Red/ET系统研究进展及在微生物研究中的应用

传统的基因工程技术现已经不满足于后基因组时代的生命科学研究。新的同源重组系统-Red/ET系统具有所需同源臂短(35—60 bp),重组效率高等特点,通过诱导recE/recT或redα/redβ完成重组,可以采用各种策略对目标基因进行插入、敲除、点突变等一系列修饰操作,并且不需限制性内切酶和连接酶的作用。文章针对Red/ET系统的产生背景、原理、系统改进和应用作一阐述,并对Red/ET在微生物研究中的应用作了举例。

利用Red/ET系统结合rpsL反向筛选敲除AcMNPV lef-10基因

【目的】利用Red/ET系统结合rpsL反向筛选建立苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)晚期表达因子lef-10点突变载体,为进一步研究AcMNPVlef-10的功能奠定基础。【方法】利用Red/ET系统结合rpsL反向筛选BAC修饰系统对AcMNPV lef-10进行点突变,由于lef-10和必需基因vp1054有重叠,所以在敲除lef-10时只能通过引进点突变使lef-10失活,避免影响vp1054的正常表达。首先,构建rpsL-AMP筛选盒,然后在野生型AcBacmid中引进点突变(方法是通过2次Red/ET重组:第1次重组在野生型AcBacmid lef-10中引进rpsL-AMP抗性筛选标记,形成一次重组Bacmid,第2次重组是在一次重组Bacmid中引进含点突变的lef-10片段),再利用链霉素反向筛选去除rpsL-AMP抗性筛选标记,同时引入相应的点突变。将从lef-10基因点突变重组菌中提取得到的AcBacmid与质粒pTriEx1.1和pTriEx-innateP-lef10分别共转染草地贪夜蛾Sf9细胞,同时用野生型AcBacmid与质粒pTriEx1.1共转染Sf9细胞作为对照,显微镜下观察病毒的复制情况,确定lef-10基因是否为AcMNPV的必需基因。【结果】通过对重组Bacmid的PCR鉴定和点突变序列的测定,证明AcMNPVlef-10基因已经发生点突变;通过共转染试验发现,随着转染时间的延长,lef-10补回型病毒和野生型病毒一样,均能在Sf9细胞中复制产生具有感染性的子代病毒粒子BV,从而对邻近细胞造成二次感染,使得细胞死亡,且lef-10补回型重组病毒产生感染性病毒粒子的能力与野生型基本一致;而由于lef-10缺失型重组病毒不能产生有感染性的病毒粒子,所以在被lef-10缺失型重组病毒转染的细胞中,细胞数目不会随着转染时间的增加而发生明显改变。【结论】利用Red/ET重组系统结合rpsL反向筛选系统可以在Ac MNPVlef-10基因中引入点突变,且lef-10是杆状病毒生活周期中的一个必需基因,其缺失会影响杆状病毒的复制。

600MW机组TSI及ETS系统设计优化研究

为解决保护误动引发机组跳闸停机问题,通过针对某火电600MW机组检修环节暴露出的故障问题进行故障点定位与原因分析,从单点保护方案修改、TSI机柜优化、ETS动作逻辑优化、ETS供电电路优化等多个方面提出改进系统功能的技术措施,最终有效排除隐蔽故障,维护汽轮机组的安全可靠运行。

汽轮机ETS系统的控制原理及改进研究

随着我国科学技术水平的不断进步,汽轮机ETS系统应用愈发广泛,该系统能够解决设备老化带来的一系列问题,并可以在运行过程中提高设备运行的安全性。本文将结合汽轮机ETS系统的控制原理,具体分析汽轮机ETS系统的改进,以望借鉴。

1050MW机组ABB-DEH&ETS控制系统可靠性提升研究及应用

大型燃煤电站汽轮机控制系统(DEH)及保护系统(ETS)的可靠性是机组长周期安全稳定运行的核心,本文以ABB SymphonyPlus、ABB S+Safety 800xI分散控制系统首次在上汽厂超超临界改进型机组的应用实践,在项目设计选型、测试验收、现场复原以及长周期运行过程中,从系统硬件、系统软件、控制逻辑、在线试验、应急预案等几个方面的可靠性进行研究应用,为印尼国家电网稳定的“不间断电源UPS”做出中国贡献。

基于ET2007服装CAD打版系统的转省方法及技巧探讨

为研究ET2007服装CAD打版系统的转省功能,在文化式女装上衣原型上进行了大量的转省实验,找到了用转省工具、智能笔和旋转工具实现转省的方法,总结了各自的特点及其适用场合,并针对在实验中发现的问题提出了对策,使各种类型的转省设计都能顺利完成.

