胃癌患者癌组织及血清中lncRNA EXOC7的表达及其临床意义

目的探讨胃癌患者癌组织及血清中lncRNA EXOC7的表达及其临床意义。方法 选取郑州大学第五附属医院2016年1月至2018年6月收治的134例胃癌患者为研究对象,收集胃癌患者的癌组织、对应癌旁组织(距癌组织边缘≥1 cm)及血清样本,另将同期在我院体检的80名体检正常者作为对照组,采集血清样本,应用qRT-PCR技术检测组织及血清中lncRNA EXOC7的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果 qRT-PCR结果显示,胃癌组织中lncRNA EXOC7的相对表达量(8.24±1.86)明显高于癌旁组织(2.37±0.81),且差异有统计学意义( t=33.494,P =0.000);胃癌患者血清中lncRNA EXOC7的相对表达量( 4.29± 0.47)明显高于对照组(0.92±0.23),且差异有统计学意义( t=74.553,P =0.000);不同性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置的患者胃癌组织及血清中lncRNA EXOC7表达水平比较,差异均无显著统计学意义( P >0.05),但胃癌患者血清及癌组织中lncRNA EXOC7在不同临床分期、浸润深度、分化程度及有无脉管癌栓、淋巴结转移中的表达比较,差异有显著统计学意义( P <0.05),即TNM分期越高、分化程度越低、浸润深度越深、有淋巴结转移、有脉管癌栓的患者,其胃癌组织及血清中lncRNA EXOC7表达水平越高。结论 lncRNA EXOC7在胃癌患者血清及癌组织中均呈高表达,其与胃癌恶性程度相关,可能成为胃癌早期诊断及病情判断的潜在指标。

Exocyst敲减对肾足细胞缺失及功能紊乱的影响

目的:探讨Exocyst敲减对肾足细胞缺失及功能紊乱的影响。方法:采用对数生长期的人肾足细胞,分别转染对照组和shRNA Exoc5。流式检测细胞周期和凋亡,RT-PCR检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Exoc1-8、裂孔膜蛋白Nephrin和肾小球蛋白Neph1的表达情况,免疫荧光检测细胞中裂孔膜蛋白Nephrin和Neph1定位情况,活细胞显微镜观察囊泡运动。结果:与对照组相比,Exocyst敲减肾足细胞细胞凋亡率明显升高、Caspase-3表达增加(P<0. 05);此外,Exocyst敲减导致Nephrin和Neph1错误定位和囊泡运动减少,过表达Exoc5可挽救Nephrin和Neph1定位。结论:本研究显示,Exocyst家族重要组分Exoc5敲减可导致肾足细胞凋亡增加,促使Nephrin和Neph1错误定位和囊泡运动减少,可能是肾足细胞损伤和功能紊乱的重要原因。

糖尿病肾病患者血清LncRNA EXOC7的表达及意义

目的探讨LncRNA EXOC7(EXOC7)在糖尿病肾病患者血清中的表达及其临床意义。方法通过qRT-PCR法检测120例Ⅱ型糖尿肾病患者、120例无肾脏损害的Ⅱ型糖尿病患者及120例健康对照组血清中EXOC7的表达,分析其与患者蛋白尿、肾小球滤过率等临床病理参数的相关性。结果与健康对照组比较,EXOC7在Ⅱ型糖尿病患者及糖尿病肾病患者中的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与Ⅱ型糖尿病患者比较,糖尿病肾病患者血清中EXOC7的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。EXOC7在合并大量蛋白尿的糖尿病肾病患者中的表达明显高于合并微量蛋白尿患者,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LncRNA EXOC7的表达与蛋白尿、空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三脂及低密度脂蛋白(LDL)的表达量呈正相关关系,差异有有统计学意义(P均<0.05);而与肾小球滤过率呈负相关关系(P<0.001)。多因素分析发现,空腹血糖、eGFR、HbA1c、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白是影响患者蛋白尿的因素(P<0.05)。结论 EXOC7的高表达与Ⅱ型糖尿病患者糖尿病肾病的发展有关,有望成为预测糖尿病肾病患者预后的生物标志物。

长链非编码RNA EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义分析

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法本研究纳入2015年1月~2018年5月收治的75例非小细胞肺癌患者,采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织及对应癌旁组织中的表达,比较癌及癌旁组织中lncRNA EXOC7的表达差异性,并分析癌组织中lncRNA EXOC7的表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果非小细胞肺癌组织中lncRNA EXOC7的相对表达水平(7.88±1.04)明显高于癌旁组织(1.33±0.79),差异具有统计学意义(P<0.001)。不同性别、年龄、病理类型、组织分化程度的非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达无明显差异性(P>0.05),但不同TNM分期、淋巴结转移状况与非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达存在显著差异性(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组无进展生存期[(10.09±1.93)个月]明显短于低表达组[(19.77±2.16)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组总生存期[(14.82±2.05)个月]明显短于低表达组[(26.18±2.87)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织中表达上调,其可能作为一种促癌因子参与非小细胞肺癌的发生及发展过程,并与患者的不良预后有关。

