消除大肠杆菌06对体外人前向运动精子百分率影响的实验研究

为了阐明不同处理方法能否消除大肠杆菌06对体外人精子运动的影响,本研究先将大肠杆菌06悬液分别经煮沸、超声、TMP和强力霉素处理,再将其在体外与10例健康成年生育男性的经上游优化处理精子一起孵化,于孵化0、2、4和6h采用德国Mika计算机辅助的精子分析系统分析其体外对人精子前向运动百分率的影响,结果显示:活大肠杆菌06悬液体外能引起人精子凝集,并明显降低前向运动精子百分率,而经煮沸、超声、TMP和强力霉素杀菌处理后的大肠杆菌06悬液体外对人精子无凝集作用,对人前向运动精子百分率亦无影响.这说明经一定方法处理能消除大肠杆菌06悬液体外对人精子的影响.

不育男性精液中大肠埃希菌及其毒力基因对精子活力影响的研究

目的探讨不育男性精液中大肠埃希菌感染对精子活力的影响,并分析大肠埃希菌毒力基因在不同精子活力组间的表达差异。方法回顾性收集2022年1月至2023年2月就诊于温州市中医院的不育男性精液445份和男性志愿者正常精液15份,进行细菌培养后从72例不育男性患者精液中分离出非重复大肠埃希菌72株,分别与正常精液孵育30 min后检测精子活力,其中引起精子活力明显降低的菌株归为制动阳性组,其余菌株归为制动阴性组。同时采用PCR法对大肠埃希菌相关毒力基因fimH、papGⅡ、papGⅢ、afa/dra、cnf-Ⅰ、kpsMTⅡ、hlyA、fyuA和菌体O抗原(O1、O_(2)、O4、O6)进行检测,分析以上毒力基因在制动阴性组和制动阳性组中检出率的差异。结果大肠埃希菌携带的主要毒力基因有fimH、fyuA、kpsMTⅡ、hlyA、cnf-Ⅰ,检出率分别为95.8%、83.3%、81.9%、45.8%及40.3%。72株大肠埃希菌中制动阳性组占42株,制动阴性组占30株。制动阳性组毒力基因hlyA检出率57.1%,远高于制动阴性组的30.0%,差异有统计学意义(P<0.05),其余毒力基因检出率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论不育男性精液中精子活力降低可能与大肠埃希菌α-溶血素编码基因hlyA相关。

大肠杆菌O_6毒素体外对人前向运动精子百分率的影响

将高浓度大肠杆菌Ｏ６的ＨＡＭ’ｓＦ１０悬液置入３７℃恒温孵化１０、３０和１８０ｍｉｎ后，分别稀释、过滤和离心制备大肠杆菌Ｏ６悬液、滤液和离心上清液，然后将其在体外与１０例健康成年生育男性精子一起孵化０、１、２、４和６ｈ，再采用德国Ｍｉｋａ计算机辅助的精子分析系统分析大肠杆菌Ｏ６悬液及其滤液和离心上清液体对精子前向运动百分率的影响。结果显示：不同孵化时间的大肠杆菌悬液在体外均能引起人精子前向运动百分率显著降低，但其滤液和离心上清液无类似作用。因此，可以认为大肠杆菌Ｏ６在体外对精子的作用在于细菌本身，而细菌毒素并无作用。

大肠埃希菌体外感染对人精子运动参数、超微结构和细胞凋亡的影响

目的研究体外大肠埃希菌感染对人精子运动功能、超微结构和细胞凋亡的影响,寻找男性不育原因,为诊断和治疗病原微生物感染所致男性不育提供依据。方法取30名健康青年男性精液,制备精子悬液,分为A、B、C、D 4组:未处理的精子悬液作为A组(空白对照),大肠埃希菌悬液与精子悬液混合液为B组,中药清利生精丸处理的大肠埃希菌与精子混合液为C组,呋喃坦啶处理的大肠埃希菌与精子混合液为D组,分别在0、2、4h用CASA系统分析各组精子参数,用透射电镜观察精子超微结构,用FITC-AnnenixV/PI双色荧光染色结合流式细胞技术检测精子凋亡情况。结果 B组在4h时精子前向运动百分率、VSL、VCL、VAP、ALH等运动参数均显著下降,与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.01);电镜下观察对照组和用药物处理组精子超微结构无明显改变,B组精子超微结构出现明显改变;B组精子细胞凋亡增加,凋亡率与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论大肠埃希菌体外感染可显著抑制精子运动,导致细胞超微结构异常、细胞凋亡率增高。推测大肠埃希菌感染可能是导致男性不育的原因之一。