ET-1受体拮抗剂、NO供体联合输注防治急性缺血性肾衰的实验研究

目的 观察ET 1受体拮抗剂、NO供体联合输注对实验性急性缺血性肾衰的防治作用。方法 大鼠急性缺血性肾衰模型 ,于再灌注同时输注ET 1受体拮抗剂、NO供体 ,观察肾皮质血流、肾功能、肾脏病理改变。结果 ET 1受体拮抗剂、NO供体联合输注可显著改善缺血再灌注后的肾皮质缺血 ,减轻肾功能及组织学损害。结论 联合使用ET 1受体拮抗剂、NO供体可通过改善肾血流减轻急性缺血性肾衰后的肾功能损害。

内皮素-1受体拮抗剂的筛选和药理学研究

目的对军事医学科学院毒物药物研究所合成的系列内皮素受体拮抗剂进行筛选,并对有效化合物进行抗肺动脉高压的药理学研究。方法放射配体-受体结合实验测定受试化合物对ETA和ETB受体亚型的亲和力;在ET-1诱发离体大鼠主动脉环收缩、整体大鼠颈动脉压升高实验模型上进行生物活性筛选;在野百合碱诱发大鼠肺动脉高压实验模型上对受试化合物进行抗肺动脉高压的药效学研究。结果部分化合物与ETA受体的亲和力比与ETB受体的亲和力高万倍以上,并能有效地抑制ET-1诱发的离体大鼠主动脉环收缩,其中1μmol.L-1的受试化合物ETP-508可使ET-1累加浓度收缩效应曲线平行右移,且最大效应不变。此外,3.7μg.(0.5ml)-1.kg-1ET-1所致的大鼠体动脉压升高也可被2mg·kg-1ETP-508等化合物静脉注射所阻断;更进一步,ETP-508和BQ-485静脉给药(0.4mg.h-1)还可逆转80mg·kg-1野百合碱皮下一次注射诱发的大鼠肺动脉高压。结论以上结果提示,ETP-508和BQ-485是高选择性的ETA受体竞争性拮抗剂,能有效地抑制野百合碱诱发的大鼠肺动脉高压。

内皮素-1 B型受体拮抗剂通过抑制NLRP3/IL-1β炎症小体通路缓解ApoE^(-/-)小鼠的动脉粥样硬化

目的探讨内皮素-1(ET-1)B型受体拮抗剂BQ-788治疗动脉粥样硬化的效果及其分子机制。方法使用24只8周龄ApoE^(-/-)小鼠(遗传背景为C57BL/6小鼠)构建晚期动脉粥样硬化模型,并分为饲喂常规啮齿类动物基础饲料的正常饮食(CHOW)组、饲喂高脂饮食(HFD)饲料的HFD组和饲喂HFD饲料并给予BQ-788治疗的HFD+BQ-788组。ELISA测定各组小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。Western blot测定小鼠胸主动脉血管NLRP3炎症小体相关因子Caspase-1 p20、Caspase-1 p45、NLRP3和IL-1β的表达水平。流式细胞术测定小鼠全血单核细胞及单核细胞Ly6C^(high)、Ly6C^(low)亚型细胞数量。油红O染色测定小鼠胸主动脉血管动脉粥样硬化斑块面积;HE染色测定斑块“帽”的厚度;Masson染色观察斑块胶原沉积情况。结果与CHOW组相比,HFD组小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平显著升高(P<0.01);炎症小体相关因子Caspase-1 p20、NLRP3和IL-1β的表达水平显著上调(P<0.01);单核细胞及全血中促炎单核细胞Ly6C^(high)数量显著增加(P<0.01),全血中抗炎单核细胞Ly6C^(low)数量显著减少(P<0.01)。与HFD组相比,HFD+BQ-788组小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显回落(P<0.05);炎症小体相关因子Caspase-1 p20、NLRP3和IL-1β的表达水平显著下调(P<0.01);单核细胞及全血中促炎单核细胞Ly6C^(high)数量显著回落(P<0.01),全血中抗炎单核细胞Ly6C^(low)数量显著增加(P<0.01);小鼠胸主动脉血管的油红O阳性着色面积占比显著较低(P<0.01);动脉粥样硬化斑块“帽”的平均厚度显著较小(P<0.01);斑块的胶原沉积范围明显较小。结论ET-1B型受体拮抗剂BQ-788可通过抑制NLRP3/IL-1β炎症小体通路缓解ApoE^(-/-)小鼠的动脉粥样硬化。

内皮素-1受体拮抗剂PD142893对肝硬化大鼠肝脏Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达的影响以及和肝纤维化关系

目的探讨内皮素受体拮抗剂是否对CCl4引起的大鼠肝纤维化有阻滞作用。方法实验中采用的是通过CCl4损伤引起的肝硬化门脉高压大鼠模型，随机分为正常对照组、肝硬化模型组、PD142893（ETA／B双受体拮抗剂）治疗组。治疗组在用CCl4造模的同时皮下注射PD142893（12．5μg／kg），2次／d，直到造模结束，取部分肝组织用甲醛固定后行HE染色和Masson染色并进行肝硬化分级；然后根据染色结果制作组织芯片并行免疫组化染色，检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达并进行半定量分析。取部分肝组织用RT-PCR法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的mRNA表达并进行半定量分析。结果肝硬化分级和Masson染色胶原半定量结果证实肝硬化模型组、PD治疗组大鼠肝纤维化程度明显加重，与对照组比较有非常显著性差异（P〈0．01）；而PD治疗组的肝纤维化程度较模型组明显减轻，差别有显著性意义（P〈0．05）。Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组化蛋白表达及mRNA表达结果证实肝硬化模型组与对照组、PD治疗组比较明显上调（P〈0．05）。结论ET A/B双受体拮抗剂可以有效地下调CCl4引起的肝纤维化大鼠的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达和mRNA表达，进而抑制大鼠肝纤维化的发展。