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赤爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida Sarigny)纤溶酶的研究Ⅱ药理学作用 被引量:6
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作者 杨志兴 杨学成 +9 位作者 张云湖 马元生 李洪超 刘伟民 赵晓祥 姜凯波 张昕 赵克强 董桂华 张凤琴 《生物技术》 CAS CSCD 1992年第1期15-18,共4页
对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与... 对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与抗凝作用. 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 溶血栓 药理
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蚯蚓纤溶酶抑制胃癌细胞株MGC803增殖及诱导凋亡的作用 被引量:9
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作者 余艳秋 陈洪 +1 位作者 黄锦 张治国 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2007年第1期10-13,共4页
目的:研究蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803抑制增殖及诱导凋亡的作用,并初步探讨蚯蚓纤溶酶诱导凋亡的作用机制。方法:采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞增殖的影响,DNA凝胶电泳技术观察凋亡细胞变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化... 目的:研究蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803抑制增殖及诱导凋亡的作用,并初步探讨蚯蚓纤溶酶诱导凋亡的作用机制。方法:采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞增殖的影响,DNA凝胶电泳技术观察凋亡细胞变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化,免疫细胞化学染色法检测蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞p53蛋白表达的影响。结果:蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞增殖有明显抑制作用,呈剂量依赖性。蚯蚓纤溶酶4 uku.ml-1作用于胃癌细胞48 h后,DNA琼脂糖凝胶电泳观察到典型梯状条带。蚯蚓纤溶酶浓度分别为2、4、8 uku.ml-1作用于胃癌细胞48 h后均可诱导细胞凋亡,各组细胞凋亡率分别为(29.51±5.54)%、(61.63±7.12)%、(80.82±5.40)%,与对照组相比,凋亡率升高有统计学意义(P<0.01)。蚯蚓纤溶酶2、3 uku.ml-1组作用于细胞48 h后,p53蛋白表达减少,平均光强度分别为1.299±0.07、1.203±0.06,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蚯蚓纤溶酶在体外可以抑制MGC803细胞增殖,其机制可能与蚯蚓纤溶酶抑制p53蛋白表达并诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 人胃癌细胞 细胞凋亡 P53蛋白
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一种测定蚯蚓纤溶酶活力的简易方法 被引量:9
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作者 邵承斌 杨继虞 +1 位作者 徐敏华 俞纯方 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1997年第6期301-304,共4页
在全面考查温度、底物浓度、酶浓度和酶促反应时间等条件的基础上,改进了用合成底物BAEE测定蚯蚓纤溶酶的方法。该法重复性好,测试条件易于控制,可用于蚯蚓纤溶酶生产的质量控制。
关键词 紫外法 蚯蚓纤溶酶 BAEE 测定
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赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质 被引量:2
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作者 杨志兴 杨学成 +7 位作者 张云湖 马元生 李洪超 刘伟民 赵晓祥 姜凯波 赵克强 董桂华 《生物技术》 CAS CSCD 1991年第5期22-25,共4页
采用35%和65%的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤... 采用35%和65%的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 赤爱胜蚯蚓 提取
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蟛蜞菊内酯联合蚯蚓纤溶酶对Hhcy大鼠血管保护作用的研究 被引量:4
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作者 黄川锋 魏严 +4 位作者 尚喜雨 刘庆春 李旻 周毕军 王卫娜 《中医临床研究》 2021年第3期47-49,共3页
目的:探讨蟛蜞菊内酯联合蚯蚓纤溶酶对高同型半胱氨酸血症(Hyperhom Ocysteinemia,Hhcy)大鼠血管的保护作用。方法:将SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、阳性药物组、蟛蜞菊内酯(Wedelolactone,Wed)药物组、蚯... 目的:探讨蟛蜞菊内酯联合蚯蚓纤溶酶对高同型半胱氨酸血症(Hyperhom Ocysteinemia,Hhcy)大鼠血管的保护作用。方法:将SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、阳性药物组、蟛蜞菊内酯(Wedelolactone,Wed)药物组、蚯蚓纤溶酶(Earthworm Fibrinolyticl Enzyme,EFE)药物组和Wed+EFE药物组。正常组喂饲普通饲料,其余各组喂饲高L-蛋氨酸饲料(2%L-蛋氨酸+普通饲料)。各组均采用每日灌胃给药,正常组和模型组给予生理盐水,阳性药物组给予联合用药,叶酸、维生素B12(VitB12)和维生素B6(VitB6)用量分别为0.49 mg/kg、2.47 mg/kg、0.49 mg/kg,其余各组分别以Wed(100 mg/kg)、EFE(1000μku/kg)、Wed+EFE灌胃,8周后比色法测定同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、白介素1α(Interleukin-1α,IL-1α)和白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、血清胆固醇(Total Cholesterol,TC),三酰甘油(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白(High-Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)水平。结果:蟛蜞菊内酯和蚯蚓纤溶酶单独作用时,对降低大鼠Hcy、IL-1α、IL-1β,控制血浆中TC、TG、LDL-C水平升高,均显示出一定作用,Wed+EFE联合作用可有效控制血浆Hcy、炎症介质IL-1α和IL-1β的升高,对降低TC、TG和LDL-C也有很好的作用,且能明显升高血浆HDL-C水平,这一点优于阳性药物对照组。结论:蟛蜞菊内酯和蚯蚓纤溶酶的联合应用能够降低血浆中Hcy、IL-1α和IL-1β水平,降低TC、TG和LDL-C水平,并有效提升血浆HDL-C水平,这将有利于临床控制(Atherosclerosis,AS)的发生和发展。 展开更多
