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Components of the mitogen-activated protein kinase cascade are activated in hepatic cells by Echinococcus multilocularis metacestode 被引量:16
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作者 Ren-Yong Lin Jun-Hua Wang +5 位作者 Xiao-Mei Lu Xiao-Tao Zhou Georges Mantion Hao Wen Dominique A Vuitton Lysiane Richert 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第17期2116-2124,共9页
AIM: To explore the effect of Echinococcusmultilocularis on the activation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways and on livercell proliferation.METHODS: Changes in the phosphorylation of MA... AIM: To explore the effect of Echinococcusmultilocularis on the activation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways and on livercell proliferation.METHODS: Changes in the phosphorylation of MAPKs and proliferating cell nuclear antigen (PCNA)expression were measured in the liver of patients withalveolar echinococcosis (AE). MAPKs, MEK1/2 [MAPK/extracellular signal-regulated protein kinase (ERK)kinase] and ribosomal S6 kinase (RSK) phosphorylationwere detected in primary cultures of rat hepatocytesin contact in vitro with (1) E. multilocu/aris vesicle fluid(EmF), (2)E. multilocularis-conditioned medium (EmCM).RESULTS: In the liver of AE patients, ERK 1/2 andp38 MAPK were activated and PCNA expression wasincreased, especially in the vicinity of the metacestode.Upon exposure to EmF, p38, c-Jun N-terminal kinase(JNK) and ERK1/2 were also activated in hepatocytesin vitro, as well as MEK1/2 and RSK, in the absenceof any toxic effect. Upon exposure to EmCM, only JNKwas up-regulated.CONCLUSION: Previous studies have demonstratedan influence of the host on the MAPK cascade inE. multilocularis. Our data suggest that the reverse,i.e. parasite-derived signals efficiently acting onMAPK signaling pathways in host liver ceils, is actuallyoperating. 展开更多
关键词 echinococcus multilocularis Hepaticalveolar echinococcosis Mitogen-activated proteinkinase Host-parasite interactions LIVER
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肝泡型包虫病的诊治进展 被引量:9
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作者 王志鑫 刘云飞 +2 位作者 王灏 王海久 樊海宁 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期171-177,共7页
肝包虫病为慢性寄生虫病,由多房棘球蚴的幼虫引发,此病具有相当高的致残率和死亡风险,又被称作“虫癌”。临床上将肝包虫病分为肝泡型包虫病和肝囊型包虫病,肝包虫病在世界各地广泛流行,我国主要在西部农牧区居民群体中发生,对该地区居... 肝包虫病为慢性寄生虫病,由多房棘球蚴的幼虫引发,此病具有相当高的致残率和死亡风险,又被称作“虫癌”。临床上将肝包虫病分为肝泡型包虫病和肝囊型包虫病,肝包虫病在世界各地广泛流行,我国主要在西部农牧区居民群体中发生,对该地区居民的生存质量构成了巨大的威胁。目前临床上治疗肝包虫病以手术治疗方式为主,伴随着外科诊治技术的迅速发展和对肝包虫病研究不断深入,其诊治方案也不断完善。本文将主要综述肝泡型包虫病的诊断和治疗进展,旨在为临床医务人员提供参考,以尽早发现和治疗,降低疾病对患者产生的不良影响,改善患者预后。 展开更多
关键词 肝泡型包虫病 多房棘球蚴 剪切波弹性成像 ^(18)F-氟代脱氧葡萄糖 正电子发射计算机体层显像仪(PET-CT) 肝切除术 肝移植 阿苯达唑
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LAG3分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响
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作者 郑旭然 邓冰清 +9 位作者 康雪娇 李寅时 阿比旦·艾尼瓦尔 余倩 孜比姑·肉素 阿迪莱·多力坤 王茂林 王慧 张传山 李静 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期529-536,共8页
