LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中ET-26盐酸盐及其代谢产物ET-acid

该文通过建立LC-MS/MS方法,采用全扫描离子(MRM)检测方式,测定静脉注射给药后Beagle犬中ET-26盐酸盐及其代谢产物依托咪酯酸的含量。采用色谱柱Agilent Extend-C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm),流动相为水(0.01%NH3,用乙酸调pH至9.0)-乙腈,体积比35:65,采用ESI离子源,正离子模式下定量分析碎片离子质荷比(m/z)有ET-26盐酸盐275.3/105.1,依托咪酯酸m/z 217.0/113.1,依托咪酯杂质C(内标)m/z 259.0/155.1。ET-26盐酸盐与依托咪酯酸分别在3.225~2 090 ng/mL、3.253~2 108 ng/mL范围内,线性关系良好;定量限分别为3.225 ng/mL、3.253 ng/mL;检测限分别为0.97 ng/mL、1.00 ng/mL;日内、日间精密度RSD均小于15%;回收率分别在86.57%~105.03%、95.94%~98.27%范围内。该方法成功应用于Beagle犬中ET-26盐酸盐的药代动力学参数测定。结果表明该方法可以灵敏、有效地测定Beagle犬血浆中ET-26盐酸盐及其代谢产物依托咪酯酸的含量。

紫外分光光度法测定ET-26盐酸盐的离解常数

目的采用紫外分光光度法测定ET-26盐酸盐的离解常数(p Ka)。方法将ET-26盐酸盐溶于系列BrittonRobinson缓冲溶液中,并选择在ET-26盐酸盐适合的波长处分别测定其吸光度并计算其p Ka值。结果 ET-26盐酸盐的p Ka值为4.14。结论所用方法操作简单易行、结果准确可靠。ET-26盐酸盐的p Ka测定结果对进一步研究ET-26盐酸盐的制剂研究及其在生物体内的吸收、分布和代谢过程具有重要的意义。

顶空气相色谱法测定ET-26盐酸盐中的7种残留溶剂

目的采用顶空气相色谱法测定ET-26盐酸盐中7种有机溶剂[甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙二醇甲醚、溴乙基甲醚、二甲基甲酰胺(DMF)]的残留量。方法甲醇、乙醇、丙酮、DMF为一组,乙酸乙酯、乙二醇甲醚、溴乙基甲醚为另一组,分别采用分流/不分流的顶空气相色谱法,选用DB-624毛细管柱(30 m×530μm,3μm)为分析柱,N2为载气,氢火焰离子化检测器(FID)检测,以程序升温方式使各残留溶剂达到完全分离。结果在两种色谱条件下,7种残留溶剂的线性关系、回收率、精密度及灵敏度均达到了要求。结论所用方法灵敏、准确,可用于ET-26盐酸盐中残留溶剂的检查。

HPLC测定ET-26盐酸盐中的有关物质

目的采用HPLC法测定ET-26盐酸盐中的有关物质。方法采用Welch Xtimate C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.5%碳酸铵溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速1.5 m L·min-1,柱温30℃,检测波长240 nm,进样量10μL。结果在选定的色谱条件下,主成分峰与各杂质峰完全分离,且各杂质峰的分离度良好;ET-26盐酸盐、依托咪酯酸和依托咪酯的线性范围均为0.5~20μg·m L^(-1),检测限分别为0.5、0.4、0.6 ng,定量限分别为1.6、1.3、1.8 ng。结论所用方法专属性强、灵敏度高,可用于ET-26盐酸盐中有关物质的检查。

容量法测定ET-26盐酸盐的含量

目的比较不同容量法测定ET-26盐酸盐的含量。方法分别采用加乙酸汞的高氯酸非水电位滴定法、加乙酸酐的高氯酸非水电位滴定法及以乙醇为溶剂的氢氧化钠电位滴定法来测定ET-26盐酸盐的含量。结果 3种电位滴定法的滴定结果无统计学差异。结论无汞污染的加乙酸酐的高氯酸非水电位滴定法和以乙醇为溶剂的氢氧化钠电位滴定法的测定结果准确,重复性及稳定性良好,均可用于测定ET-26盐酸盐的含量。