关键词 蟛蜞菊内酯 蚯蚓纤溶酶 动脉粥样硬化 血管保护
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蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺研究
6
作者 陈安和 袁大钧 +1 位作者 张德操 张慈爱 《渝州大学学报》 1991年第3期33-39,共7页
以人工饲养的北星二号蚯蚓为材料,通过对14种进口和国产离子交换树脂和 DEAE-纤维素的筛选试验和比较研究,确定了蚯蚓纤溶酶的分离纯化的较佳工艺:组织匀浆或磷酸缓冲液保温提取→Amberlite IRA 904或 DEAE-纤维素离子交换柱层析分离→S... 以人工饲养的北星二号蚯蚓为材料,通过对14种进口和国产离子交换树脂和 DEAE-纤维素的筛选试验和比较研究,确定了蚯蚓纤溶酶的分离纯化的较佳工艺:组织匀浆或磷酸缓冲液保温提取→Amberlite IRA 904或 DEAE-纤维素离子交换柱层析分离→Sephadex G 100或 Sephadtx G 75凝胶层析纯化→真空冷冻干燥得蚯蚓纤溶酶冻干粉。该工艺所需设备简单,操作方便,适合中。 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 分离 纯化
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蚯蚓纤溶酶与“龙心”的比较研究
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作者 陈安和 袁大钧 邵承斌 《渝州大学学报》 1991年第2期74-78,共5页
以北星二号蚯蚓为材料,分离纯化蚯蚓纤溶酶。并对其理化性质、溶纤机理等与“龙心”进行了比较。蚯蚓纤溶酶和“龙心”主要组份的分子量分别为37200和43500。蚯蚓纤溶酶和“龙心”的溶纤比活力(mm^2/mg蛋白)分别为83700和24430蚯蚓纤溶... 以北星二号蚯蚓为材料,分离纯化蚯蚓纤溶酶。并对其理化性质、溶纤机理等与“龙心”进行了比较。蚯蚓纤溶酶和“龙心”主要组份的分子量分别为37200和43500。蚯蚓纤溶酶和“龙心”的溶纤比活力(mm^2/mg蛋白)分别为83700和24430蚯蚓纤溶酶既能直接水解血纤维蛋白,又能激活血纤溶酶原。在0—4℃时也能水解血纤维蛋白。蚯蚓纤溶酶经DEAE-Sepharose离子交换柱层析,可分离为9个纤溶活力不同的组分。 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 龙心
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蚯蚓纤溶酶增加胃癌细胞对放射线敏感性的实验研究 被引量:2
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作者 黄锦 陈洪 +2 位作者 涂文勇 余艳秋 张治国 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2007年第1期16-19,共4页
目的探讨蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞株MGC803的放射增敏作用及机制。方法采用克隆形成实验观察蚯蚓纤溶酶的放射增敏作用;流式细胞术观察药物对胃癌细胞株MGC803周期分布的影响;RT-PCR法检测药物对细胞内硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGPx)基因表... 目的探讨蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞株MGC803的放射增敏作用及机制。方法采用克隆形成实验观察蚯蚓纤溶酶的放射增敏作用;流式细胞术观察药物对胃癌细胞株MGC803周期分布的影响;RT-PCR法检测药物对细胞内硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGPx)基因表达的影响。结果蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞有放射增敏效应,100uku/L、300uku/L蚯蚓纤溶酶的放射增敏比分别为1.06和1.14。射线照射后MGC803细胞发生G1期阻滞,蚯蚓纤溶酶对细胞G1期阻滞无明显影响;PCR检测发现射线可诱导的SeGPxmRNA表达下调,蚯蚓纤溶酶能够增强射线诱导的SeGPxmRNA表达下调作用。结论蚯蚓纤溶酶能够增加胃癌细胞对放射线的敏感性,增敏机理可能与药物下调细胞内抗氧化酶SeGPx基因表达有关。 展开更多
关键词 胃癌细胞株MGC803 蚯蚓纤溶酶 放射增敏
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蚯蚓血纤蛋白溶酶提取工艺研究 被引量:2
9
作者 古志平 苏广健 《广州食品工业科技》 2000年第4期76-77,共2页
以新鲜蚯蚓为材料,先采用硫酸铵沉淀出粗酶,再用SephadexG-50,DEAE-纤维素层析方法从蚯蚓粗酶中分离纯化出血纤蛋白溶酶,为开发、生产纤溶酶提供参考。
关键词 蚯蚓 血纤蛋白溶酶 提取 药用 纤溶酶
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Earthworm fibrinolytic enzyme:anti-tumor activity on human hepatoma cells in vitro and in vivo 被引量:28
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作者 CHEN Hong Shoichi Takahashi +4 位作者 Michio Imamura Eiko Okutani ZHANG Zhi-guo Kazuaki Chayama CHEN Bao-an 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2007年第10期898-904,共7页
Background The earthworm fibrinolytic enzyme (EFE) is a complex protein enzyme that is widely distributed in the earthworm's digestive cavity. Possessing strong protein hydrolysis activity, EFE not only has a direc... Background The earthworm fibrinolytic enzyme (EFE) is a complex protein enzyme that is widely distributed in the earthworm's digestive cavity. Possessing strong protein hydrolysis activity, EFE not only has a direct effect on fibrin, but also can activate plasminogen. Its therapeutic and preventative effects on thrombosis-related disease have