目的 探究淋巴细胞活化基因-3(Lymphocyte activation gene-3,LAG3)分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响。方法 将野生型(C57-wild-type, WT)和LAG3基因敲除(LAG3-knockout, LAG3-KO)小鼠经肝门静脉注射泡球蚴原头节,... 目的 探究淋巴细胞活化基因-3(Lymphocyte activation gene-3,LAG3)分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响。方法 将野生型(C57-wild-type, WT)和LAG3基因敲除(LAG3-knockout, LAG3-KO)小鼠经肝门静脉注射泡球蚴原头节,感染12周免疫组织化学染色观察小鼠肝脏CD19和α-SMA表达及定位,流式细胞术检测小鼠肝脏B细胞及其各亚群和表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子的表达情况。结果 泡球蚴感染12周小鼠肝脏LAG3-KO组CD19阳性区及面积占比略高于WT组,但差异均无统计学意义。α-SMA在LAG3-KO组阳性区及面积占比显著高于WT组(t=-3.224、-3.227,P均<0.05)。LAG3-KO组肝脏B细胞表达CD80和MHC-Ⅱ分子的比例显著上调,差异具有统计学意义(t=-2.379、-3.321,P均<0.05)。LAG3-KO组B2细胞占比显著高于WT组,差异有统计学意义(t=-2.695,P<0.05)。LAG3-KO组B1b细胞表达CD80比例亦显著上调,差异具有统计学意义(t=-5.315,P<0.001),而B2细胞表达CD80比例显著低于WT组,且差异具统计学意义(t=2.806,P<0.05)。LAG3-KO组B2细胞表达MHC-Ⅱ分子显著上调,且具统计学差异(t=-4.227,P<0.01)。结论 泡球蚴感染中期12周,LAG3分子影响小鼠肝脏B细胞亚群及功能,并以B2型淋巴细胞尤为显著,LAG3对B细胞的活化以及MHC-Ⅱ类分子表达产生抑制作用,提示其可能参与泡球蚴感染下的B细胞耗竭。 展开更多
关键词 泡球蚴 淋巴细胞活化基因-3 B细胞 B细胞亚群
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多房棘球蚴囊泡来源EVs及其emu-miR-10-5p促进小鼠肝星状细胞活化
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作者 王宇琦 达哇卓玛 +1 位作者 刘川川 樊海宁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期454-463,482,共11页
目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透... 目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透射电镜观察培养囊泡组织中胞外囊泡结构。差速-超速离心法分离囊泡培养上清中EVs,透射电镜、纳米粒径以及Western blot对分离EVs进行鉴定。CCK-8检测不同浓度EVs作用后HSCs活力。EVs作用于HSCs后RT-qPCR和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。生物信息学分析确定emu-miR-10-5p为特异性miRNA。过表达emu-miR-10-5p后EdU检测HSCs增殖,RT-qPCR个Western blot检测细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。干扰囊泡组织中emu-miR-10-5p后提取培养上清液中EVs作用于HSCs后,检测HSCs细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。结果成功通过小鼠体内病灶材料培养出多房棘球蚴囊泡,经PCR扩增特异性基因证实为多房棘球绦虫来源。TEM观察培养囊泡表面有较多的囊状结构。通过差速-超速离心分离出多房棘球蚴囊泡来源EVs,并经TEM证实为球形、膜状结构。囊泡来源EVs能被HSCs内化,并促进HSCs增殖和活化。通过综合分析多房棘球绦虫感染小鼠血清、棘球蚴组织、棘球蚴囊泡来源EVs、生发层细胞、原头节miRNA测序结果,发现emu-miR-10-5p在上述成分中均存在表达,并通过RT-qPCR证实emu-miR-10-5p在多房棘球蚴囊泡来源EVs中存在的量较高。进一步研究证实过表达emu-miR-10-5p能促进HSCs增殖,增加HSCs中α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。而干扰囊泡中emu-miR-10-5p后从培养上清液中提取的EVs未增加α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。结论多房棘球蚴囊泡来源EVs及emu-miR-10-5p能够促进HSCs活化。 展开更多
关键词 多房棘球蚴病 胞外囊泡 肝星状细胞 emu-miR-10-5p
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七种蛋白酶抑制剂对多房棘球蚴DNA损伤诱导样1蛋白活性的影响
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作者 张生英 刘仲藜 +1 位作者 郭爱疆 王帅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2273-2280,共8页
目前,多房棘球蚴病(alveolar echinococcosis, AE)尚无有效药物治疗手段,迫切需要开发新型治疗药物。前期研究表明,HIV蛋白酶抑制剂(HIV protease inhibitors, HIV PIs)具有潜在抗寄生虫功能。本文旨在研究HIV PIs对Echinococcus multil... 目前,多房棘球蚴病(alveolar echinococcosis, AE)尚无有效药物治疗手段,迫切需要开发新型治疗药物。前期研究表明,HIV蛋白酶抑制剂(HIV protease inhibitors, HIV PIs)具有潜在抗寄生虫功能。本文旨在研究HIV PIs对Echinococcus multilocularis(Emu)DNA损伤诱导样1蛋白(DNA damage inducible 1 protein, Ddi1)活性的影响。本研究通过构建真核表达重组载体pFastBac1-Emu Ddi1,在昆虫细胞系Sf9细胞中表达筛选出P1代和P2代,纯化出可溶性Ddi1重组蛋白,然后与目的蛋白的荧光底物检测纯化蛋白的活性,进一步检测沙奎那韦(saquinavir, SQV)、利托那韦(ritonavir, RTV)、安普那韦(amprenavir, APV)、阿扎那韦(atazanavir, ATV)、洛匹那韦(lopinavir, LPV)、福沙那韦(fosamprenavir, Fos)、达芦那韦(darunavir, DRV)等7种HIV PIs对Emu Ddi1重组蛋白活性的抑制能力。结果显示:细胞系内真核表达产物的酶活Km为1.422μmol·L^(-1),具有良好的亲和力和活性,最终筛到沙奎那韦对Ddi1蛋白二聚体活性位点的抑制率达67%,其IC_(50)为34,说明沙奎那韦对Emu Ddi1重组蛋白酶活性具有良好的抑制效果。以上结果提示:沙奎那韦抑制重组蛋白Ddi1的活性,可能成为Ddi1的靶向药物,以期为替代药物或开发联合用药提供基础。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂 多房棘球蚴 DNA损伤诱导样蛋白 酶活性 抑制率
