维生素D辅助治疗对EV71型HFMD患儿的疗效和安全性分析

目的:探讨维生素D辅助治疗对EV71型HFMD患儿的疗效和安全性。方法:选取2019年3月—2022年3月我院收治的80例EV71型HFMD患儿作为观察对象,根据数字随机法将患者分为两组,每组40例。对照组接受常规对症治疗,观察组使用维生素D辅助常规对症治疗。比较两组患者临床治疗总有效率、临床症状改善时间和临床体征改善时间、白细胞介素-6(IL-6)水平、白细胞介素-10(IL-10)水平、白细胞介素-13(IL-13)水平以及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平、不良反应发生情况。结果:观察组临床治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组临床症状消退时间、临床体征改善时间以及住院时间均明显短于对照组(P<0.05);治疗前两组IL-6、IL-10、IL-13水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组IL-6、IL-10、IL-13水平均明显降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗前两组免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等指标水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组IgA、IgG、IgM指标水平均有所上升,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论:维生素D辅助治疗EV71型HFMD,可改善临床疗效、临床症状以及临床体征,减轻细胞因子水平,提高免疫功能指标水平,值得临床进一步深入研究。

直肠滴入中药对CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病的疗效

目的观察直肠滴入中药对CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病的疗效。方法选取2019年8月—2022年8月贵州水矿控股集团有限公司总医院CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病患儿85例,按照随机数表法分为观察组(42例)和对照组(43例),其中对照组患儿给予利巴韦林治疗,观察组患儿给予直肠滴入中药治疗。对比两组患儿治疗前后口腔疱疹、发热、皮疹等症状的评分,治疗前后患儿炎症因子、免疫指标水平及两组患儿治疗后不良反应发生率。结果治疗前,两组患儿的口腔疱疹、发热、皮疹评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组患儿的口腔疱疹、发热、皮疹评分均降低,并且治疗后观察组患儿的以上症状评分低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α均降低,并且治疗后观察组患儿的以上降低幅度大于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿CD4^(+)、CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均升高,CD8^(+)水平降低,并且治疗后观察组患儿的变化幅度大于对照组(P<0.05);观察组患儿不良反应发生率为4.76%,对照组患儿不良反应发生率为18.60%,观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论给予CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病患儿直肠滴入中药治疗,能减轻患儿临床症状及炎性反应,改善免疫功能,且不良反应少,值得借鉴。

HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价

为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。

2010—2020年马尾区手足口病流行病学特征及EV71疫苗接种效果分析

目的通过探讨福州市马尾区手足口病流行特征与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)疫苗接种的效果,为寻找更有效的防控策略提供科学依据。方法收集2010年1月1日—2020年12月31日马尾区手足口病疫情监测数据和2017—2020年EV71疫苗接种资料,采用描述性流行病学方法进行流行特征和疫苗接种效果分析。结果2010—2020年马尾区报告手足口病总共5482例,重症54例,死亡1例,年均发病率为206.82/10万。除2020年外,其余年份发病高峰为每年4—7月和9—10月;男性发病率高于女性,发病年龄主要聚集在3岁以下(占68.88%),发病人群以散居儿童和幼托儿童为主;感染的病毒类型主要为其他肠道病毒,不同年份病原构成比差异有统计学意义(χ^(2)=165.06,P<0.001)。2017—2020年马尾区接种EV71疫苗共11231剂次,平均估算接种率为10.63%,总体接种率偏低。结论福州市马尾区手足口病疫情防控形势仍旧严峻,相关部门需在发病高峰、重点场所对低龄儿童有针对性开展健康宣教工作;疫苗接种能有效降低发病率和重症发生率,建议通过多渠道提高疫苗接种率。

EV71型手足口病患儿血清Th1/Th2细胞因子水平分析

目的探讨EV71病毒感染所致手足口病患儿血清Th1/Th2细胞因子水平的变化。方法运用BD流式液相多重蛋白定量技术,检测EV71型手足口病患儿(病例组)和健康儿童(对照组)血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α及IFN-γ的水平。结果收集病例组和对照组样本各30例;病例组、对照组血清IL-6水平P50分别为7.0、1.9pg/ml,IL-10水平P50分别为3.4、2.4pg/ml,两组IL-6、IL-10水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);而血清IL-2、IL-4、TNF-α及IFN-γ水平两组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-6和IL-10可能参与了EV71病毒的致病机理。

EV71致重症手足口病患儿脑损伤的病理机制研究

目的观察新肠道病毒(EV71)致脑组织损伤的病理学变化。方法对7例EV71引起的重症手足口病(HFMD)死亡患儿进行尸体检验并对其脑组织进行HE染色,观察其主要组织病理学改变。结果患儿口腔及四肢可见淡红色圆形或椭圆形疱疹;脑组织以脑干、延髓为中心见大量软化灶及神经细胞卫星现象和嗜神经细胞现象;神经胶质细胞大量增生及多个胶质细胞结节形成。结论 EV71可引起严重的脑组织损伤,以脑干、延髓最为严重。

