转录因子ETS1激活长链非编码RNA XIST促进胶质瘤细胞增殖

目的探讨ETS原癌基因1(ETS1)在胶质瘤中的生物学功能及其下游机制。方法生物信息学和免疫组织化学分析ETS1在胶质瘤组织中的表达;实时定量PCR(qRT-PCR)检测ETS1 mRNA和长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录本(XIST)的表达水平。CCK-8和5-乙炔基-2'-脱氧尿苷摄入实验检测细胞增殖。Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bak、Bcl-2)的表达。PROMO数据库预测ETS1与XIST启动子的结合位点。双荧光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀-PCR用于验证ETS1与XIST启动子区域的结合关系。cBioPortal数据库分析ETS1 mRNA与lncRNA XIST在胶质瘤组织中表达的相关性。结果ETS1 mRNA和蛋白的表达水平在胶质瘤中显著上调(P<0.05)。敲低ETS1可显著抑制胶质瘤细胞增殖(P<0.05)并促进细胞凋亡(P<0.05)。ETS1可靶向结合XIST并促进XIST的表达(P<0.05),过表达XIST可逆转敲低ETS1对胶质瘤细胞增殖的抑制作用(P<0.05)以及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05)。结论ETS1在胶质瘤组织中高表达,其可能通过促进lncRNA XIST高表达而减少细胞凋亡和促进胶质瘤细胞增殖。

ETS1在肺腺癌组织中表达变化及对肺腺癌细胞增殖迁移侵袭能力的影响

目的探讨ETS1在肺腺癌发生发展中的作用,为肺腺癌临床预后标志物的筛选和靶向干预提供理论依据。方法利用UAlcan数据库访问癌症基因组图谱(TCGA)数据库和CPTAC数据库,比较肺腺癌组织和癌旁正常组织ETS1表达;根据TCGA数据库肺腺癌组织ETS1表达情况,比较ETS1高、低表达肺腺癌患者的总生存期(OS)。取对数生长期的人肺腺癌A549细胞,随机分为si-NC组、si-ETS1组、vector组、ETS1-OE组,分别转染si-NC、si-ETS1、pcDNA3.1空载质粒、pcDNA3.1-ETS1过表达质粒;采用Western blotting法和实时荧光定量PCR法检测ETS1蛋白、mRNA相对表达量,CCK-8法观察细胞培养0~96 h的增殖能力[以光密度(OD)值表示],细胞划痕实验观察细胞迁移能力(以划痕愈合率表示),Transwell小室实验观察细胞侵袭能力(以侵袭细胞数表示)。结果TCGA和CPTAC数据库分析结果均显示,肺腺癌组织ETS1表达低于癌旁正常组织(P均<0.05)。与ETS1低表达肺腺癌患者比较,ETS1高表达肺腺癌患者OS更长(P<0.05)。与si-NC组及vector组比较,si-ETS1组ETS1蛋白及mRNA相对表达量均降低,ETS1-OE组ETS1蛋白及mRNA相对表达量均升高(P均<0.05)。随着培养时间的延长,各组细胞OD值均呈升高趋势;与si-NC组及vector组同时间点比较,si-ETS1组细胞OD值均升高,ETS1-OE组细胞OD值均降低(P均<0.05)。与si-NC组及vector组同时间点比较,si-ETS1组细胞划痕愈合率、侵袭细胞数均升高,ETS1-OE组细胞划痕愈合率、侵袭细胞数均降低(P均<0.05)。结论肺腺癌组织ETS1表达降低且与患者预后有关,ETS1降表达可促进肺腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭,有成为肺腺癌患者预后标志物及治疗靶基因的潜在价值。