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LAG3对多房棘球蚴感染小鼠模型CD8^(+)T细胞免疫功能调节作用的研究
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作者 阿比旦·艾尼瓦尔 孜比姑·肉素 +4 位作者 阿迪莱·多力坤 邓冰清 李静 王慧 张传山 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第5期660-667,674,共9页
目的研究淋巴细胞激活基因3(Lymphocyte activation gene 3,LAG3)对多房棘球蚴慢性感染小鼠CD8^(+)T细胞免疫功能的调节作用。方法取C57BL/6野生型(Wild-type,WT)和LAG3缺陷型(Knock-out,KO)小鼠各10只,每只小鼠经肝门静脉接种3000个多... 目的研究淋巴细胞激活基因3(Lymphocyte activation gene 3,LAG3)对多房棘球蚴慢性感染小鼠CD8^(+)T细胞免疫功能的调节作用。方法取C57BL/6野生型(Wild-type,WT)和LAG3缺陷型(Knock-out,KO)小鼠各10只,每只小鼠经肝门静脉接种3000个多房棘球蚴原头节建立多房棘球蚴感染模型。感染12周后,分别取两组小鼠肝脏和脾脏组织,采用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝脏病灶周围炎性细胞浸润和病理表现,通过免疫组织化学观察肝脏病灶周围“炎症微环境”与脾脏中CD8^(+)T的比例。收集两组小鼠肝脏与脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术筛选不同CD8^(+)T细胞亚群,检测CD8^(+)T细胞、效应记忆CD8^(+)T细胞(Effector memory CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tem)、中心记忆CD8^(+)T细胞(Central memory CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tcm)、初始CD8^(+)T细胞(Naive CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tn)比例与绝对数,以及分泌细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素17A(IL-17A)的比例。通过多房棘球蚴虫体蛋白体外刺激两组小鼠肝脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞分泌细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-17A的比例。结果HE染色结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏形成的炎性病灶数量增多,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏病灶周围CD8^(+)T细胞募集升高,差异有统计学意义(P<0.05);LAG3缺陷型小鼠脾脏CD8^(+)T细胞募集有降低的趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏效应记忆型CD8^(+)T细胞比例有升高的趋势,差异无统计学意义(P>0.05);脾脏CD8^(+)T细胞比例降低,脾脏CD8^(+)Tem表型比例升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。LAG3缺陷型小鼠肝脏和脾脏CD8^(+)T细胞分泌TNF-α和IL-10能力均增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。多房棘球蚴的虫体蛋白体外刺激肝脏淋巴细胞实验结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠CD8^(+)T细胞分泌IFN-γ、IL-10比例升高,差异均有统计学意义(P<0.05);LAG3缺陷型小鼠CD8^(+)T细胞分泌IL-17A的能力有升高趋势(P>0.05)。结论在小鼠多房棘球蚴慢性感染中,LAG3可抑制肝脏和脾脏CD8^(+)T细胞免疫应答能力,调节炎症反应。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 多房棘球蚴病 淋巴细胞激活基因3 CD8^(+)T细胞
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具有M细胞靶向性的多房棘球蚴表位疫苗GILE口服乳酸菌载体的构建
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作者 肖杨 王顺娟 +7 位作者 戴瑶 闫鑫宗 崔家咏 李俊秀 陈嘉瑀 祁悦林 李润乐 汤锋 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2024年第4期228-234,共7页
目的构建具有M细胞靶向性的多房棘球蚴表位疫苗GILE口服乳酸菌载体。方法本研究在前期构建的多表位疫苗GILE的基础上,通过添加SAM基因序列,设计、合成SAM-GILE序列,构建乳酸菌表达质粒pNZ8148-SAM-GILE,并电转至乳酸乳球菌NZ9000中建立... 目的构建具有M细胞靶向性的多房棘球蚴表位疫苗GILE口服乳酸菌载体。方法本研究在前期构建的多表位疫苗GILE的基础上,通过添加SAM基因序列,设计、合成SAM-GILE序列,构建乳酸菌表达质粒pNZ8148-SAM-GILE,并电转至乳酸乳球菌NZ9000中建立乳酸菌表达体系。用酶切与基因测序双重实验验证乳酸菌表达质粒pNZ8148-SAM-GILE是否构建成功,用PCR验证乳酸菌表达质粒pNZ8148-SAM-GILE是否成功电转至乳酸乳球菌NZ9000,用Western Blot实验检测重组蛋白SAM-GILE是否表达,用全细胞ELISA法检测SAM-GILE的表面展示情况,用免疫荧光染色法鉴定LL-plSAM-GILE的M细胞靶向性。结果酶切与基因测序双重实验结果显示,乳酸菌表达质粒pNZ8148-SAM-GILE构建成功。经PCR验证,pNZ8148-SAM-GILE成功电转至乳酸乳球菌NZ9000。经Western Blot验证,通过Nisin诱导,成功表达约45 KD的重组蛋白。经全细胞ELISA检测,SAM-GILE可展示于LL-plSAM-GILE表面。经免疫荧光染色验证,重组抗原与M细胞高度重合,表明重组乳酸菌疫苗LL-plSAM-GILE具有M细胞靶向性。结论成功构建具有M细胞靶向性的多房棘球蚴表位疫苗GILE口服乳酸菌载体。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 乳酸菌 疫苗 口服 M细胞
