43株临床铜绿假单胞菌exoS、exoU基因的携带及其耐药性

目的研究43株临床分离的铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒素基因exoS、exoU携带情况以及细菌的耐药性。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测毒素基因的分布,K-B纸片扩散法检测细菌的耐药性。结果 43株临床铜绿假单胞菌中,37株(86.05%)exoS基因阳性,6株(13.95%)exoU基因阳性,无同时携带2种基因菌株。携带exoU的临床株对9种抗菌药物的耐药率均高于携带eroS菌株,其中对头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率差异有显著性(P<0.05)。结论携带毒素基因exoU的铜绿假单胞菌临床株所占比例较低,但耐药率高。

利用分子信标和EXO Ⅲ放大荧光信号快速检测Ag^+

设计新型的DNA探针,其主要功能区域包含适配体区域和分子信标互补区域;当无靶标存在时,羧基荧光素(FAM)的荧光被黑洞猝灭基团(BHQ)猝灭,加入靶标后,Ag^+与适配体区域特异性结合,使得分子信标与其互补区域发生结合,加入EXO III后,分子信标被酶解,从而释放Ag^+/DNA探针复合物用于下一轮反应,同时产生大量的FAM,因此,可以通过荧光的增强来定量检测靶标的含量.评价了该方法的灵敏度和选择性,探究它在实际样品中的表现能力.结果表明,适配体区域与分子信标间隔2个碱基的DNA探针与分子信标结合效果最好,检测的信噪比最大.该方法对Ag^+的检测最低下限(LOD)为0.1nmol/L,在0.5~200nmol/L范围内,荧光值与靶标浓度成线性关系(R^2=0.994).对实际样品的检测在20~200nmol/L范围内呈线性关系(R^2=0.998),且能很好的从混合样品中区分10nmol/L Ag^+.该研究建立的快速检测Ag^+方法具有良好的线性定量能力和操作性能,且灵敏度高、特异性强,可满足现实的需求.