Ets-1和survivin在宫颈鳞状细胞癌中的表达研究

目的 探讨宫颈鳞状细胞癌(宫颈鳞癌)Ets-1和survivin表达与患者临床病理指标的关系。方法应用免疫组化EliVision^(TM) plus二步法检测72例宫颈鳞癌手术标本及30例癌旁宫颈组织Ets-1和survivin表达,分析其表达与患者年龄、癌灶大小、浸润深度、分化等级、TNM分期、术前淋巴转移、术后5年内复发转移7项指标的关系。结果 Ets-1阳性染色可见于细胞核及细胞质,survivin阳性染色多见于细胞质,少见于细胞核。癌组织Ets-1和survivin阳性率(分别为63.9%,72.2%)均显著高于癌旁组织(分别为13.3%,3.3%)(P<0.05)。患者年龄、癌灶大小均与Ets-1和Survivin表达阳性率无关(P>0.05);浸润深度、分化等级、TNM分期、术前淋巴转移、术后5年内复发转移5项指标均与Ets-1和survivin表达阳性率相关(P<0.05)。72例患者Ets-1和survivin共阳率为58.3%,共阴率为22.2%,两者表达呈正相关(r=0.49,P<0.05)。结论 Ets-1和survivin与宫颈鳞癌的发生发展密切相关,两者高水平表达预示癌组织侵袭能力强、分化等级低、病情发展快、淋巴转移早、患者预后差。

miR-155通过调节ETS1促进鼻咽癌细胞侵袭转移能力的研究

目的 观察微小RNA(micro RNA)miR-155在鼻咽癌细胞侵袭转移中的作用。方法 以鼻咽癌CEN1和5-8F细胞作为研究对象,分别转染miR-155 NC、miR-155 inhibitor、miR-155 mimics和ETS1 siRNA,运用Transwell实验检测miR-155和ETS1对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的作用,RT-qPCR检测细胞miR-155表达;蛋白印记实验检测ETS1、MMP2和MMP9蛋白表达。结果 与miR-155 NC组相比,miR-155 inhibitor组细胞侵袭[(237.33±15.63)个vs.(117.00±5.72)个]和迁移[(331.00±9.42)个vs.(262.00±11.05)个]能力均降低(P<0.05),ETS1[1.00 vs.(0.77±0.04)]、MMP2[1.00 vs.(0.58±0.05)]和MMP9[1.00 vs.(0.38±0.06)]蛋白表达均下调(P<0.05);miR-155 mimics组细胞侵袭[(134.00±8.83)个vs.(326.00±12.68)个]和迁移[(236.67±12.39)个vs.(458.00±18.38)个]能力均增强(P<0.05),ETS1[1.00 vs.(1.61±0.06)]、MMP2[1.00 vs.(2.63±0.06)]和MMP9[1.00 vs.(3.38±0.06)]蛋白表达均升高(P<0.05)。与miR-155 mimics组相比,miR-155 mimics+ETS1 siRNA组的细胞迁移[(451.67±22.10)个vs.(229.00±14.45)个]和侵袭[(402.33±8.22)个vs.(229.00±24.91)个]能力均减弱(P<0.05),ETS1[(1.63±0.28)vs.(0.51±0.02)]、MMP2[(2.41±0.02)vs.(1.00±0.07)]、MMP9[(2.37±0.03)vs.(1.02±0.11)]蛋白的表达均下降(P<0.05)。结论 miR-155可能通过调节转录因子ETS1促进细胞外基质降解过程,从而发挥促进鼻咽癌细胞的迁移与侵袭作用。

维吾尔族成人急性髓系白血病(非急性早幼粒细胞白血病)骨髓肾母细胞瘤基因1和转录因子ETS-1表达与预后的关系

目的检测维吾尔族成人急性髓系白血病(非急性早幼粒细胞白血病)[AML(非M3)]病人骨髓肾母细胞瘤基因1(WT1)和转录因子ETS-1表达水平,并探讨二者与AML(非M3)预后的关系。方法选取2015年6月至2018年10月喀什地区第一人民医院血液科收住的105例维吾尔族初诊AML(非M3)病人为观察组。选取同期于该院100例健康体检者为对照组A,及在该院治疗的100例汉族初诊AML(非M3)病人为对照组B。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测病人骨髓WT1基因和转录因子ETS-1的表达水平;多因素logistic回归分析AML的影响因素;采用Kaplan-Meier法描述生存曲线。结果观察组和对照组B白细胞计数明显高于对照组A(P<0.05),血小板计数及血红蛋白明显低于对照组A(P<0.05);观察组和对照组B病人白细胞计数、血小板计数、血红蛋白比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组骨髓WT1、ETS-1表达水平分别为0.83±0.15、0.92(0.22,1.23),明显高于对照组B的0.35±0.14、0.48(0.24,1.01)和对照组A的0.01±0.01、0.02(0.01,0.03)(P<0.05),对照组B骨髓WT1、ETS-1表达水平明显高于对照组A(P<0.05)。logistic回归分析显示,WT1、ETS-1均是AML的危险因素;以AML(非M3)病人WT1、ETS-1中位数为界分为低表达组与高表达组,K-M显示WT1、ETS-1低表达组生存率高于高表达组(P<0.05)。结论维吾尔族成人AML(非M3)病人骨髓WT1和ETS-1水平呈高表达,且WT1和ETS-1高表达与疾病的发生及病人预后不良有关。

