HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价

为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。

EV71灭活疫苗减少适龄儿童重症手足口病发生率的体会

文章探究内容是关于(手足口疫苗)EV71灭活疫苗减少适龄儿童重症手足口病发生率的体会。方法 对我科于2021年12月17日—2022年12月17日期间我科收纳的适龄儿童资料进行回顾分析,并从中摘取132例进行研究,每组各有适龄儿童66例,根据是否接种EV71灭活疫苗进行分组,空白组未接种EV71灭活疫苗,实验组接种了EV71灭活疫苗,最后对比两组儿童的手足口EV71发生率以及实验组儿童的并发症发生率。结果 实验组儿童的重症手足口并发生率明显低于空白组(P<0.05);实验组儿童中发生并发症例数为4例,分别是厌食1例,低热1例,腹泻2例,合计4例,不良反应发生率为6.06%例;另外发生皮肤肿胀1例,皮下硬结1例,合计2例,不良反应发生率为3.03%。以上患儿均采取相应措施后,72h后症状缓解。结论 给适龄儿童注射EV71灭活疫苗可降低重症手足口并发生率,注射结果安全,就算出现轻微不良反应,症状也会很快得到缓解,可长期推广于临床。

EV71灭活疫苗预防适龄儿童重症手足口病效果研究

目的 探讨接种2剂次肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)灭活疫苗对适龄儿童重症手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)的保护效果(vaccine efficacy, VE)。方法 选取广西壮族自治区妇幼保健院重症医学科2016年9月至2020年9月收治并上报中国疾病预防控制信息系统的109例6个月~5岁EV71型重症HFMD为病例组。按照1∶1配对,收集109例6个月~5岁健康儿童为对照组进行回顾性病例对照研究,计算EV71灭活疫苗的VE。结果 病例组2剂次EV71灭活疫苗的接种率明显低于对照组(9.17%比54.13%,χ^(2)=50.911,P<0.05);OR=0.086(95%CI:0.040~0.182),EV71灭活疫苗的VE为91.44%(95%CI:81.8%~96%)。结论 EV71灭活疫苗对EV71引起的重症HFMD发病有很好的保护作用,应该继续推广接种EV71灭活疫苗。

肠道病毒71型灭活疫苗上市后安全性主动与被动监测

目的:评价肠道病毒71型灭活疫苗(EV71疫苗)上市后人群使用安全性,为制定EV71疫苗免疫策略提供科学依据。方法:采用主动监测和被动监测相结合的研究方法,收集温州市EV71疫苗不良反应资料,使用SPSS23.0软件进行统计分析。结果:2017年EV71疫苗被动监测不良反应发生率为4.2/万剂,其中异常反应发生率0.5/万剂;主动监测不良反应发生率为156.7/万剂,其中异常反应发生率12.0/万剂;主动监测不良反应及异常反应发生率均高于被动监测,差异均有统计学意义(P<0.05)。主动监测不良反应主要发生在接种后30 min^3 d(占62.4%),临床表现以发热为主。不良反应发生率随年龄增加呈下降趋势,女性高于男性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EV71疫苗不良反应发生率处于较低水平,症状常较轻微,总体安全性良好,主动监测比被动监测更灵敏和准确。

儿童接种EV71手足口病疫苗对手足口病的预防效果及安全性分析

目的探索儿童接种肠道病毒71型(EV71)手足口病疫苗对手足口病的预防效果及安全性。方法选取2019年1月~2019年6月我院收治的适龄、无接种禁忌且自愿接种疫苗的儿童180例,按照两组基础资料具有匹配性的原则分为对照组和观察组各90例。观察组儿童给予接种EV71手足口病疫苗,对照组儿童则不作任何处理,对比两组儿童手足口病的预防效果及安全性。结果对照组儿童一年内的发病率为5.56%,显著高于观察组儿童的2.22%,差异有统计学意义(P<0.05);在接种30min、3天及28天后,观察组儿童中出现17例1级不良事件,4例2级不良事件,未出现3级不良事件。结论EV71手足口病疫苗应用于适龄儿童中可获得良好的预防效果及安全性,是现阶段预防手足口病的重要防治措施。

