新型选择性ETA受体拮抗剂GFO63抗肺动脉高压作用及其对ET-1诱导的心肌细胞肥大的影响

目的：评价新型选择性ETA受体拮抗剂GF063（di—n—butylaminocarbamyl—L-Leucyl—D-Tryptophanyl—D-4-chloro—Phe）抗肺动脉高压作用及其对ET-1诱导的心肌细胞肥大的影响。

心脏特异性ETA受体敲除减轻寒冷刺激导致的心肌肥厚和收缩功能障碍

寒冷刺激与氧化应激及心脏功能异常有火、内皮素（endolhelin，ET）系统在维持心肌细胞内环境稳定中起重要作用，可能参与寒冷刺激引起的心血管功能障碍。本研究旨在明确ET—1在寒冷刺激导致的心脏结构、功能异常中的作用。

Class Ⅲ PI3K/Beclin-1自噬通路参与mmLDL上调小鼠肠系膜动脉ETA受体的研究

目的探讨弱氧化性低密度脂蛋白(minimally modified low density lipoprotein,mmLDL)上调在体小鼠肠系膜动脉ETA受体的作用(endothelin type A receptors,ETA)并考察自噬是否参与这一过程。方法小鼠尾静脉注射mmLDL,腹腔注射ClassⅢPI3K自噬通路抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA),探究自噬在mmLDL给药处理小鼠中的作用,微血管张力描记仪观察内皮素-1(endothelin-1,ET-1)引起的小鼠肠系膜动脉收缩量效曲线的变化,RT-PCR定量ETA受体mRNA,Western blot检测ETA受体和ClassⅢPI3K、Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62及p-NF-κB、NF-κB的蛋白水平表达。结果mmLDL引起ET-1收缩量效曲线明显增强,表现为Emax值由生理盐水(NS)组的(184.87±7.46)%上升为(319.91±20.31)%(P<0.001),pEC50值由NS组的(8.05±0.05)上升为(9.11±0.09)(P<0.01)。mmLDL在上调ClassⅢPI3K、beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ和下调p62蛋白水平的同时,也引起ETA受体mRNA水平、蛋白表达明显增加,增加了p-NF-κB的蛋白水平;腹腔注射3-MA抑制了mmLDL的这些作用。结论mmLDL能通过ClassⅢPI3K/Beclin-1通路激活自噬及下游NF-κB通路上调ETA受体。

ERK1/2通路参与ET_A和ET_B受体介导的离体肠系膜上动脉收缩研究

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在内皮素1(ET-1)的两个G蛋白偶联受体ET_A和ET_B介导的收缩机制。方法用大鼠肠系膜上动脉器官培养模型,以敏感的离体药理学实验方法记录培养前后血管平滑肌张力,实时定量的PCR测定培养前后受体mRNA表达水平的变化。结果S6c不引起新鲜的肠系膜上动脉收缩,培养后ETB受体mRNA表达水平上调,介导的收缩明显增强(P<005);而ETA受体介导的收缩功能和mRNA均变化不大。低浓度的SB386023(10-5mol·L-1)降低S6c引起的最大收缩(Emax从239%±26%降至89%±13%,P<001),而对ET1引起的最大收缩并无影响(Emax271%±19%vs251%±16%,P>005);高浓度的SB386023(10-4mol·L-1)明显抑制ETA受体介导的收缩。结论ET-1通过ET_A受体介导新鲜动脉的收缩;动脉培养后表达ET_B受体;ERK1/2信号转导通路对ET_B受体的作用强于ET_A受体。