眼络通方对大鼠视网膜静脉阻塞模型ET-1/ETAR信号通路的影响

目的探讨眼络通对大鼠视网膜静脉阻塞(RVO)模型ET-1/ETAR信号通路的影响。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(Control),模型对照组(Model)、波生坦组(Bosentan)、眼络通组(Yanluotong),以光化学法建立RVO模型SD大鼠各12只,连续给药3周。在第3周时处死SD大鼠,取血清用于Elisa检测,取视网膜组织用于荧光定量PCR与免疫荧光检测,测定其中ET-1、ETAR、VEGF、TNF-α、IL-6蛋白与mRNA表达水平。结果Elisa检测发现模型对照组血清IL-6、TNF-α、VEGF较空白对照组升高(P<0.01),波生坦和眼络通方干预3周后比模型对照组均下降(P<0.01);免疫荧光显示相对于空白对照组,RVO模型对照组ET-1、IL-6、TNF-α、VEGF表达量均增多,波生坦和眼络通方治疗后表达量均呈下降趋势。对于ET-1、ETAR、VEGF mRNA表达量,模型对照组较空白对照组上调(P<0.01),波生坦和眼络通方均能下调上述基因mRNA的表达(P<0.01)。结论ET-1/ETAR信号通路在RVO发病过程中被异常激活,眼络通方可通过ET-1/ETAR信号通路发挥抑制视网膜血管收缩、减轻炎症反应、抑制VEGF作用,干预RVO病情进展。

二陈汤合三子养亲汤治疗慢性阻塞性肺疾病(痰湿蕴肺证)疗效及对肺功能、IFN-γ、ET-1的影响

目的探究二陈汤合三子养亲汤治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)(痰湿蕴肺证)的疗效及对肺功能、伽马干扰素(interferon γ,IFN-γ)、内皮素(endothelin-1,ET-1)的影响。方法采用随机分组法将医院2019年2月—2022年3月收治的86例慢阻肺患者分为观察组与对照组,两组各43例。对照组采用西医常规治疗,观察组在此基础上联合使用二陈汤合三子养亲汤治疗。观察两组患者治疗前后肺功能、蛋白质羰基(protein carbonyl content,PC)、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(malonic aldehyde,MDA)含量和IFN-γ、ET-1。观察两组患者临床症状消失时间和临床疗效。结果两组患者治疗后FEV1、PEF和Ppeak水平显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组FEV1、PEF和Ppeak水平显著高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后PC、8-OHdG和MDA水平显著低于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组PC、8-OHdG和MDA水平显著低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后IFN-γ和ET-1水平显著低于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组IFN-γ和ET-1水平显著低于对照组(P<0.05)。观察组临床症状消失时间显著快于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为83.72%(36/43)显著高于对照组(65.12%,28/43)(χ^(2)=3.909,P=0.048)。结论二陈汤合三子养亲汤能有效改善慢阻肺患者肺功能,降低氧化应激相关产物蛋白质的含量,减少临床症状持续时间,利于降低FN-γ、ET-1水平,临床疗效得到显著提升。

