外泌体源性LncRNA ESCCAL-1/miR-874/ITGBL1对结直肠癌细胞增殖凋亡的影响

目的本研究旨在探究外泌体源性长非编码RNA(LncRNA)ESCCAL-1调控miR-874/整合素β样因子1(ITGBL1)轴在结直肠癌(CRC)进展中的作用机制。方法运用基因表达综合数据库(GEO)数据库对CRC中的差异表达基因进行分析。应用qRT-PCR检测LncRNA ESCCAL-1、miR-874和ITGBL1在CRC组织和细胞系(SW480、SW620、HCT116和HT29)及癌旁正常组织和NCM460细胞系中的表达;3(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、克隆形成和流式细胞术分别检测细胞增殖、集落形成和凋亡情况;双荧光素酶报告实验分别验证miR-874与ESCCAL-1、ITGBL1间的互作用关系;荧光原位杂交测定LncRNAESCCAL-1的亚细胞定位。使用Exosome提取试剂盒分离血清中的外泌体。结果ESCCAL-1和ITGBL1在CRC组织和细胞系中的表达高于癌旁正常组织和NCM460细胞系,miR-874则相反(P<0.05)。敲减ESCCAL-1能够抑制CRC细胞增殖和集落形成,促进细胞凋亡。miR-874和ESCCAL-1存在特异性结合位点,miR-874抑制剂能够部分逆转敲减ESCCAL-1在CRC中介导的效应(P<0.05)。ESCCAL-1吸附miR-874上调ITGBL1。CRC患者血清中的ESCCAL-1及exo-ESCCAL-1较对照组上调,血清exo-ESCCAL-1可能是CRC治疗的一个有价值的诊断指标(P<0.05)。结论ESCCAL-1通过调控miR-874/ITGBL1轴促进CRC进展,ESCCAL-1可能是CRC治疗的一个有效分子靶点。

食管鳞状细胞癌特异相关长链非编码RNA转录物1在食管鳞状细胞癌中的表达及预后意义

目的分析食管鳞状细胞癌特异相关长链非编码RNA转录物1（ESCCAL-1）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及预后意义。方法纳入2011年8月至2013年5月于郑州大学第一附属医院和河南省肿瘤医院接受食管癌根治术治疗的73例ESCC患者，采用实时荧光定量PCR方法检测其食管癌组织及对应的癌旁组织中ESCCAL-1的表达。统计学分析采用t检验、卡方检验和多因素分析。结果ESCC患者食管癌组织中的ESCCAL-1表达水平为28.03±9.37，高于对应癌旁组织中的11.39±4.15，差异有统计学意义（t＝2.964，P〈0.01）。73例ESCC患者食管癌组织中ESCCAL-1的不同表达在不同年龄、性别、组织学分级、国际抗癌联盟（UICC）分期、T分期和淋巴结转移中差异均无统计学意义（P均〉0.05）。ESCCAL-1低表达组患者的中位无病生存期和总生存期分别为39和42个月，分别长于ESCCAL-1高表达组的30和37个月，差异均有统计学意义（χ2＝9.049，P＝0.003；χ2＝10.165，P＝0.001）。多因素分析显示，ESCCAL-1的表达为ESCC患者无病生存期和总生存期的独立危险因素[风险比（HR）＝2.45，95%CI 1.22～4.93，P＝0.012；HR＝2.29，95%CI 1.14～4.59，P＝0.019]。结论ESCCAL-1可能参与食管鳞状细胞癌的发生、发展过程，食管鳞状细胞癌组织中ESCCAL-1的表达水平可能是接受根治术治疗患者的预后指标。