五株EV71病毒毒力、免疫原性与基因组比较分析

目的对5株EV71分离株(LCH01、LCH02、BJ01、BJ02、AH01)进行毒力、免疫原性和基因组的比较分析。方法分别用5株EV71分离株攻击Balb/c乳鼠,比较毒力差异;免疫6～8周龄Balb/c小鼠后收集血清,ELISA检测抗体效价,微量中和实验检测中和抗体效价;反转录获得5株EV71的全长cDNA进行全基因组测序;最后,用CLC Main Workbench 5.5软件对序列进行比较分析。结果通过对VP1基因的比较分析发现,这5株EV71分离株均为C4a亚型。1周龄Balb/c小鼠经脑部注射LCH01株,表现出后肢瘫痪和后继死亡;而注射其它4株EV71的小鼠在观察了14 d之后仍然存活。5株EV71血清抗体效价为210～211,中和抗体效价为27～28,无显著差异。LCH01毒株与其它几株序列相比,在5′-NTR、3′-NTR、3D等处均有明显差异。结论这5株EV71分离株为近几年流行的C4a亚型,具有较高的免疫原性;LCH01毒株的毒力高于其它几株,从基因组水平上找到了差异序列,这为EV71疫苗评价和致病机制研究提供了实验数据和实验材料。

2016年盐城市手足口病病原学特征及EV71和CVA16型肠道病毒VP1基因特征

目的了解2016年盐城市手足口病肠道病毒病原谱分布特征,并对鉴定为EV71、CVA16型肠道病毒VP1基因进行分子进化特征分析。方法收集疑似手足口病咽肛拭子标本,采用实时荧光RT-PCR方法检测通用、EV71和CVA16型肠道病毒核酸,以RT-PCR法扩增其VP1基因全长编码区并进行序列分析,采用MegAlign、mafft、MEGA等软件进行核苷酸及氨基酸序列比对及基因种系进化特征分析。结果 2016年盐城市共收集疑似手足口病标本504份,检出肠道病毒核酸阳性165份,阳性率32.74%,EV71型、CVA16型、其他型别分别占4.37%、6.94%、21.43%。对EV71、CVA16型肠道病毒遗传进化树分析显示,盐城地区EV71和CVA16代表株分别属于C4a、B1b基因亚群进化分支,未发生基因亚群的转换,在各自进化分支中形成3条传播主链,远离各自原型株。结论 2016年盐城市手足病病原谱为多种基因型的肠道病毒共同流行。其他肠道病毒为优势病原体,EV71和CVA16仍占有一定比例。

中国EV71病毒VP1蛋白生物信息学分析

以肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)VP1蛋白基因序列为基础,利用生物软件对EV71病毒中国分离株VP1蛋白进行进化树、N-糖基化位点、二级结构及抗原位点的预测和分析。结果显示国内分离株多为C4亚型,有3株湖南分离株为A型,提示疫苗的研发应着重于预防C4b亚型EV71疫苗的研发。

上海长宁区0～6岁儿童家长对EV71疫苗接种态度及影响因素分析

目的通过长宁区6岁以下婴幼儿家长对手足口病的认知状况和接种EV71疫苗的意愿性调查,分析可能影响家长接种态度的因素,为EV71疫苗的推广政策提供参考意见。方法采用分层随机抽样的方法,在长宁区所辖10个社区内随机抽取1个居委会和1家幼托机构,以幼托机构和居委会的儿童家长为调查对象,居委会只调查0～3岁散居儿童家长,幼托机构的调查对象为3～6岁儿童家长。采用自行设计的调查问卷,共调查562名儿童家长。结果调查结果显示,家长手足口病相关流行病学知识的平均知晓率为36.32%,对于手足口病重症病例的危害知晓程度不高。手足口病的知晓率主要与被调查者与孩子关系、性别、是否入托、家庭月收入等因素有关。有50.89%的家长愿意让孩子接种EV71疫苗,16.19%的家长不愿意让孩子接种EV71疫苗,还有32.92%的家长暂不会选择接种,家长对疫苗的安全性是否能够保障最为关注。接种意愿受家庭月收入、是否认为手足口病可以被预防、是否知道EV71疫苗等多因素影响。结论手足口病的健康教育和疫苗宣传需要有针对性,对目标群体的宣教要有多种渠道、强调重点,并做好疫苗上市后的安全监测,提高家长对EV71疫苗的认识度与认可度。

