清利活血汤配合三黄生肌纱条对糖尿病溃疡大鼠肉芽组织中内皮素一氧化氮及血管内皮生长因子含量的影响

目的:观察清利活血汤配合三黄生肌纱条对糖尿病足溃疡大鼠肉芽组织中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血管内皮生长因子(VEGF)含量的影响,探讨其促进溃疡愈合的作用机理。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、正常组、治疗组、对照组4组,除正常组外,余组均用高脂饲料喂养4周后,腹腔注射STZ30mg/Kg制作2型糖尿病模型,成功后4组动物以10%水合氯醛1ml/100g体重腹腔注射麻醉下大鼠背部脊柱左侧相同部位制作直径2cm溃疡,分笼饲养。各组从术后第1天开始灌胃给药及溃疡换药,分别为:治疗组:清利活血汤14.5g/kg.d,三黄生肌纱条换药1次/d;对照组:盐酸二甲双胍片72.4mg/kg.d,凡士林纱条换药1次/d;模型组、正常组:生理盐水2ml/次.d;生理盐水纱条换药1次/d。用药15天后处死大鼠,切取溃疡面肉芽组织,放射免疫法测定ET-1含量,硝酸还原酶法测定NO含量,RT-PCR法测定VEGF含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠ET-1含量均明显升高(P<0.01),NO、VEGF含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组、对照组ET-1含量明显降低(P<0.01),NO、VEGF含量明显升高(P<0.01);与对照组比较,治疗组鼠ET-1含量均明显降低(P<0.05),NO、VEGF含量明显升高(P<0.05)。结论:清利活血汤配合三黄生肌纱条可下调糖尿病足溃疡大鼠肉芽组织ET-1含量,提高NO、VEGF含量从而加速溃疡愈合,其疗效优于二甲双胍+凡士林。

无花果果实及乳浆对人黑色素瘤A375细胞的抑制作用及其作用机制研究

目的考察无花果实及乳浆不同极性部位的体外抗黑色素瘤活性,并探讨其作用机制。方法采用溶剂提取法制得无花果提取物,系统溶剂萃取法得乳浆不同极性部位和醇沉纯化部位供试品;采用MTT法、划痕实验、Transwell侵袭实验和流式细胞仪凋亡检测考察供试品对人恶性黑色素瘤细胞A375的增殖、迁移、侵袭和凋亡影响;构建A375细胞和人脐静脉内皮细胞HUVEC的共培养体系,通过侵袭实验、成管实验体外模拟肿瘤细胞对内皮血管形成;ELISA法测定相关细胞因子水平。结果无花果提取物和乳浆乙酸乙酯部位抑制肿瘤细胞A375的迁移和侵袭(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低A375细胞的超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脱氢酶(LDH)含量(P<0.001),提高一氧化氮(NO)含量(P<0.05,P<0.01,P<0.001);乳浆醇沉部位抑制A375细胞迁移和侵袭(P<0.01,P<0.001),对A375细胞的直接抑杀和促凋亡效果较好;共培养后HUVEC细胞侵袭能力提升,血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮素1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOs)分泌增多(P<0.001),且供试品(200~400μg·mL;)给药后可明显逆转(P<0.05,P<0.001)。结论无花果提取物及乳浆乙酸乙酯、醇沉部位具有抑制A375细胞增殖、迁移和侵袭作用,从能量代谢方面抑制黑色素瘤生长,并可能通过eNOs/VEGF/ET-1途径抑制肿瘤的新生血管形成。