转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义

目的:检测Ets家族转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达,探讨其对小鼠睾丸发育的调控及其对精原干细胞(SSCs)增殖、分化的可能影响。方法:取生后第1、5、10、15、20、25、30、35、40、50和70天的小鼠睾丸组织,对成年小鼠进行白消安10mg.kg-1腹腔注射,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸组织,用半定量RT-PCR方法对比内参β-actin在对应组织内的表达水平,分析Ets1、Ets2mRNA在睾丸组织中的相对表达量。结果:Ets1的表达量在生后第1～30天显著高于出生后第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显降低并保持稳定;Ets2在生后第1～25天表达量显著高于第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显下降并保持稳定。白消安处理后,Ets1的表达量于第5天降至最低,随后逐渐恢复,第9天后基本达到处理前水平并保持相对稳定,其中第5、8天表达量均显著低于处理后第0天(P<0.05或P<0.01);Ets2的表达量在白消安处理后前期变化不明显,第10天时明显降低,与第0和18天比较差异有统计学意义(P<0.05),之后缓慢回升,第18天左右恢复至处理前水平。结论:转录因子Ets1和Ets2可能对睾丸早期发育、成年精子发生的维持及精原细胞的增殖、分化具有调节作用。

猪全基因组范围ETS基因家族成员的鉴定、进化与表达分析

ETS转录因子家族在动物中广泛存在,参与细胞分化调控、细胞周期控制、细胞凋亡等多个生物学过程。文章采用生物信息学方法系统分析猪ETS家族成员进化关系和调控图谱,结合RNA-Seq数据分析其组织表达规律。研究利用Pfam鉴定ETS保守结构域序列检索猪(Sus scrofa)蛋白序列,最终在猪基因组上鉴定得到23个ETS家族基因。分析ETS家族基因、蛋白一级结构和高级结构及亚细胞定位预测。基于最大似然法,构建ETS家族系统发育树发现,可分为11个子家族,子家族成员保守结构域、基因结构、理化性质相似。通过生信分析构建由ETS家族、靶基因和miRNA构成的基因调控网络,筛选出40个"ETS家族基因-miRNA-靶基因"前馈回路。转录表达谱提示ETS家族基因在成年公猪和母猪28种不同类型组织中均有表达,且ETS1基因在免疫组织(淋巴、脾脏)和外周血单核细胞中高表达,SPIC基因在免疫组织(淋巴、脾脏)高表达。研究结果为揭示ETS家族成员生物学功能奠定基础。

Elf-1在肿瘤浸润转移中的转录调控研究进展

Elf-1(E74-like factor 1)是Ets转录因子家族的一员,参与发生过程、细胞有丝分裂原的激活、癌发生以及病毒基因激活等。已有研究报道Elf-1在前列腺癌、子宫内膜癌中过度表达,且Elf-1的表达与这些肿瘤的恶性潜能有关。其在肿瘤浸润转移中的作用主要是与基质金属蛋白酶等的转录激活有关。

ELF5基因对人卵巢癌细胞侵袭转移和大鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的探讨ELF5基因对人卵巢癌细胞侵袭转移和大鼠移植瘤生长的抑制作用以及可能的机制。方法体外实验:人卵巢癌细胞随机分为重组质粒组、空质粒组、未经转染组,重组质粒组、空质粒组分别转染构建好的pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表达载体、空载质粒pcDNA3.1-EGFP,未经转染组未经任何转染。Q-PCR法检测各组ELF5 mRNA的相对表达量,Western blotting法检测基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9蛋白的相对表达量;Traswell试验评价ELF5对卵巢癌细胞侵袭转移的影响。体内试验:建立人卵巢癌NOD/SCID鼠左前肢腋下移植瘤模型,应用随机数字表法将大鼠分为3组,即重组质粒大鼠组(转染pcDNA3.1-ELF5+EGFP的人卵巢癌细胞)、空质粒大鼠组(转染空载质粒的人卵巢癌细胞)、未经转染大鼠组(未经转染的人卵巢癌细胞),将处于对数生长期的3组细胞2×104/m L接种于NOD/SCID小鼠左前肢腋下。对比3组小鼠的移植瘤质量和体积,计算各组小鼠肿瘤抑制率(首先对转移瘤行HE染色进行病理组织学检查以确定其致瘤性)。Western blotting法检测3组NOD/SCID小鼠移植瘤组织中MMP-2及MMP-9蛋白的相对表达量。结果人卵巢癌细胞转染pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表达载体后,可稳定表达,且于72 h后转染率较高;与空质粒组和未经转染组比较,重组质粒组MMP-2及MMP-9蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。Transell试验中,重组质粒组穿膜细胞数少于空质粒组及未经转染组(P均<0.05)。重组质粒大鼠组抑瘤率达64.4%。重组质粒大鼠组与其余两组比较,其瘤组织中MMP-2及MMP-9蛋白相对表达量降低(P<0.05),而空质粒大鼠组和未经转染大鼠组比较,P均>0.05。结论 ELF5基因可能通过抑制MMP-2及MMP-9的表达而降低卵巢癌细胞的侵袭转移能力。

ER81在白消安模型小鼠睾丸和附睾中的表达及其意义

目的:检测Ets家族转录因子ER81在白消安模型小鼠睾丸及附睾中的表达水平,探讨其对精原细胞增殖和分化的影响。方法:成年小鼠腹腔注射白消安10 mg.kg-1,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸和附睾,半定量RT-PCR分析ER81 mRNA的相对表达量。结果:在睾丸组织内,与第0天比较,ER81的表达量在第5天显著降低(P<0.01),随后基本恢复;在附睾组织内,与第0天比较,ER81表达量于第8天显著降低(P<0.05),并随后恢复。结论:转录因子ER81可能对精原细胞的分化有调节作用。