灯盏花Eb14-3-3基因的克隆及表达分析

为探究灯盏花Eb14-3-3基因表达特征,本研究从灯盏花基因组数据库中克隆了拟南芥同源基因灯盏花14-3-3υ序列信息,利用生物信息学方法对该蛋白的功能和活性位点进行预测,通过荧光定量PCR分析在非生物胁迫条件下该基因的表达变化。结果表明,Eb14-3-3的ORF序列长804 bp,编码267个氨基酸;该蛋白的分子量和理论等电点分别为65296 k D和5.16。Eb14-3-3蛋白序列中富含磷酸化位点,为一个非分泌型蛋白,并且在其结构中无跨膜结构域。二级结构分析显示有156个α-螺旋,47个片层延伸,9个β转角,55个无规则卷曲,属于14-3-3蛋白家族成员。RT-qPCR表达模式分析表明,5%PEG处理后,灯盏花叶、花和茎中Eb14-3-3基因的表达量在24 h明显上升,但在处理48 h后,Eb14-3-3的表达量大幅度下降;Eb14-3-3基因在灯盏花根部的表达量,在5%PEG处理10 h后,其表达量显著上升,并在处理后48 h呈现显著下降趋势。本研究将为培育新的灯盏花抗逆种质资源提供研究理论基础。