降气平喘汤对哮喘大鼠气道重塑相关炎症因子及ADAM33、ETS-1表达的影响

目的探讨降气平喘汤对哮喘大鼠气道重塑,解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloprotease 33,ADAM33)、E26转录因子-1(E26 transformation-specific,ETS-1)表达的影响及干预机制。方法60只雄性SD大鼠中随机选取15只为正常组。余下大鼠造模,造模成功大鼠随机分为模型组、西药组、中药组,每组15只。除正常组外,其余组大鼠用卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发构建哮喘大鼠模型。实验第54天灌胃干预各组大鼠,中药组予降气平喘汤(生药量8.06 g/kg),西药组予孟鲁司特钠(2.6 mg/kg),正常组和模型组予生理盐水,给药剂量均为10 mL/kg。HE染色观察肺组织病理变化,ELISA检测肺组织白细胞介素-1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)水平,Western blot检测肺组织ADAM33、ETS-1蛋白表达水平,real-time PCR检测肺组织ADAM33 mRNA的表达水平。结果与正常组比较,模型组出现哮喘典型的气道重塑病理变化,肺组织中IL-1β、IL-6、TGF-β1、ADAM33蛋白、ETS-1蛋白、ADAM33 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,中药组、西药组肺组织病理变化明显改善,肺组织中IL-1β、IL-6、TGF-β1、ADAM33蛋白、ETS-1蛋白、ADAM33 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论降气平喘汤可通过降低IL-1β、IL-6、TGF-β1炎症因子分泌、降低ADAM33、ETS-1的表达,改善哮喘大鼠的气道重塑,实现对哮喘的干预作用。

肾功能指标、CRP、ET-1与慢性心力衰竭患者发生房颤的相关性分析

目的探究肾功能指标联合CRP、ET-1与慢性心力衰竭患者房颤发生率的相关性。方法选取我院2020年1月~2023年1月纳入的86例慢性心力衰竭患者,根据是否伴有房颤分为慢性心衰合并房颤组和慢性心衰组(n=43)。观察两组患者血清胱抑素C(CysC)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)等肾功能指标,以及血管内皮素(ET-1)、C反应蛋白(CRP)水平的差异,分析CysC、Cr、BUN、ET-1、CRP水平与慢性心衰患者发生房颤的相关性。结果两组患者ET-1水平、CRP水平、CysC水平、年龄、合并吸烟史、合并冠心病史、合并高血压史方面,差异具有统计学意义(P<0.05);慢性心力衰竭合并房颤与肾功能指标CysC(r=0.419,P<0.01)和ET-1(r=0.209,P<0.01)、CRP(r=0.228,P<0.01)等因素相关,但与高血压、吸烟、BUN等因素无关。Logistic回归分析结果也显示,ET-1、CRP、CysC水平为慢性心衰患者发生房颤的危险因素。结论血清CysC、ET-1、CRP水平与慢性心力衰竭患者房颤密切相关,且上述指标上升的患者房颤较为多发。

MRI纹理分析与血清ETS-1、MMP-1和MBP联合检测在脑膜瘤鉴别诊断中的应用价值分析

目的:分析MRI纹理与ETS-1、MMP-1和MBP联合检测在脑膜瘤鉴别诊断中的应用价值。方法:选取同期内到我院诊治的54例脑膜瘤患者作为本次试验的研究组,实施MRI纹理分析,依据WHO分级将脑膜瘤患者分成良性组(n=43,WHOⅠ级)和恶性组(n=11,WHOⅡ、Ⅲ级)两个亚组。再选取50例健康体检者为参照组,测定两组血清ETS-1、MMP-1和MBP水平,同时将病理学检查结果作为金标准,分析MRI纹理与血清ETS-1、MMP-1和MBP单项及联合检测的诊断效能。结果:脑膜瘤良性组的MRI增强T1WI扫描的纹理参数低于脑膜瘤恶性组(P<0.05)。研究组的ETS-1、MMP-1和MBP水平均显著高于参照组(P<0.001)。四项联合检测的曲线下面积、敏感度及特异性高于单项检测(P<0.05)。结论:MRI纹理分析与血清ETS-1、MMP-1和MBP联合检测的灵敏度和特异性较高,在脑膜瘤的诊断中具有显著的临床应用价值。

转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义

目的:检测Ets家族转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达,探讨其对小鼠睾丸发育的调控及其对精原干细胞(SSCs)增殖、分化的可能影响。方法:取生后第1、5、10、15、20、25、30、35、40、50和70天的小鼠睾丸组织,对成年小鼠进行白消安10mg.kg-1腹腔注射,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸组织,用半定量RT-PCR方法对比内参β-actin在对应组织内的表达水平,分析Ets1、Ets2mRNA在睾丸组织中的相对表达量。结果:Ets1的表达量在生后第1～30天显著高于出生后第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显降低并保持稳定;Ets2在生后第1～25天表达量显著高于第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显下降并保持稳定。白消安处理后,Ets1的表达量于第5天降至最低,随后逐渐恢复,第9天后基本达到处理前水平并保持相对稳定,其中第5、8天表达量均显著低于处理后第0天(P<0.05或P<0.01);Ets2的表达量在白消安处理后前期变化不明显,第10天时明显降低,与第0和18天比较差异有统计学意义(P<0.05),之后缓慢回升,第18天左右恢复至处理前水平。结论:转录因子Ets1和Ets2可能对睾丸早期发育、成年精子发生的维持及精原细胞的增殖、分化具有调节作用。

