烷化溶血磷脂ET-18-OCH3对K562细胞作用的研究

为研究烷化溶血磷脂ET-18-OCH3(ALP)的抗白血病效果,本文以K562细胞为研究对象,通过台盼蓝拒染法测定ALP作用后K562细胞的生长抑制率和生长曲线;甲基纤维素半固体培养法测定克隆原细胞的存活率;流式细胞仪检测K562细胞P210蛋白表达;RT-PCR半定量法测定细胞的bcr-abl mRAN;采用流式细胞仪进行DNA分析以及电镜观察细胞形态学改变。结果显示,K562细胞经ALP处理后细胞生长明显受抑制,呈作用时间和剂量的依赖性,IC_(50)为31.6(24),22.3(48h),14.8(72h)μg/ml;细胞增殖速度显著降低,克隆原细胞存活曲线呈指数型,而正常对照组细胞的CFU-GM则未受影响;ALP还可使K562细胞P210及bcr-abl mRNA水平下调,并有诱导细胞凋亡的作用。说明ALP对K562细胞生长具有明显抑制作用,并有诱导细胞凋亡作用,提示ALP具有一定的抗白血病效应。

PTE-ET-18-OCH_3诱导线粒体聚积并促发凋亡

目的探讨PTE-ET-18-OCH3(ET-18-OCH3荧光拟似物)引起Jurkat细胞凋亡的作用机制。方法应用PTE-ET-18-OCH3染色、Mito Traker(red)染色和TUNEL试验检测药物的沉积部位及药物促发细胞凋亡的途径。结果应用PTE-ET-18-OCH3处理肿瘤细胞后,PTE-ET-18-OCH3染色和Mito Traker(red)共同染色可见,药物沉积于线粒体,并诱导线粒体的聚集;TUNEL试验可见,处理组细胞染色体DNA链断裂,Propidium iodide荧光显示细胞核发生碎裂并溶解。结论PTE-ET-18-OCH3主要沉积于肿瘤细胞的线粒体并诱导线粒聚集,随后通过线粒体诱导的凋亡通路促发肿瘤细胞的凋亡。