EV71病毒引起手足口病患儿免疫状态变化分析

目的：探讨 EV71病毒引起手足口病患儿免疫状态变化。方法收集2013年6月～2014年12月我院收治的手足口病患儿120例，按照病情程度分为轻症组、重症组各60例，收集同期来我院进行健康体检的正常健康体检儿童60例作为对照组，测定三组 IL-10水平、体液免疫功能及细胞免疫。结果轻症组、重症组 IgM、IL-10水平均高于对照组，重症组 IgG、IgA、IgM、IL-10水平高于轻症组（P ＜0.05）。轻症组、重症组 CD16＋56＋、CD23＋、CD19＋高于对照组，CD25＋低于对照组（P ＜0.05），重症组 CD19＋高于轻症组，CD16＋56＋、CD25＋低于轻症组（P ＜0.05）；重症组 CD4＋、CD8＋低于轻症组及对照组（P ＜0.05）。结论EV71病毒引起的 HFMD 患儿存在细胞免疫、体液免疫功能紊乱，疾病程度越严重，细胞免疫、体液免疫功能紊乱程度越严重，应提高重视，及时检测，提高患儿的预后，降低死亡率。

肠道病毒EV71疫苗效力国家参考品的协作标定

目的建立肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV71）疫苗效力参考品,用于EV71疫苗效力的小鼠ED50检测质量控制。方法选取经Ⅲ期临床试验验证具有良好保护效果的一批EV71疫苗作为候选参考品,采用EV71小鼠ED50检测方法,对候选参考品进行效力的协作标定及适用性研究。结果候选参考品在各实验室的ED50均值分别为9.5~51.0 U,CV为3.8%~18.7%;5个实验室总均值为23.5 U,CV为60.9%。各实验室检测结果均符合正态分布;3个EV71灭活疫苗与参考品均表现出了良好的剂量效应关系,中和抗体阳转率均随疫苗稀释度的增加而降低,下降曲线形态相近。当以候选参考品为标准,3个灭活疫苗的体内效价比均值分别为2.7倍、0.8倍和0.9倍;CV分别为5.5%、27.5%和11.2%。结论建立的EV71疫苗效力国家参考品（320 U/0.5 m L）,可用于EV71疫苗效力的小鼠ED_（50）检测质量控制。

重症EV71感染手足口病的临床诊治及护理

目的探讨重症EV71感染手足口病的诊断、治疗及护理措施。方法回顾性分析我院2008年4月～2011年5月诊治的375例重症EV71感染手足口病患者的临床资料。结果学龄前儿童好发,尤其是3岁以内婴幼儿;全年好发5～7月,6月发病率最高,通过精心治疗和护理,所有患者均治愈出院。结论在对重症EV71感染手足口病积极治疗的基础上,配合有效的护理措施,严格做好消毒隔离是改善患儿预后的重要措施。

上海市徐汇区儿童家长对EV71疫苗接种意愿及Logistic影响因素分析

目的 了解上海市徐汇区5岁及以下儿童家长对手足口病EV71疫苗接种意愿及影响因素,为更好推广EV71疫苗接种提供决策信息。方法 采用整群抽样在徐汇区13个社区预防接种门诊,每家随机抽取72名5岁及以下儿童家长,通过手机扫描二维码对EV71疫苗接种情况等方面进行问卷调查,采用SPSS 20.0软件进行单因素和Logistic多因素分析。结果 共调查943名5岁及以下儿童家长,其中未接种疫苗儿童537名(56.95%);在未接种组中71.69%家长有意愿为孩子接种,73.18%家长知道EV71疫苗;51.40%家长知晓疫苗只预防EV71型手足口病;接种EV71疫苗后仍有可能感染手足口病,仍愿意为孩子接种64.62%(347/537);接种意愿多因素Logistic回归显示:儿童年龄(OR=0.32,95%CI:0.11~0.96)、家长知晓手足口病除EV71外还有其他病原体(OR=2.49,95%CI:1.22~5.08)、疫苗只预防EV71型手足口病但仍愿意接种(OR=0.02,95%CI:0.01~0.03)、通过互联网、微信等获取手足口病和疫苗相关知识(OR=0.41,95%CI:0.21~0.79)是接种意愿的影响因素。结论 手足口病EV71疫苗接种率较低,接种意愿较高,受儿童年龄、知晓手足口病和疫苗相关知识、获取知识途径的影响,因此健康教育须有针对性,以提高其接种率,降低发病率。

重症手足口病EV71感染护理体会

目的:总结重症EV71感染患儿的护理经验。方法:对100多例重症EV71感染患儿的临床表现、救治措施及护理方法进行分析。结果:总结出重症手足口病EV71感染患儿各项护理要点。结论:重症EV71感染患儿的救治工作在配合护理措施后提高救治成功率。