been confirmed clinically. Recently, there has been increased interest in the anti-tumor activity of EFE. In this study, the anti-tumor activity of EFE, isolated from Eisenia foetida, on human hepatoma cells was evaluated in vitro and in vivo. The potential mechanisms involved were also studied. Methods In vitro experiments were performed in four human hepatoma cell lines: HLE, Huh7, PLC/PRF/5 and HepG2. After treatment with EFE in various concentrations, the inhibition of the rate of cell proliferation was measured. For the in vivo studies, tumor-bearing models xenografted with Huh7 cells were developed in nude mice, and then the mice were fed with EFE once a day for 4 weeks, and the control group received only saline. An inhibitory effect on tumor growth was observed. Also, apoptosis was observed with flow cytometric assay and fluorescent dye staining with acridine orange and ethidium bromide (AO/EB). The expression of matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) were detected by Western blotting assay. Results After treatment with various concentrations of EFE, the proliferation of all hepatoma cell lines was suppressed to varying degrees in vitro. The IC50 for HLE, Huh7, PLC/PCF/5 and HepG2 were 2.11, 5.87, 25.29 and 17.30 uku/ml, respectively. After administration of EFE orally for 4 weeks, the growth of tumor xenograft of Huh7 cells in nude mice was significantly inhibited in vivo. The tumor inhibitory rates in the EFE 500 uku/(kg·d) and 1000 uku/(kg·d) groups were 46.08% (compared with control group, P=0.026) and 57.52% (compared with control group, P=0.002) respectively. Meanwhile, the average weight of body, spleen or thymus did not show any remarkable differences among the various groups. The population in sub-G1 stage was more in the EFE treated groups than in the control group according to flow cytometric assay. After treatment with EFE 0, 5, 10 uku/ml for 72 hours, the apoptotic rates were 3.5%, 10.9% and 12.3% in HLE cells, and 5.0%, 24.7% and 34.5% in Huh7 cells respectively. Under fluorescent staining with AO/EB, the apoptotic morphological changes could be detected more significantly in the EFE treated groups than in the untreated groups. After treatment with EFE in doses of 0, 5, 10 uku/ml for 72 hours, the apoptotic rates were 3.02%, 8.76%, 10.54% in HLE cells, and 3.95%, 18.27%, 30.89% in Huh7 cells respectively. The apoptosis-inducing effects of EFE occurred in a dose dependent manner. Western blotting assay showed that, after treatment with EFE, the secretions of MMP-2 were significantly inhibited in HLE and Huh7 cells. Conclusions EFE showed significant anti-tumor activity in hepatoma cells both in vitro and in vivo, which may be because EFE could induce apoptosis of hepatoma cells and inhibit the expression of MMP-2. This suggests that EFE has a potential role in the treatment of hepatoma. 展开更多
关键词 earthworm fibrinolysin liver neoplasm mice nude apoptosis
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蚯蚓纤溶酶的分离及其生物学特性 被引量:3
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作者 李长公 曾耀辉 《清华大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 1993年第3期100-106,共7页
经过分离纯化,从人工养殖的赤子爱胜蚓中提取出两种既有纤维蛋白溶酶原激活因子活性又能直接溶解纤维蛋白的组分。PAGE检测各为一条区带,证明已达电泳纯。对这两组分的生物学性质进行了研究,包括分子量、酶活力,N-末端氨基酸... 经过分离纯化,从人工养殖的赤子爱胜蚓中提取出两种既有纤维蛋白溶酶原激活因子活性又能直接溶解纤维蛋白的组分。PAGE检测各为一条区带,证明已达电泳纯。对这两组分的生物学性质进行了研究,包括分子量、酶活力,N-末端氨基酸残基,氨基酸组成,温度的稳定性及对苯甲酸精氨酸乙酯(BAEE)的酶促反应动力学特性。还分析了其中一个组分(BⅡ)从N末端开始的 25个氨基酸残基序列。 展开更多
关键词 蚓蚯 蛋白酶 纤溶酶 分离
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