RP-HPLC法测定人血浆中EXH-1626的浓度

目的:建立测定人血浆中EXH-1626浓度的HPLC方法。方法:采用美国Waters Symmetry Shield^(TM) RP_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(30:70),流速1.0 ml·min^(-1);检测波长281 nm;柱温30℃;血样品经全血沉淀剂直接沉淀蛋白后进样。结果:EXH-1626血浆浓度与峰面积线性关系良好,回归方程为A=2.566 7×10~4C+1.768 6×10~3,r=0.999 5;线性范围0.05～10.00μg·ml^(-1),定量下限为0.05μg·ml^(-1),血浆内源性杂质不干扰待测物测定。结论:该法可用于EXH-1626血药浓度的含量测定,专属准确、快速。

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度及其药代动力学研究

目的建立大鼠血浆中EXH-1626的LC-MS定量分析方法,并运用于大鼠体内EXH-1626的药代动力学研究。方法色谱柱为汉邦ODS C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵水溶液（用乙酸调pH至3）70∶30,流速为0.6 mL/min;质谱用ESI离子源及选择性离子监测（SIM）。血浆样品加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂沉淀血浆蛋白,测定EXH-1626的血药浓度,数据经BAPP2.2软件拟合处理,分别考察2个剂量下灌胃和静脉注射给药后,大鼠体内的药代动力学特征。结果血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/mL范围内线性关系良好（r=0.999 7）,方法学回收率、精密度、稳定性等均符合要求。大鼠灌胃给药（80 mg/kg）后,其血药浓度-时间过程符合一室模型（W=1）,t1/2为24.14 h、Cmax为222.33 ng/mL、Tmax为5.50 h,当大剂量灌胃给药（250 mg/kg）时,大鼠体内药时曲线呈现多峰曲线,药动学过程呈现明显的非线性特征;大鼠尾静脉注射给药（10和20 mg/kg）后体内药时过程也符合一室模型（W=1）,t1/2分别为2.23和5.48 h、血浆清除率（CL）分别为0.29和0.08 L/（h·kg）。结论 EXH-1626在大鼠体内存在饱和非线性动力学,所建立的方法快速、准确、灵敏度高,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究。

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度

目的：建立测定大鼠血浆中EXH-1626浓度的液相色谱-质谱（LC-MS）方法。方法：大鼠血浆样品中加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂（甲醇∶5%硫酸锌溶液 = 70∶30,V/V）沉淀血浆蛋白后取上清液5 μl进行LC-MS测定。色谱条件：色谱柱为汉邦ODS C18柱（5 μm,150 mm × 4.6 mm）,流动相为乙腈∶10 mmol/L醋酸铵水溶液（用乙酸调pH至3）70∶30,流速为0.6 ml/min,柱温30℃;质谱条件：采用电喷雾离子化（ESI）方式,以选择性离子监测（SIM）方式检测,EXH-1626和内标选择检测离子的质荷比（m/z）分别为453.3（[M＋H]＋）和274.3（[M＋H]＋）。结果：大鼠血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/ml内线性关系良好（r = 0.999 7）,最低定量限（LOQ）为5 ng/ml,由低到高（10。100。1 000和10 000 ng/ml）4个浓度的日内和日间精密度RSD均〈 10%,绝对回收率均〉 70%,相对回收率90%~110%。结论：该方法快速。准确,灵敏度高,操作简便,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究。