上海市长宁区儿童家长肠道病毒71型灭活疫苗接种意愿及影响因素分析

目的 了解上海市长宁区托幼机构儿童家长为孩子接种肠道病毒71型灭活疫苗(EV71疫苗)的意愿并分析影响因素,为推广EV71疫苗接种提出建议。方法 采用随机抽样的方式抽取长宁区托幼机构就读的儿童,向儿童家长发放问卷进行调查。结果 有75.40%的家长愿意为孩子接种EV71疫苗。Logistic回归分析,不认为EV71会产生强烈副作用、疫苗犹豫量表得分越高、主动获取知识得分越低的家长更愿意为孩子接种EV71疫苗。结论 家长为儿童接种EV71疫苗的意愿受到对EV71疫苗副作用的认知、疫苗犹豫和主动获取知识情况的影响,应对家长开展相关健康教育,以提升接种率。

EV71的流行病学现状及研究进展

随着手足口病的广泛蔓延，世界各地对该疾病越来越关注。该病主要是由EV71感染引起。EV71具有嗜皮肤和嗜神经特性，临床上除了可以引起手足口病和疱疹性咽峡炎外，还可以引起严重的神经系统疾病，更有甚者出现死亡。在临床上主要表现为无茵性脑膜炎、脑干脑炎、神经源性肺水肿和脊髓灰质炎样的麻痹等多种神经系统疾病。减轻病人的症状，并找到有效的治疗方法是预防的关键，对EV71感染的发病机制、不同临床表现、病毒基因型及手足口病疫苗等方面有待进一步研究。

上海市徐汇区儿童EV71疫苗接种情况及其影响因素分析

目的:了解上海市徐汇区5岁及以下儿童手足口病EV71疫苗接种情况及其影响因素。方法:采用整群抽样方法在徐汇区每个社区随机抽取72名5岁及以下儿童家长作为研究对象,共13个社区。通过手机扫描二维码对EV71疫苗接种情况以及知识、态度和行为方面进行问卷调查。结果:共调查943名5岁及以下儿童家长,其中已接种过手足口病疫苗的儿童家长406名,接种率为43.05%(406/943),有接种意愿的调查对象中未接种与实际接种者比较,差异有统计学意义(χ2=136.420,P=0.000);家中儿童已经患过手足口病的占14.32%;知道EV71疫苗的家长占82.40%;家长希望1剂次的价格<100元占34.57%,100~200元为40.30%,200~300元占13.47%;97.0%的家长希望疫苗免费或医保支付;家长知晓EV71灭活疫苗只预防EV71感染所致的手足口病仅占17.60%;接种EV71疫苗后仍有可能感染其他类型肠道病毒引起的手足口病,仍愿意接种该疫苗的占76.46%。多因素logistic回归分析结果显示,儿童年龄、家长年龄和职业是影响家长接种意愿的主要因素,对手足口病及其病原体和疫苗知晓度高、职业为个体、退休职工的家长更愿意给孩子接种EV71疫苗。结论:EV71疫苗知晓率较高,接种意愿较高,但实际接种率较低。需要针对性加强健康教育,提高接种率。

EV71病毒感染动物模型研究进展

人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起手足口病的主要病毒之一,并可导致严重的神经系统疾病,近年随着发病率的升高,严重威胁了婴幼儿的生命健康。可感染EV71的动物模型是研究其致病机理、疫苗评价和药物研发等的重要工具,然而目前尚未建立有效的EV71感染标准化动物模型。本文将对不同物种的EV71病毒感染模型进行总结,并着重就利用基因修饰手段建立的EV71病毒感染模型进行讨论和展望。

肠道病毒EV71新型VLPs疫苗的制备及鉴定

目的制备肠道病毒71型(EV71)的新型病毒样颗粒(VLPs)疫苗,为手足口病防治奠定基础。方法应用分子克隆技术构建外壳蛋白VP1融合基因cVP1,免疫细胞化学及Western Blot测定该融合基因在HeLa细胞表达情况;将cVP1克隆于杆状病毒表达载体pFastbac1,应用昆虫细胞TN5制备重组杆状病毒cVP1 rBV,再将此重组病毒与本室保存的gag rBV以不同MOI比例共感染昆虫细胞TN5,得到含有VP1的重组嵌合病毒样颗粒cVP1 VLPs,最后以Westem Blot及电镜进行鉴定。结果免疫细胞化学及Western Blot结果显示构建的融合基因cVP1可在真核细胞内表达,并成功制备成cVP1 rBV,该重组杆状病毒和gag rBV共感染昆虫细胞制备的VLPs结构完整。结论成功制备了EV71的新型VLPs疫苗,为后续研究打下了基础。