应用FISH和组织芯片方法研究肺癌组织Ets1 mRNA的表达及意义

目的用荧光原位杂交(fluorescencein situ hybridization,FISH)方法检测肺癌组织芯片(tissuemicroarray,TMA)中Ets1mRNA表达情况,并探讨其在肺癌发生、发展中的作用和意义。方法利用mRNA FISH方法和组织芯片技术,检测肺癌Ets1mRNA的表达情况。结果肺癌组中有70.4%表达Ets1mRNA,而正常肺标本中未见Ets1mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.05);Ets1mRNA的表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移和临床分期显著相关(P<0.05)。结论组织芯片技术可以使实验简便、经济和标准化;FISH方法敏感性强,稳定性高,荧光染色保存时间长,可以较好地反映mRNA在细胞中的定位和含量。本研究发现Ets1mRNA表达与肺癌的侵袭转移有关,因而Ets1基因可能成为肿瘤患者预后判断和指导临床治疗的重要指标。

Prx1敲除对4NQO诱导的小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响

目的检测核增殖抗原Ki67和转录因子Ets1在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的Prx1+/+和Prx1+/-小鼠舌癌前病变模型中的表达,探讨Prx1敲除对小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响。方法实验分为Prx1+/+阴性对照组、Prx1+/+4NQO组、Prx1+/-阴性对照组、Prx1+/-4NQO组。在实验过程中对照组小鼠给与蒸馏水,实验组小鼠给与4NQO饮用水,第16周末处死小鼠,取舌组织,用于HE染色及Ki67和Ets1免疫组织化学染色。结果在4NQO的诱导下,成功构建鼠舌癌前病变模型。组织学检查发现在第16周末,实验组小鼠舌黏膜上皮表现为单纯增生或不同程度的异常增生。免疫组化结果显示,与对照组正常舌黏膜相比,Ki67、Ets1在Prx1+/+4NQO组舌癌前病变中表达明显增高(P<0.01)。Prx1敲除导致Prx1+/-4NQO组舌黏膜上皮中Ki67、Ets1表达明显降低(P<0.01)。结论 Prx1对细胞增殖有促进作用,可能通过调控转录因子Ets1在口腔癌前病变发生发展中发挥重要作用。

Ets-1和VEGF在实验性糖尿病视网膜中的共表达(英文)

目的:阐明VEGF和Ets-1在糖尿病大鼠视网膜内的表达特点和分布特点。方法:腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠模型。STZ注射后4wk处死动物,分离各组视网膜总蛋白进行Western blot分析。将眼球固定后制成14μm厚的冰冻切片进行Ets-1和VEGF免疫荧光双标检测。结果:Ets-1和VEGF在糖尿病大鼠视网膜内表达均显著增强,而且Ets-1和VEGF在视网膜内的分布特点相似,几乎在视网膜各层均共表达。结论:Ets-1可能对VEGF诱导的糖尿病视网膜病变有促进作用。

ETS1基因多态性与系统性红斑狼疮临床表型的相关性分析

目的:探讨ETS1基因的单核苷酸多态性(SNPs)与系统性红斑狼疮(SLE)各种临床表型的相关性。方法:对564例SLE患者和504例健康人对照进行ETS1基因SNPs分型,并将SLE组中临床资料完整的450例根据11种临床表型进行分层,针对以上SNPs分型与SLE各种临床表型进行相关性分析。结果:ETS1基因的rs6590330和rs4937333与SLE呈强相关,且均与SLE 8个临床表型(包括蝶形红斑、光敏感、关节炎、浆膜炎、肾脏损害、血细胞减少、免疫功能紊乱和抗核抗体)呈强相关。结论:ETS1基因是中国南方人群SLE发病的常见风险因子,并与SLE多种临床症状的发生有关。