宫颈鳞状细胞癌组织LncRNA EXOC7表达与预后相关性研究

目的宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一。长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究拟探讨长链非编码RNA外泌体复合物7(Long non-coding RNA Exocyst complex component 7,LncRNA EXOC7)在宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell cancer,SCC)组织中的表达及临床意义。方法收集2012-01-01-2016-12-30四川省人民医院肿瘤科及妇产科行手术及穿刺活检的98例SCC患者组织标本,其中癌旁组织(距癌组织>2cm)58例;同期收集该院40例正常宫颈组织。采用QRT-PCR法检测SCC组织及癌旁组织标本中LncRNA EXOC7的表达,采用单因素及多因素Cox回归分析LncRNA EXOC7的表达与患者临床病理特征及预后的关系,生存曲线分析LncRNA EXOC7与患者总生存时间(overall survival,OS)及无进展生存时间(progression free survival,PFS)的关系。结果 SCC组织中lncRNA EXOC7的平均表达量为(6.805±1.475),明显高于癌旁组织(1.510±0.860)及正常宫颈组织(1.476±0.33)的平均表达量,差异有统计学意义,F=74.43,P<0.001。LncRNA EXOC7高表达与患者的FIGO分期、淋巴结转移和肿瘤浸润深度相关,差异均有统计学意义,均P<0.05;高表达组LncRNA EXOC7患者PFS为(12.00±1.55)个月,较低表达组(27.35±2.25)个月明显缩短,差异有统计学意义,χ2=51.650,P<0.001;高表达组LncRNA EXOC7患者OS为(25.08±3.32)个月,较低表达组(44.80±2.92)个月明显缩短,差异有统计学意义,χ2=38.23,P<0.001;Cox多因素分析显示,LncRNA EXOC7的表达是SCC患者的独立预后因素,HR=3.750,95%CI为1.530~7.97,P<0.001。结论高表达LncRNA EXOC7SCC患者的预后差,LncRNA EXOC7可能作为潜在的SCC治疗靶点及新预后评估分子标志物。

红鳍东方鲀低温胁迫应答主效QTL候选基因的表达特征分析

红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)为暖温性、广温性鱼类,低温的冬季海水会对其生存造成很大影响,因此,选育具有抗寒性状的品系对其产业发展具有重要意义。本研究在利用QTL(quantitative trait locus)定位分析筛选出6个与红鳍东方鲀耐低温相关的候选基因(tacc2、fsip1、exoc4、arhgap44a、pde10a和unc5b)的基础上,通过Real-time PCR检测这6个基因在低温胁迫下在肝脏、心脏和肾脏中表达量的变化。实验用鱼为课题组建立的同一家系的8月龄鱼,共设置3个温度梯度(8℃、13℃和18℃),8℃和13℃为低温组,18℃为对照组。结果显示,6个基因在不同温度下的3个组织中均有不同程度的表达。其中,pde10a基因在3个组织中的表达均呈先升高后下降的趋势;tacc2和exoc4基因在8℃组肝脏、肾脏以及心脏中的表达分别呈先下降再趋于稳定、先升高再趋于稳定和先上升后下降的趋势;unc5b基因在肝脏和心脏中的表达量较低,在低温组实验前期的肾脏中呈现高表达;arhgap44a基因在肝脏中的表达呈上升趋势,在心脏和肾脏中整体表达无明显变化;fsip1基因在肝脏中的表达呈下降趋势,在心脏和肾脏中的表达呈先上升后下降的趋势。这6个基因在红鳍东方鲀组织中均随着时间和温度变化具有差异性表达,在低温胁迫下呈现积极响应,表明这6个QTL候选基因在红鳍东方鲀低温适应中具有潜在的重要作用。本研究可为红鳍东方鲀耐低温相关信号通路研究以及耐低温品种选育提供理论依据。

连翘苷对胃癌细胞AGS增殖、迁移和侵袭的抑制作用

目的探讨连翘苷对胃癌细胞AGS增殖、迁移和侵袭的抑制作用。方法5、10、20μmol/L连翘苷作用AGS细胞24 h后,CCK-8、Transwell法检测细胞增殖、迁移和侵袭,Western blot法检测Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白表达,RT-qPCR法检测lncRNA EXOC 7 mRNA表达。转染EXOC 7表达小干扰RNA至AGS细胞,观察降低EXOC 7表达对AGS细胞增殖、迁移和侵袭及Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果连翘苷作用于AGS细胞后,细胞增殖活力、迁移和侵袭数,Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白,EXOC 7 mRNA表达均降低(P<0.05)。抑制EXOC 7表达后,AGS细胞增殖活力、迁移和侵袭数,Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白表达均降低(P<0.05)。过表达EXOC 7可以逆转连翘苷对AGS细胞增殖、迁移和侵袭及Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结论连翘苷可能通过降低EXOC 7表达抑制胃癌细胞AGS增殖、迁移和侵袭。