除草剂敌草快(Diquat)所致的大鼠胎儿动脉管收缩与血管紧张素及其受体的关系

为研究除草剂敌草快(Diquat)对胎儿动脉管的毒性作用机理,进行了以下3个试验(1)取妊娠21d大鼠20只,随机分成5组,每组4只,于不同时间皮下注射敌草快7mg/kg,对照组注射等量生理盐水。取出胎儿,冷冻后,观察动脉管收缩情况。(2)取妊娠21d大鼠16只,随机分成4组,每组4只。试验1组母体皮下注射敌草快7mg/kg,2、3组通过子宫壁给胎儿分别注射0.05mL生理盐水和0.05mL(0.05mg)非选择性血管紧张素(ET)受体ETA/ETB拮抗药TAK-044后,再母体皮下注射敌草快7mg/kg,取出胎儿,观察动脉管收缩情况。(3)取妊娠21d大鼠16只,随机分成4组,每组4只。试验1组母体皮下注射敌草快7mg/kg,2、3组通过子宫壁给胎儿分别注射0.05mL生理盐水和0.05mL(0.02mg)选择性ETA受体拮抗药BQ-123后,再母体皮下注射敌草快7mg/kg,取出胎儿,观察动脉管收缩情况。结果表明,敌草快对妊娠末期胎儿动脉管有毒性作用,胎儿注射TAK-044和BQ-123都不引起动脉管收缩。由此可见,敌草快所致胎儿动脉管收缩与ET有关,且有ETA受体作为媒介参与。

选择性ET_A受体拮抗剂安贝生坦对急性肺栓塞小鼠的保护作用

目的探讨ET A受体拮抗剂对急性肺动脉栓塞小鼠的保护作用。方法将160只小鼠分随机分为两组,一组用胶原+肾上腺素(collagen+epinephrine)制备小鼠急性肺栓塞模型(胶原组80只),另一组用凝血酶(thrombin)制备小鼠肺栓塞模型(凝血酶组80只)。每组又均分为4个亚组,在制备栓塞模型前30 min,用0.9%生理盐水和不同剂量的安贝生坦(1 mg/kg、5 mg/kg、20 mg/kg)对不同亚组的小鼠灌胃,观察急性肺栓塞小鼠的存活时间、死亡率、肺系数及肺组织病理改变情况。结果随着ETA受体选择性拮抗剂安贝生坦剂量的增加,肺动脉栓塞小鼠模型的存活时间逐渐延长,死亡率明显下降且肺系数逐渐减小;急性肺栓塞模型小鼠肺病理表现为肺动脉内多处血栓,肺泡壁和间质增厚,可见白细胞浸润和炎性渗出液。结论 ETA受体选择性拮抗剂对肺栓塞小鼠有保护作用,延长栓塞后小鼠的存活时间,降低肺栓塞引起的死亡率。

ET_A受体拮抗剂杨梅酸A的半合成研究

合成了潜在的特定ETA受体拮抗剂杨梅酸A。合成方法是通过廉价易得的齐墩果酸为原料,通过3-OH Dess-Martin(DMP)氧化、臭氧化、液氨还原等11步反应,得到杨梅酸A,中间体及目标产物的结构通过1H NMR、13C NMR进行了表征。

阿曲生坦:治疗前列腺癌的内皮素ET_A受体拮抗剂

阿曲生坦为一种口服有效的选择性内皮素ETA 受体拮抗剂。拮抗ET 1引起的大鼠动脉环的收缩 ,抑制EF 1对癌细胞系的促有丝分裂作用。单次口服阿曲生坦消除半衰期 (t1/2 β)为 2 0～ 2 5h ,组织分布广泛。临床Ⅰ ,Ⅱ期治疗激素无反应的前列腺癌的研究表明 ,阿曲生坦耐受良好 ,明显延迟肿瘤的发展 ,降低转移癌的骨标记。最常见的副作用为轻中度的外周水肿、鼻炎和头痛。

内皮素A受体拮抗剂BQ123抗内皮素的心律失常作用

雄性ＳＤ大鼠４２只经冠状动脉口注射内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２０，观察其对内皮素致心律失常作用的影响。结果表明，ＢＱ１２００．１１－１．７５ｕｇ／ｋｇ预处理后，内皮素引起的心律失常记分（ＡＳ）呈剂量依赖性降低趋势，ＢＱ１２３为７ｕｇ／ｋｇ／ＡＳ降为０，与ＥＴ组比较有非常显著差异（Ｐ〈０．０１）。ＢＱ１２３拮抗内素致心律失常作用可能通过拮抗ＥＴＡ受体实现。