不同批次肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的一致性分析

目的分析不同批次的肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）灭活疫苗（人二倍体细胞）全程免疫后免疫原性及安全性的一致性。方法检测3批EV71灭活疫苗成品的抗原含量、游离甲醛含量、铝含量、内毒素含量、抗生素残留量,并免疫动物检测异常毒力及效力。采用随机、双盲的方法,将3批疫苗于第0、28天分别免疫900名6~72月龄的受试人群。于接种前（第0天）、完成2剂疫苗接种后28天（第56天）,采集静脉血,分离血清,采用微量细胞病变法检测EV71中和抗体（neutralizing antibody,Nab）效价;于每次接种后30 min内记录即时反应,每剂接种后0~7 d内记录各种征集性局部和全身症状,0~28 d内记录非征集性不良反应事件,并在整个观察期间报告严重不良反应事件。结果 3批EV71灭活疫苗成品的各项检定结果均在合格范围内。经2剂EV71灭活疫苗全程免疫后,20120101、20120102和20120203批疫苗受试者的抗体阳转率分别为98.00%、95.67%和98.67%,易感人群（Nab〈1∶8）免后抗体阳转率分别为96.45%、92.44%和97.60%,非易感人群（Nab≥1∶8）免后抗体水平的4倍增长率分别为67.94%、65.63%和71.43%;免后抗体GMT分别为283.79、231.48和285.78,组间差异均无统计学意义（P均〉0.05）。3批疫苗诱导的与疫苗相关的不良反应及严重不良反应事件,组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论通过比较3批疫苗的各项生产质量控制指标及其诱导的抗体水平,证实该疫苗的生产工艺较稳定。

广州市3岁及以下儿童监护人肠道病毒71型认知及其灭活疫苗自费接种意愿调查

目的了解广州市3岁及以下儿童监护人肠道病毒71型(EV71)认知情况及EV71灭活疫苗自费接种意愿、原因及影响因素,为制定EV71灭活疫苗接种策略提供数据参考。方法采用分层多阶段整群抽样方法,根据广州市2011-2015年全市12个行政区手足口病年均发病水平(按高、中、低划分),随机抽取广州市3个区6家预防接种门诊作为调查点,采用χ~2检验和非条件logistic回归方法对EV71灭活疫苗自愿接种意愿影响因素进行分析。结果本次共调查946名监护人,有效调查903人。本次调查中21.15%(191/903)的监护人听说过EV71,10.08%(91/903)的监护人知道EV71会引起多种疾病;12.18%(110/903)的监护人听说过EV71灭活疫苗。自费接种EV71灭活疫苗意愿率为76.19%(688/903)。多因素分析结果显示,非父母身份的监护人(OR=6.87)、听说过手足口病者(OR=4.41)、听说过EV71灭活疫苗者(OR=2.44)自费接种疫苗的意愿率较高。结论广州市3岁及以下儿童监护人EV71灭活疫苗自费接种意愿率较高,但存在错误认知;监护人对手足口病及EV71灭活疫苗的认知会影响接种意愿;身份为父母的接种意愿较非父母身份的接种意愿低;前一阶段的非法经营疫苗系列案件对本次的意愿调查有一定影响。建议加强手足口病及EV71灭活疫苗的大众宣传,尤其是针对儿童家长要进行精准宣传,并做好疫苗在疾病防控方面的正面宣传。

MF59佐剂对肠道病毒71型灭活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响

目的探讨MF59佐剂对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成10组:MF59佐剂+不同含量EV71灭活抗原(50 EU、100 EU)组、Al(OH)3佐剂0.5 mg+不同含量EV71灭活抗原(50 EU、100 EU)组和PBS阴性对照组,每组10只,分别经小鼠后肢肌肉和腹腔注射,200μl/只,共免疫2次,间隔4周(0、28 d)。分别于初免和加强免疫后28 d,采集小鼠尾静脉血,分离血清,采用微量中和试验法检测小鼠血清抗体水平。结果除阴性对照组外,各组小鼠血清抗体阳转率及中和抗体GMT值均随免疫剂量和免疫时间的延长呈升高趋势。初免后28 d,抗原含量为50 EU(低剂量)和100 EU(高剂量)各组中和抗体GMT均较低,组间差异均无统计学意义(P>0.05)。加强免疫后28 d,低剂量各组小鼠血清中和抗体GMT与初免比较均略有升高(P>0.05);高剂量各组小鼠血清中和抗体GMT与初免比较均明显升高,其中MF59佐剂肌肉注射组血清中和抗体GMT值最高(274.40),显著高于铝佐剂肌肉注射组(P<0.05)。结论 MF59佐剂可显著增强EV71灭活疫苗诱导小鼠的体液免疫应答。

