两组细胞中EGFR蛋白,用real-time PCR法检测两组细胞中EGFR mRNA。结果观察组、对照组miR-7相对表达量分别为1.57±0.21、0.13±0.02,划痕愈合率分别为35.32%±5.43%、84.21%±4.35%,穿膜细胞数分别为(149±28)、(532±54)个,EGFR蛋白相对表达量分别为1.27±0.31、3.65±0.67,EGFR mRNA相对表达量分别为0.13±0.04、0.57±0.15,两组比较,P均<0.05。结论转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞miR-7表达上调,同时细胞迁移及侵袭能力下降、EGFR蛋白及mRNA表达降低;推测miR-7表达上调导致了细胞迁移及侵袭能力的下降,miR-7的这一作用是通过下调EGFR表达实现的。

解淀粉芽孢杆菌ES-2对肉鸡屠宰性能和肉品质及肌肉抗氧化能力的影响

[目的]研究日粮中添加解淀粉芽孢杆菌ES-2(BAP)对肉鸡屠宰性能、肉品质及肌肉抗氧化能力的影响。[方法]选用1日龄AA(Arbor Acres)肉鸡600只,随机分成5组:对照组、抗生素组、试验Ⅰ、试验Ⅱ和试验Ⅲ组。对照组饲喂基础日粮;抗生素组添加45 mg·kg^(-1)金霉素;试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别添加200、500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP,每组6个重复,试验期42 d。[结果]与对照组相比,500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP可显著提高肉鸡胸肌率,且500 mg·kg^(-1)的BAP可显著降低腹脂率(P<0.05)。BAP主要影响胸肌的肉品质,500和1 000 mg·kg^(-1)剂量组宰后24 h胸肌的p H值较对照组显著提高(P<0.05);日粮中添加抗生素及500 mg·kg^(-1)的BAP均能显著降低胸肌压力损失(P<0.05)。500和1 000 mg·kg^(-1)剂量组及抗生素组胸肌总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性较对照组显著提高(P<0.05)。另外,日粮中添加500和1 000 mg·kg^(-1)的BAP可显著提高胸肌总抗氧化能力(T-AOC)水平,其中500 mg·kg^(-1)剂量组胸肌T-AOC水平要显著高于200 mg·kg^(-1)剂量组;500mg·kg^(-1)剂量组及抗生素组肉鸡腿肌T-AOC水平较对照组显著提高(P<0.05)。[结论]日粮中添加500和1 000 mg·kg^(-1)的解淀粉芽孢杆菌ES-2均可在一定程度提高肉鸡屠宰性能,增强胸肌宰后24 h的p H值,提高肌肉T-AOC水平和T-SOD活力,增强宰后肌肉的抗氧化能力,且以添加500 mg·kg^(-1)的解淀粉芽孢杆菌ES-2剂量效果较好。解淀粉芽孢杆菌ES-2替代抗生素在肉鸡饲粮中应用具有可行性。

B7-H3基因敲降ES-2细胞系构建及其对细胞增生的影响

目的构建B7同系物3(B7 homolog 3,B7-H3)敲降的ES-2细胞系并探究B7-H3基因对ES-2细胞系增生的影响。方法利用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术在ES-2细胞中敲降B7-H3,利用荧光显微观察、实时荧光定量PCR技术(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)及流式细胞术验证B7-H3敲降效果,并利用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检验细胞活性改变。结果感染不同的shRNA,可呈现不同程度的B7-H3降低,CCK-8检测结果显示,敲除B7-H3后细胞增生速率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用慢病毒介导的shRNA干扰技术能成功构建B7-H3敲降的ES-2细胞系,B7-H3敲降后ES-2细胞增生速率显著降低。

钙调素拮抗剂EBB抑制ES-2细胞转移作用机制初探

目的研究钙调素拮抗剂EBB-O-(4-乙氧基-丁基)-小檗胺体外对人卵巢癌ES-2细胞的转移抑制作用及其机制。方法采用MTT法测定EBB对ES-2细胞的增殖抑制作用;Transwell小室法分析细胞侵袭能力,细胞损伤实验检测细胞迁移能力;共聚焦显微镜技术检测细胞内[Ca2+]i变化。结果EBB对ES-2细胞具有增殖抑制作用,IC50为(13.67±1.56)μmol.L-1,EBB使ES-2细胞的侵袭迁移能力明显下降(P<0.01),伴随[Ca2+]i呈时间及剂量依赖性增高。结论钙调素拮抗剂EBB可抑制ES-2细胞增殖,降低ES-2细胞的侵袭转移能力,与细胞内游离钙离子浓度增高相关。

基于静态冲击的WorldSID与ES-2假人特性对比研究

基于新的侧面碰撞假人World SID与ES-2假人结构上的不同,为进一步研究两种假人在性能上的差异,采用静态冲击的方法对两种假人的肩部、胸部、腹部及盆骨的响应特性进行了对比分析。结果表明,World SID假人整体上的刚度比ES-2假人的刚度低。主要体现在当假人在y向承受相同的冲击时,World SID假人受力更低,加速度更低,肋骨位移更大。在承受45°斜角冲击时,World SID假人的胸部肋骨与ES-2假人胸部肋骨表现出明显不同的特性,该工况下World SID假人肋骨位移比ES-2假人的肋骨位移小。