BQ-123在动脉粥样硬化中的抗炎效应

目的观察内皮素A(ETA)受体拮抗剂BQ-123在家兔动脉粥样硬化(AS)中的抗炎效应。方法32只雄性新西兰大白兔随机分成4组(n=8),对照组饲喂普通饲料10周;模型组、辛伐他汀组和BQ-123组均饲喂高脂饲料10周。采用ELISA法检测耳中动脉血清中前列腺素E2(PGE2)和ET-1水平;免疫组化SP法检测主动脉组织ET-1、巨噬细胞和COX-2蛋白表达。结果①分组饲喂10周后,模型组、辛伐他汀组和BQ-123组血清ET-1和PGE2水平均较对照组明显升高(P<0.01);但辛伐他汀组和BQ-123组均较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01);AS兔血清中ET-1与PGE2水平成正相关(r=0.57,P<0.01)。②辛伐他汀组和BQ-123组AS斑块ET-1、巨噬细胞源泡沫细胞、COX-2蛋白阳性表达均较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),而BQ-123组又较辛伐他汀组进一步降低(P>0.05)。结论ET-1通过激活ETA受体可以导致家兔AS斑块COX-2表达上调和PGE2生成增多,选择性ETA受体拮抗剂BQ-123在家兔AS中具有抗炎效应。

MN9202有抑制成纤维培养液引起心肌肥大的作用

目的：研究二氢吡啶类钙拈抗剂MN9202抑制成纤维条件培养液引起心肌肥大的作用。方法：在培养新生大鼠心肌细胞中，分别加入MN9202、拉西地平（larcidipine）、ETA受体拮抗剂BQ123、蛋白激酶c（proteinkinaseC，PKC）通路的阻断剂白屈菜季氨碱（chelerythrine，che）、AT。

内皮素1对家兔动脉粥样硬化斑块环氧合酶2表达的影响

目的:观察由内皮素1激活的内皮素A受体对家兔动脉粥样硬化斑块环氧合酶2表达的影响。方法:实验于2006-03/09在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心完成。①实验分组:32只雄性新西兰大白兔完全随机设计分成基础组、模型组、BQ-123组以及辛伐他汀组,每组8只。②实验方法:基础组饲喂普通饲料10周,其余3组均饲喂高脂饲料(1%胆固醇、10%蛋黄粉、5%猪油、84%普通饲料)10周。模型组于第6周开始静脉注射生理盐水(4mL/d)连续注射5周,作为阴性对照;BQ-123组于第6周开始用微量输液泵静脉点滴选择性内皮素A受体拮抗剂BQ-123(4mL/d,30min滴完),连续点滴5周;辛伐他汀组于第6周开始添加药物饲料(含辛伐他汀10mg/d)连用5周。③实验评估:饲喂10周后,采耳动脉血检测血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇以及低密度脂蛋白胆固醇水平;采用免疫组织化学SP法检测主动脉标本中组织内皮素1、巨噬细胞及环氧合酶2蛋白表达。结果:纳入动物32只,均进入结果分析。①4组血清总胆固醇水平比较:模型组、BQ-123组及辛伐他汀组高于基础组(P均<0.01)。BQ-123组及辛伐他汀组低于模型组(P均<0.05)。②4组血清三酰甘油水平比较:模型组、BQ-123组及辛伐他汀组高于基础组(P均<0.01)。BQ-123组及辛伐他汀组低于模型组(P均<0.01)。辛伐他汀组高于BQ-123组(P<0.01)。③4组血清低密度脂蛋白胆固醇水平比较:模型组、BQ-123组及辛伐他汀组高于基础组(P均<0.01)。辛伐他汀组低于模型组(P<0.05)。④4组血清高密度脂蛋白胆固醇水平比较:模型组、BQ-123组及辛伐他汀组低于基础组(P均<0.01)。BQ-123组高于模型组(P<0.01)。⑤BQ-123组及辛伐他汀组家兔动脉粥样硬化斑块内皮素1、巨噬细胞源泡沫细胞、环氧合酶2蛋白阳性表达均较模型组明显降低,BQ-123组家兔动脉粥样硬化斑块内皮素1、巨噬细胞源泡沫细胞、环氧合酶2蛋白阳性表达又较辛伐他汀组进一步降低。结论:内皮素1激活的内皮素A受体可以导致家兔动脉粥样硬化斑块环氧合酶2表达的上调;选择性内皮素A受体拮抗剂可以预防家兔动脉粥样硬化进程的发展。