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敲低多房棘球蚴let-7-5p可抑制BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长
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作者 王立群 吴易璇 +8 位作者 蒲桂婷 曹珊菱 王得先 刘婷丽 李红 AMUDA Tharheer Oluwashola 郭小腊 殷宏 骆学农 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2619-2628,共10页
旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-le... 旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-let-7-5p、AAV8-control和PBS后两周,每组随机选取2只小鼠分别用Western blot和qRT-PCR分析肝组织中GFP、let-7-5p及其靶基因C/EBP δ的表达。随后,所有小鼠每只腹腔接种1 000个原头蚴,3个月后qRT-PCR检测腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p、C/EBP δ、M1型(IL-1β、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、IL-4和IL-10)相关分子的转录水平,并统计各组小鼠多房棘球蚴的包囊重量和原头蚴数量。结果表明,注射后第15天,AAV8-si-let-7-5p成功靶向小鼠肝脏,并引起emu-let-7-5p的敲低和C/EBP δ的上调表达。感染后3个月,AAV8-si-let-7-5p组小鼠腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p和M2型相关分子Arg-1均显著下调,而C/EBP δ和M1型相关分子IL-1β和iNOS均显著上调。此外,AAV8-si-let-7-5p组IL-4和IL-6下调表达,而IL-10上调表达,且小鼠肝脏包囊重量和原头蚴数量显著低于对照组。敲低多房棘球蚴感染小鼠体内emu-let-7-5p,可促进C/EBP δ的表达,进而抑制M2型极化和虫体生长。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 emu-let-7-5p 腹腔巨噬细胞极化 虫体生长
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甘肃省发现2例猪泡型棘球蚴病病例
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作者 李永光 张晓菊 +2 位作者 赵丽荣 万思懿 王明涛 《中国动物检疫》 CAS 2024年第5期25-28,共4页
泡型棘球病(echinococcosis multilocularis)由多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis)寄生于野生啮齿类等动物的肝脏引起,绵羊、牦牛、猪等家畜感染病例较为少见,人可被感染。2023年屠宰检疫时,在甘肃省临洮县一散养户圈养的28头猪中... 泡型棘球病(echinococcosis multilocularis)由多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis)寄生于野生啮齿类等动物的肝脏引起,绵羊、牦牛、猪等家畜感染病例较为少见,人可被感染。2023年屠宰检疫时,在甘肃省临洮县一散养户圈养的28头猪中,发现2例猪泡型棘球蚴病病例。患猪生前体重明显小于其他同龄猪;虫体寄生于患猪腰椎两侧腹壁,临床表现多个囊泡;囊液前期为淡黄色,后期为黑红色。怀疑患猪因食入犬排出的多房棘球绦虫虫卵而感染。本病例的发现及确诊对甘肃省猪泡型棘球蚴病的防控具有预警和指导作用。 展开更多
关键词 泡型棘球蚴病 多房棘球蚴 病理诊断
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Characteristics of the imaging diagnosis of alveolar echinococcosis
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作者 Sonay Aydin Baris Irgul +2 位作者 Kemal Bugra Memis Volkan Kızılgoz Mecit Kantarci 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE 2024年第9期2748-2754,共7页
Alveolar echinococcosis(AE)primarily manifests in the liver and exhibits charac-teristics resembling those of slow-growing malignant tumours.Untreated Echino-coccus multilocularis infection can be lethal.By infiltrati... Alveolar echinococcosis(AE)primarily manifests in the liver and exhibits charac-teristics resembling those of slow-growing malignant tumours.Untreated Echino-coccus multilocularis infection can be lethal.By infiltrating the vascular systems,biliary tracts,and the hilum of the liver,it might lead to various problems.Due to its ability to infiltrate neighbouring tissues or metastasize to distant organs,AE can often be mistaken for malignancies.We present a concise overview of the epi-demiological and pathophysiological characteristics of AE,as well as the clinical manifestations of the disease.This article primarily examines the imaging charac-teristics of AE using various imaging techniques such as ultrasonography,com-puted tomography(CT),magnetic resonance imaging,diffusion-weighted ima-ging,and virtual non-enhanced dual-energy CT.We additionally examined the contribution of radiography in the diagnosis,treatment,and monitoring of the condition. 展开更多