2015—2020年海安市手足口病流行病学和病原学特征分析

目的 掌握海安市手足口病流行病学和病原学特征。方法 收集2015—2020年手足口病流行病学资料,采用描述性方法分析流行病学特征;采集病例标本,分析病原学特征。结果 2015—2020年,手足口病年均发病率为41.56/10万,呈现明显的季节性高峰,5—7月为发病主高峰(占55.05%);1~<3岁患者最多,占66.64%;男、女患者比为1.49∶1。病原学检测335例,阳性203例,阳性率60.60%;其中其他肠道病毒占58.13%(118例)、Cox A16占31.53%(64例)、EV71占10.34%(21例)。结论 海安市手足口病流行强度低于全国平均水平,非EV71和非Cox A16检出率增加。应加强疫情监测,为制定本地手足口病防控策略提供依据。

惠州市手足口病认知与EV71疫苗接种意愿及其影响因素分析

目的调查惠州市儿童家长手足口病认知与EV71疫苗接种意愿及影响因素。方法从惠州市所有接种疫苗的社区医疗服务中心中随机抽取出10家,于2018年1-12月期间在相应服务中心进行调查,采用自行设计的《惠州市儿童家长手足口病认知情况与EV71疫苗接种意愿调查问卷》,收集基本信息,分析手足口病认知情况、EV71疫苗接种意愿及其影响因素。结果本次研究共派发1 000份调查问卷,收回有效问卷925份。有接种EV71疫苗意愿551人(59.52%),家长主动了解EV71疫苗的信息237人(25.62%),EV71疫苗可预防EV71所致的手足口病421人(45.51%),说明家长仍对该疫苗了解较少或存在不信任。重症手足口病可有生命危险256人(27.68%),说明家长对重症手足口病的危害认识不足。接种意愿受这些因素的影响:儿童按惠州市要求进行体检、患过手足口病、知道手足口病、知道手足口病主要症状、了解手足口病的传播途径、EV71疫苗可预防EV71所致的手足口病、知道重症手足口病有生命危险(OR=3.725、1.842、8.282、7.300、2.694、3.864、11.628,P<0.05)。结论手足口病的健康教育和疫苗宣传需要有针对性,采取多种途径加大对EV71疫苗安全性、保护效果方面的宣传力度,提高家长对EV71疫苗的认识度与认可度。

儿童接种手足口疫苗(EV71型)在手足口病中的预防效果研究

探究手足口病(HFMD)预防方法,明确儿童接种手足口疫苗(EV71型)的作用。方法:研究样本为160例适龄儿童(2020年1月至12月),根据手足口疫苗接种情况,将其分为对照组(未接种)和观察组(已接种),各80例,对比两组HFMD发生情况,分析观察组接种安全性。结果:观察组(1.25%)儿童1年内HFMD发病率低于对照组(8.75%),有统计学意义(P<0.05);观察组儿童不良反应发病率为7.50%,均为1级、2级不良反应,无严重不良反应。结论:适龄儿童接种EV71型手足口疫苗十分重要,可有效预防HFMD的发生,且安全性理想。

遵义市红花岗区2011年—2020年手足口病发病情况分析

目的:分析近十年来遵义市红花岗区手足口病的发病特征,为制定防控方案和防控措施提供科学有效依据。方法:描述性分析2011年—2020年红花岗区手足口病的发病情况和影响因素。结果:红花岗区2011年—2020年手足口病累计发病22822例,平均发病率为300.51/10万;重症手足口病累计发生374例,占1.64%。2012年—2019年发病主高峰为4月—6月,次高峰为9月—11月。普通手足口病和重症手足口病的病原体分布情况,2012年前以EV71感染为主,2013年后以其他肠道病毒感染为主。2016年—2020年累计接种EV71灭活疫苗102200剂次、51100人次。结论:EV71灭活疫苗能有效减少EV71病毒感染引起的重型手足口病的发生,病原体的变化提醒我们应加强监测,提高其他肠道病毒的分型鉴别能力。