IL-33及其受体ST2对人卵巢癌ES-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:探讨白细胞介素-33(IL-33)及其受体磺基转移酶(ST2)对人卵巢癌ES-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:采用MTT实验检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞存活率的影响;分为对照组、IL-33组、si-ST2组以及IL-33+si-ST2组,检测各组吸光度值;用流式细胞术检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞凋亡的影响,统计各组细胞凋亡数目;用细胞迁移和侵袭实验检测IL-33和si-ST2对ES-2人卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响。结果:IL-33组、si-ST2组、IL-33+si-ST2组以及对照组的细胞存活率的比较差异有统计学意义(P<0.01)。其中IL-33组细胞存活率高于对照组,si-ST2组细胞存活率低于对照组,IL-33+si-ST2组细胞存活率显著高于si-ST2组,IL-33组细胞存活率显著高于si-ST2组,差异均有统计学意义(P<0.01)。IL-33组细胞凋亡率低于对照组;si-ST2组细胞凋亡率高于对照组和IL-33组;IL-33+si-ST2组细胞凋亡率低于si-ST2组,高于IL-33组。IL-33组、si-ST2组、IL-33+si-ST2组以及对照组的细胞迁移率、侵袭率的比较,差异有统计学意义(P<0.01)。其中IL-33组细胞迁移、侵袭均低于对照组,si-ST2组迁移、侵袭均高于空白对照组,IL-33+si-ST2组迁移、侵袭均高于IL-33组,低于si-ST2组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:IL-33可促进卵巢癌ES-2细胞增殖并抑制其凋亡、迁移、侵袭;沉默ST2可抑制卵巢癌ES-2细胞增殖并促进其凋亡,使其迁移和侵袭能力下降;IL-33通过ST2途径参与影响卵巢癌ES-2细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。

WorldSID与ES-2假人肋骨结构对比

文中分别从生物力学评级、身材尺寸、质量分布等基本参数对ES-2和WorldSID两种假人进行了对比,同时进一步地在相同标定工况下对两者的肋骨结构进行标定试验。结果表明:ES-2和WorldSID两种假人的肩部、胸部、腹部结构完全不同,WorldSID假人的肩部刚性更大而胸部和腹部更“软”,这为更好地了解假人的结构以及在实车碰撞中的动态响应提供了一定参考。

血管生成抑制多肽HM-3及ES-2的组织分布研究

探讨血管生成抑制多肽HM-3和ES-2在组织中分布的特点。将两种多肽HM-3和ES-2分别用异硫氰荧光素（FITC）进行标记,建立C57BL/6黑色素瘤（B16F10）小鼠模型,将标记多肽以尾静脉注射给药,通过流式细胞仪检测分析给药后小鼠各个组织中多肽的分布情况。结果表明血管生成抑制多肽HM-3和ES-2主要分布在肝、肾和胃中,且分布浓度会随着时间的推移而降低,在心、脾和肺中基本没有分布。

细胞凋亡调控基因bcl-2、bax在同种异体肢体移植急性排斥反应中的表达

目的探讨细胞凋亡调控基因bcl-2、bax表达在同种异体肢体移植急性排斥反应时的作用及其意义。方法选用近交系SD大鼠、Wistar大鼠进行同种异体肢体移植。实验组:异基因(SD→Wistar);对照组:同基因(Wistar→Wistar)。于术后第1、3、5、7天分别取移植肢体皮肤、肌肉组织进行病理学观察。原位末端标记法(TUNEL)和免疫组化方法检测移植肢体中的凋亡细胞及bcl-2、bax表达的变化。结果病理学检查结果显示实验组大鼠在术后发生由轻到重的急性排斥反应,术后第7天因严重排斥而使小血管广泛栓塞。对照组无明显排斥现象。实验组的细胞凋亡数明显高于对照组,同时bcl-2表达降低,bax表达增高。结论细胞凋亡在大鼠异基因肢体移植急性排斥反应中发挥重要作用,调控基因bcl-2、bax可作为判断移植肢体预后及监测排斥反应的重要指标。