结直肠癌中Ets-1和整合素α6β4的表达及临床意义

目的:检测结直肠癌中转录因子Ets-1和整合素α6β4的表达,探讨其在结直肠癌浸润转移中的作用及临床意义。方法:选取2007年6月至2008年6月间天津医科大学总医院外科40例结直肠癌手术标本为研究对象,分别采用荧光实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肿瘤和切端组织中Ets-1和整合素α6β4的mRNA和蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行统计学分析。结果:Ets-1和整合素α6β4在肿瘤组织中的mRNA表达水平和蛋白表达水平均高于切端组织(P<0.05);Ets-1 mRNA的表达与肿瘤的组织学类型、肿瘤部位、大小及分化程度未见相关性(P>0.05),伴淋巴结转移者Ets-1 mRNA的表达明显高于不伴淋巴结转移者,其差异具有统计学意义(P<0.05),Ets-1 mRNA表达与大肠癌浸润深度及Dukes分期存在正相关,伴随肿瘤浸润深度和临床分期的增加,Ets-1 mRNA表达明显增加,其差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移者的Ets-1蛋白阳性率为91.3%(2l/23),无淋巴结转移者为58.8%(10/17),两者差异具有统计学意义(P<0.05),伴随肿瘤浸润深度和Dukes分期的增加,肿瘤组织中Ets-1蛋白阳性率也显著增加(P<0.05),而Ets-l蛋白表达水平与病理类型及分化程度未见相关性(P>0.05);结直肠癌中Ets-1的表达与整合素α6β4的表达呈正相关(P<0.05)。结论:检测结直肠癌内Ets-l和整合素α6β4的表达可作为评价肿瘤侵袭转移、判断预后的重要指标,Ets-1可能成为结直肠癌基因治疗新的靶点。

miR326调控Ets-1表达及Th17细胞分化参与SLE发病

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+T细胞中miR326、E26转录因子-1(Ets-1)表达量及Th17细胞比例,分析三者之间的相关性及与狼疮活动度、系统受累情况的关联,探讨SLE可能的致病机制。方法选取符合2009年美国风湿病学会诊断标准的SLE患者40例,记录临床资料,选取无自身免疫性疾病的健康志愿者14例。流式细胞术检测Th17(CD4+IL-17A+)/CD4+T细胞比例,磁珠分选CD4+T细胞、RT-PCR法检测CD4+T细胞中Ets-1 mRNA及miR326的相对表达量。结果SLE组CD4+T细胞中miR326水平高于对照组(P=0.003),活动组高于稳定组(P=0.000);SLE组Ets-1的表达水平低于对照组(P=0.002),活动组低于稳定组(P=0.001);SLE组Th17细胞比例较对照组增高(P=0.004),活动组高于稳定组,差异有统计学意义;SLE患者miR326表达量与Ets-1表达量呈负相关性(P<0.001),与Th17细胞比例呈正相关性(P=0.001);Ets-1与Th17细胞比例呈负相关性(P=0.003);SLE患者miR326的表达量及Th17细胞比例与SLEDAI评分呈正相关性(P<0.001),Ets-1与SLEDAI评分呈负相关性(P<0.001);SLE患者miR326水平及Th17细胞比例在皮疹、发热、血液系统及肾脏受累的患者中增高,Ets-1的表达量则降低;miR326水平及Th17细胞比例与抗ds DNA、抗核小体呈正相关性,与C3、C4呈负相关性,Ets-1与抗ds DNA、抗核小体呈负相关性,与C3、C4呈正相关性。结论 SLE患者CD4+T细胞中miR326表达明显增高并与Th17细胞比例、疾病活动指标呈正相关性,与Ets-1呈负相关性,提示miR326可能通过抑制Ets-1基因表达,促进Th17细胞分化参与SLE疾病活动。

