期刊文献+
共找到2篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
细粒棘球蚴AgB8/2基因的原核表达及免疫学鉴定 被引量:5
1
作者 陈献威 王志钢 +4 位作者 王红霞 毕玉新 李树裕 李洁 王媛媛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期130-135,共6页
旨在克隆细粒棘球蚴AgB8/2基因,优化原核表达体系,鉴定纯化蛋白并初步确定其诊断价值。采用RT-PCR扩增AgB8/2基因cDNA,构建原核表达载体pET-AgB8/2并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件。纯化的AgB8/2融合蛋白经Western blot鉴... 旨在克隆细粒棘球蚴AgB8/2基因,优化原核表达体系,鉴定纯化蛋白并初步确定其诊断价值。采用RT-PCR扩增AgB8/2基因cDNA,构建原核表达载体pET-AgB8/2并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件。纯化的AgB8/2融合蛋白经Western blot鉴定正确后,采用斑点免疫金渗滤法初步验证其血清学诊断价值。结果显示,克隆的AgB8/2基因包含了273bp的完整ORF,序列分析表明与其它已报道的AgB8/2cDNA序列的同源性在99%-100%之间。优化的表达条件为,当菌液OD600值为0.6时,加入终浓度为0.05mmol/L的IPTG,37℃,振荡培养5h。纯化的蛋白经Western blot鉴定为目的蛋白。克隆的AgB8/2基因高度保守,原核表达载体pET-AgB8/2构建正确并高效表达可溶性融合蛋白,可作为特异性抗原应用于斑点免疫金渗滤法检测血清抗体。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 agb8/2基因 基因克隆 原核表达 斑点免疫金渗滤法
下载PDF
藏羊源细粒棘球蚴抗原B8/2基因的克隆表达和免疫学鉴定 被引量:4
2
作者 朵红 李伟 +10 位作者 付永 彭毛 郭志宏 沈秀英 牛建章 尼玛 童延军 河生德 俄日姐 炊文婷 胡保平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期23-26,共4页
目的克隆、表达青海省藏羊源细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)抗原B8/2(Eg Ag B8/2)基因,并进行免疫学鉴定。方法用RT-PCR扩增Eg Ag B8/2基因c DNA,构建原核表达载体pET-Eg Ag B8/2,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,十... 目的克隆、表达青海省藏羊源细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)抗原B8/2(Eg Ag B8/2)基因,并进行免疫学鉴定。方法用RT-PCR扩增Eg Ag B8/2基因c DNA,构建原核表达载体pET-Eg Ag B8/2,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)对诱导表达后的蛋白进行鉴定。结果克隆的Eg Ag B8/2基因长335 bp,序列分析表明与已报道的Eg Ag B8/2 c DNA序列的同源性为98%~100%,原核表达载体pET-Eg Ag B8/2构建正确。诱导表达后,通过SDS-PAGE检测,上清中有大量目的蛋白表达。纯化的蛋白经Western blotting鉴定为目的蛋白。结论成功克隆了青海省藏羊源Eg Ag B8/2基因,构建了原核表达载体,诱导表达后的蛋白为目的蛋白。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 抗原B8/2基因 克隆表达 免疫学鉴定
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部