缺氧诱导因子-1α与基质金属蛋白酶-2在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义

目的 :探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义。方法 :将80只成年SD大鼠随机分为假手术组和慢性压迫性颈脊髓损伤组(脊髓压迫组),每组40只。大鼠麻醉后充分显露C5和C6椎板,切除C5左侧半椎板,显露硬脊膜,脊髓压迫组在C6椎板和硬脊膜之间置入吸水后可膨胀聚氨酯薄板(1×3×1mm);假手术组只显露硬脊膜不置入压迫物。两组分别通过BBB(Basso Beattie Bresnahan)评分和体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP)检测评估脊髓功能;于造模后7d、28d、42d和70d时处死大鼠取颈脊髓组织进行HIF-1α及MMP-2免疫组化染色,检测其在各时间点的表达量(IOD值),采用独立样本t检验比较两组各时间点的差异,分析HIF-1α、MMP-2与脊髓功能变化的相关性。结果:造模后7d时,两组BBB评分无显著性差异;SEP潜伏期显著性延长,波幅显著性降低;HIF-1α显著性降低,MMP-2显著性升高。28d时脊髓压迫组BBB评分显著性低于假手术组,SEP潜伏期与7d比较显著性延长(P<0.05)、波幅显著性降低(P<0.05),HIF-1α表达显著性增高(P<0.05),而MMP-2表达显著性降低(P<0.05)。42d时,脊髓压迫组BBB评分、SEP潜伏期和波幅与28d时比较无显著性差异,HIF-1α表达显著性增高(P<0.05),而MMP-2表达显著性降低(P<0.05);70d时脊髓压迫组神经功能较28d时显著性改善,BBB评分显著性增高(P<0.05),SEP潜伏期显著性缩短(P<0.05)、波幅显著性升高(P<0.05);HIF-1α表达较前显著性降低,而MMP-2表达升高,但与假手术组比较仍有显著性差异(P<0.05)。HIF-1α表达量与BBB评分呈显著性负相关(r=-0.458,P<0.05),MMP-2表达量与BBB评分呈显著性正相关(r=0.903,P<0.05)。结论:大鼠慢性压迫性脊髓损伤后具有一定程度的自我修复能力,HIF-1α、MMP-2表达变化与慢性脊髓压迫性损伤后神经功能改善相关。

西布曲明对肥胖的2型糖尿病患者血糖的影响

目的评价西布曲明对肥胖的2型糖尿病患者血糖的影响及安全性。方法为随机、双盲、安慰剂对照的临床研究。完成观察病例31例,其中西布曲明组15例,安慰剂组16例。结果西布曲明组的A1C用药第6个月末(7.08±1.69)%明显低于试验初期(7.69±1.26)%。在用药第5个月末的空腹血糖水平(7.81±1.55)mmol/L明显低于对照组(9.79±3.55)mmol/L。在用药第2个月末和第4个月末西布曲明组的体重〔分别为(69.04±8.78)?和(68.65±8.44)?〕明显低于对照组〔分别为(74.03±15.34)?和(74.07±15.44)?〕。西布曲明组在用药第3个月末甘油三酯〔(0.43±0.58)mmol/L〕和低密度脂蛋白〔(2.28±0.65)mmol/L〕明显低于安慰剂组〔分别为(0.80±0.72)mmol/L和(2.50±0.35)mmol/L〕。两组不良反应发生率没有显著差异。结论盐酸西布曲明可以进一步改善肥胖的2型糖尿病患者的血糖,糖尿病患者使用盐酸西布曲明安全有效。

大玉竹低聚糖硫酸酯抗HSV-2病毒活性的研究

从传统中药大玉竹中提取低聚糖Poos ,用吡啶 氯磺酸法制备了它的硫酸酯衍生物S Poos.产物经红外鉴定 ,证实Poos硫酸酯化后羟基连上了硫酸基 ,硫含量为 8.47% ,取代度 (Ds)为 0 .6 .体外实验研究了Poos、S Poos对非洲绿猴肾细胞 (Vero)的细胞毒性和抗单纯疱疹病毒 2型 (HSV 2 )的活性 .结果表明 ,Poos和S Poos都无细胞毒性 .Poos本身无抗病毒活性 ,对HSV 2引起的细胞病变和空斑形成都无抑制作用 ;经硫酸酯衍生后的S Poos获得抗病毒活性 ,12 5～ 2 0 0 0 μg/mL的S Poos能很好地抑制HSV 2引起的细胞病变 ,2 0 0 μg/mL的S Poos能完全抑制病毒空斑形成 .图 4表 2参

FGFR2条件性敲除载体的构建及中靶ES细胞的筛选与鉴定

目的 构建成纤维细胞生长因子2型受体(Fibroblastgrowthfactorreceptor 2,FGFR2)条件性敲除载体,并对中 靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR2条件性敲除小鼠模型,研究FGFR2在小鼠骨骼、肺脏等组织、器官发育过程 中的作用打下基础。方法 在分析小鼠FGFR2基因组DNA序列结构的基础上,设计并构建了条件性敲除小鼠FGFR2外 显子7、8的基因打靶载体,采用电穿孔法在ES细胞中进行了打靶重组,G418与Ganciclovir被用于对电转的ES细胞进行正 负筛选,最后对ES细胞克隆进行了Southern与PCR鉴定。结果 将所构建的条件性打靶载体通过电穿孔转染入表达重组 酶(Cre)的AmI细菌,经PCR、酶切和测序鉴定,Cre酶能正确将条件性打靶载体的外显子7、8和选择性标记Neo基因经重 组剔除,电转了基因敲除载体的ES细胞经正负筛选后共挑取克隆83个;经5′端探针Southern杂交鉴定,发现4株阳性克 隆;该4株克隆再经3′端探针Southern杂交鉴定,发现2株阳性克隆;最后经Southern和PCR检测发现1株ES细胞克隆仍 保留外显子7、8两侧的loxP序列。结论 FGFR2条件性基因敲除ES细胞已成功构建。