基于HOLLiAS LK PLC的电厂ETS系统

汽轮机由锅炉产生的高温高压蒸汽带动高速运转,是火力发电厂的关键动力设备,汽轮机的紧急跳闸系统（ETS）是发电厂对系统可靠性要求最高的子系统。传统上,200MW以下机组的汽轮机本体保护都是用继电器搭建的,可靠性差,

ET2000系统打板的技巧

介绍了第三代智能化服装CAD软件ET2000系统的特点,指出了服装打板时智能工具的使用技巧和应注意的事项。

神华某电厂300MW机组ETS控制系统技术升级设计及应用

针对Modicon Quantum系列PLC控制系统设备老化、抗干扰能力差、通信易中断等难题,以神华某电厂300 MW机组的ETS系统技术改造为背景,采用EIO网络框架,硬件升级与软件优化方法,设计与完善了原ETS控制系统,优选140CPU67160自带热备功能及通信二合一、双冗余CPU控制器,搭建与建设整个流程实现了系统设备的最优更换,优化控制策略。该技术成功应用于神华某电厂,保证了机组的稳定运行,提高了机组控制系统智能化水平,降低了维修强度,具有较好的技术经济性。

汽轮机ETS保护系统电源切换回路技术改进

分析了对海勃湾电厂2×300MW机组ETS保护系统的电源设计存在的问题,提出并落实了技术整改方案,保证了机组安全稳定运行,提高了发电经济效益。

研发中的美国强天气(龙卷、大冰雹和局地强降水)预报系统FACETs

美国强风暴实验室（NSSL）正在研发的FACETs系统预报对象包括龙卷、大冰雹和局地强降水,这套系统把预报信息同社会影响、人的心理行为和经济效益等学科相结合,把预报信息转化为同用户直接相关的问题.

广州珠江电厂3号机组ETS系统的DCS一体化改造

广州珠江电厂对 3号机组进行DCS一体化改造 ,并将ETS也纳入了DCS改造范围。介绍了 3号机组改造后ETS的系统组成 ,电控系统各设备功能及特性 ,ETS电控系统所实现的功能及方式 。

ETS系统可靠性分析

本文介绍了火电厂汽轮机ETS系统的组成。同时,对该系统的原设计进行了安全可靠性分析论述,提出了解决方案并逐步进行了实施。

基于DEH系统的ETS/METS控制系统技术升级设计及应用

施耐德PLC控制系统以太网模块固件存在信息安全隐患。基于DEH系统的ETS/METS控制系统,硬件升级与软件优化方法,设计与完善了原ETS控制系统,实现了系统设备的最优更换,优化控制策略。该技术成功应用于安庆某电厂,从根本上杜绝了原PLC设备信息安全隐患,提高了机组控制系统安全性、可靠性、经济性。

ETS系统在24MW汽轮机的应用实现

阐述了紧急停机系统ETS在电厂的重要性,重点介绍紧急停机系统ETS的基本结构、主要功能及配置,并给出系统应用实例,介绍联锁控制的实现过程。该系统是DCS和PLC成功的组合运用,取得了很好的效果。

ETS系统在济钢燃气发电工程中的应用

ETS系统可分为PLC程序控制系统、HMI监控系统,包括主汽门关闭保护回路、超速限制和电超速保护、抽汽逆止门控制及保护汽轮机信号和联锁等,对整个汽机监视保护系统过程进行自动控制和管理。应用表明,该系统运行稳定,可利用率达到99.99%,信号进入至输出响应小于200ms,保证了机组的安全停用。

汽轮机ETS系统的控制原理及改进

在发电厂汽轮机组运行的过程中,ETS系统发挥了十分关键的作用,该系统的运行不仅可以显著提升劳动生产率和电能质量,还可以进一步降低发电成本、提高经济效益。基于此,本文对汽轮机ETS系统的控制原理展开分析,并在此基础上提出从超速保护、位移保护以及操作显示面板等环节对系统运行加以改进,切实提升汽轮机组ETS系统运行的安全性与稳定性,从而进一步为同行业后续发展运行提供借鉴参考。

基于PLC的ETS系统与DCS系统通讯的实现

介绍将西门子S7-300PLC构成的ETS系统与德国H&B的DCS系统进行通讯,以DCS系统为主站对ETS系统监视,说明使用MODBUS协议和RS485接口的通讯的方法、注意事项和ETS、DCS系统的参数设置。

汽轮机ETS保护系统可靠性分析及改进

ETS指的是汽轮机危急遮断系统,汽轮机在运行时,当其重要参数超出限定数值时,ETS系统便会发出遮断指令,进而使所有蒸汽进汽阀门得以关闭,使机器得到保护。由此可见,该系统对汽轮机发电组安全运行,有着十分重要的作用。若是该系统得不到有效运行,便可能造成误动或者是拒动,进而可能造成汽轮机部件损坏。本文以某火电厂为例,在对ETS系统结构及可靠性做出分析的基础上,提出改进方法与措施。

ETS系统通信故障引起的跳机事故分析与技术改进

用PLC实现ETS系统的功能已在大多数电厂得到应用，本文介绍上海汽轮机厂机组配套提供的ETS系统在实际应用中出现的跳机事故及提出系统改造方法，对采用该系统的用户具有参考价值。