地塞米松抑制慢性心衰大鼠心肌中内皮素信号通路的过度激活而改善心肌纤维化

目的:观察地塞米松对慢性心衰大鼠心肌中内皮素(ET)信号通路的过度激活与氧化应激的干预作用。方法:雄性SD大鼠,通过冠脉结扎6周造成慢性心衰模型。分为慢性心衰组、地塞米松组,另设假手术组作为阴性对照。地塞米松组动物在饮水中按1μg/mL的浓度给予地塞米松治疗。连续治疗6周后,取心脏进行Masson三色法染色,以检测心肌纤维化;RT-PCR法检测心肌组织中ETA受体、NF-κB和一氧化氮合酶(iNOS)的基因表达水平。结果:与假手术组相比,慢性心衰组大鼠心肌纤维化显著,地塞米松能有效改善心衰大鼠心肌组织的纤维化;心衰大鼠心肌组织中ETA受体、NF-κB和iNOS的基因表达水平明显上调,而地塞米松可使心衰大鼠心肌中ETA受体、NF-κB和iNOS的基因表达水平显著下调。结论:地塞米松通过下调ETA受体,抑制ET信号通路的过度激活和抗氧化作用,有效改善慢性心衰大鼠的心肌纤维化。

REGULATION OF HUMAN RETINAL BLOOD FLOW BY ENDOTHELIN-1

There is evidence from in vitro and animal studies that endothelin is a major regulator of retinal blood flow. We set out to characterize the role of the endothelin-system in the blood flow control of the human retina. Two studies in healthy subjects were performed. The study design was randomized, placebo-con-

血管紧张素受体和内皮素受体双重受体拮抗剂药效团模型的研究(英文)

使用Catalyst软件中的HipHop模块分别产生了AT1受体拮抗剂和ETA受体拮抗剂的三维药效团模型。AT1受体拮抗剂最优药效团模型(Hypo-AT1-7)和ETA受体拮抗剂最优药效团模型(Hypo-ETA-1)均经过仔细的验证。两种药效团含有5个药效团特征[氢键受体(A)、脂肪族疏水(Z)、阴离子基团(N)、芳环(R)及芳环疏水(Y)],这5个特征是受体结合力的决定性因素。双重AT1和ETA受体拮抗剂可以分别与药效团模型Hypo-AT1-7和Hypo-ETA-1叠合。通过比较叠合最优模型Hypo-AT1-7和Hypo-ETA-1,发现两种模型不仅总结了两种拮抗剂的必要结构特征,并具有共同之处。这个研究结果将作为一个有效的工具用于设计和研究新型AT1和ETA双重受体拮抗剂及其结构关系。

内皮素-1通过L-型钙通道的Ca^2＋内流和钙致钙释放诱导心肌细胞内[Ca^2＋]的增加

本研究利用fura-2-AM荧光成像和膜片钳技术,发现内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)可显著提高大鼠分离心肌细胞内钙离子水平([Ca2+]i),激活心肌细胞钙通道.ETA受体阻滞剂BQ123能够消除ET-1提高[Ca2+]i的效应,而ETB受体阻滞剂BQ788对该效应无影响.用ryanodine受体阻断剂ryanodine(10 μmol/L)预处理,可以使ET-1诱导的[Ca2+]i的增加抑制46.7%.蛋白激酶A(PKA)的抑制剂、蛋白激酶C(PKC)的抑制剂和血管紧张素Ⅱ一型受体(AT1 receptor)的抑制剂都能够抑制ET-1诱导的[Ca2+]i的增加.本研究发现ET-1能够提高全细胞L-型钙通道电流的幅度,增加L-型钙通道单通道的开放概率.并且BQ123完全阻止了ET-1诱导的L-型钙通道开放概率增加的效应.本研究证明了ET-1通过一系列机制调节钙超载,包括L-型钙通道的激活,钙致钙释放(CICR),ETA受体,PKC,PKA和血管紧张素Ⅱ一型受体也参与到了这个途径中.