VEGF、VEGFR_2(KDR)、MMP-1以及转录调节因子Ets-1在子宫颈癌组织中的表达及其意义

目的从分子水平观察肿瘤血管生成因子VEGF、VEGF受体KDR、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其转录调节因子Ets-1(E26transformation-specific-1,Ets-1)在子宫颈癌中的表达并揭示其因子间相互关系,为判断患者预后和解释促血管生成因子间内在规律提供根据。方法利用原位杂交和免疫组织化学染色法检测87例子宫颈癌组织中VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1等因子mRNA和蛋白表达规律;患者生存曲线比较在阴性组和阳性组间进行;因子间分析利用Pearson相关分析法。结果VEGFmRNA和蛋白主要分布在癌细胞胞质中,阳性率分别为78.6%(68/87)和70.4%(61/87);KDRmRNA和蛋白主要在内皮细胞上表达,其表达率与VEGF表达率间存在密切的相关关系,r=0.892;MMP-1在肿瘤细胞和间质血管内皮细胞中表达,尤其在血管新生处表达明显;Ets-1主要分布在内皮细胞和肿瘤细胞中,其表达率与KDR和MMP-1表达率间的相关系数(r)分别为0.900和0.873;上述四因子表达与肿瘤分化度、淋巴结转移及5年存活率均有密切的相关性。结论VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1是参与子宫颈癌血管生成的重要因子,且彼此间存在密切的相关性,检测其表达规律可为判断子宫颈癌生物学行为和解释促血管生成因子间内在联系提供理论根据。

去甲斑蝥素阻断αvβ6-ERK-ETS1信号通路抑制结肠癌细胞上皮-间质转化实验研究

目的:探讨去甲斑蝥素抑制结肠癌细胞上皮-间质转化的分子机制,为中药抗癌机制的研究奠定基础。方法:将HT-29结肠癌细胞经NCTD处理后,光镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测处理前后细胞表面上皮表型及间质表型标志物的变化情况;Western Blotting分析常见调控细胞EMT过程信号传导通路中关键分子及其磷酸化状态的变化;转录因子活化技术观察核因子磷酸化状态的变化。结果:显微镜下观察发现,经NCTD处理后,结肠癌细胞EMT过程受到抑制;流式细胞术证实肿瘤细胞整合素αvβ6表达降低,同时上皮表型标志物表达升高,间质表型标志分子表达减少;Western Blotting分析常见调控细胞EMT过程信号传导通路中仅有ERK及p-ERK表达水平降低,其他关键蛋白无明显变化;转录因子活化技术发现利用si RNA技术干扰整合素αvβ6后,ERK下游的核转录因子中仅有ETS-1磷酸化水平改变,Western Blotting分析证实经NCTD处理后出现与干扰αvβ6表达造成的一致性改变。结论:去甲斑蝥素通过阻断αvβ6-ERK-ETS1信号通路抑制结肠癌细胞上皮-间质转化过程,从而发挥抗癌作用。

姜黄素对糖尿病大鼠视网膜中Ets-1表达的影响

目的观察姜黄素对糖尿病大鼠视网膜E26转录因子-1(Ets-1)表达的影响,探讨姜黄素治疗抑制糖尿病视网膜病变的可能机制。方法采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ)60mg/kg诱导大鼠糖尿病模型,将20只造模成功的动物随机分成糖尿病组(10只),姜黄素治疗组(10只),取等量正常大鼠作为空白对照组。治疗组在大鼠出现糖尿病表现后按姜黄素200mg/(kg·d)灌胃,姜黄素用质量分数1%羧甲基纤维素配成混悬液后给药,共8周。糖尿病组及治疗组同期给予等量的1%羧甲基纤维素灌胃,连用8周。8周后取大鼠眼球分别行免疫组化、用ELISA法测定Ets-1浓度。结果 ELISA法测得糖尿病组的Ets-1浓度比正常组增加(P<0.05),治疗组Ets-1浓度比糖尿病组低(P<0.05),但比正常对照组高(P<0.05)。免疫组化显示正常对照组视网膜中Ets-1阳性细胞微量表达,糖尿病组及姜黄素治疗组大鼠视网膜组织中Ets-1阳性细胞大量表达,且姜黄素治疗组大鼠视网膜组织中Ets-1阳性细胞表达程度低于糖尿病组。电镜结果提示糖尿病组及姜黄素治疗组均可看到糖尿病视网膜病变的病理改变,但姜黄素治疗组的病理改变程度比糖尿病组要轻。结论姜黄素可抑制糖尿病大鼠视网膜ETS-1的表达,从而缓解其糖尿病视网膜病变进程。