关键词 Alveolar echinococcosis echinococcus multilocularis Virtual non-enhanced dual-energy computed tomography Percutaneous cyst drainage Cyst infection Interven-tional radiology
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Long-term follow-up of liver alveolar echinococcosis using echinococcosis multilocularis ultrasound classification 被引量:7
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作者 Jasmin Schuhbaur Melissa Schweizer +3 位作者 Jana Philipp Julian Schmidberger Patrycja Schlingeloff Wolfgang Kratzer 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2021年第40期6939-6950,共12页
BACKGROUND When Echinococcus multilocularis infects humans as a false intermediate host,alveolar echinococcosis(AE)usually manifests primarily intrahepatically and is initially asymptomatic.If the disease remains undi... BACKGROUND When Echinococcus multilocularis infects humans as a false intermediate host,alveolar echinococcosis(AE)usually manifests primarily intrahepatically and is initially asymptomatic.If the disease remains undiagnosed and untreated,progressive growth occurs,reminiscent of malignant tumours.The only curative therapy is complete resection,which is limited to localised stages,and palliative drug therapy is used otherwise.Consequently,early diagnosis and reliable detection of AE lesions are important.For this reason,abdominal ultrasonography,as the most common primary imaging for AE,relies on classification systems.AIM To investigate how hepatic AE lesion sonomorphology changes over time in the Echinococcosis Multilocularis Ulm Classification(EMUC)-ultrasound(US)classification.METHODS Based on data from Germany’s national echinococcosis database,we evaluated clinical and US imaging data for 59 patients according to the AE case definition in our preliminary retrospective longitudinal study.There had to be at least two liver sonographies≥6 mo apart,≥1 hepatic AE lesion,and complete documentation in all US examinations.The minimum interval between two separately evaluated US examinations was 4 wk.The AE reference lesion was the largest hepatic AE lesion at the time of the first US examination.To classify the sonomorphologic pattern,we used EMUC-US.In addition to classifying the findings of the original US examiner,all reference lesions at each examination time point were assigned EMUC-US patterns in a blinded fashion by two investigators experienced in US diagnosis.Statistical analysis was performed using SAS version 9.4(SAS Institute Inc.,Cary,NC,United Stated).P values<0.05 were considered statistically significant.RESULTS The preliminary study included 59 patients,38(64.5%)women and 21(35.6%)men.The mean age at initial diagnosis was 59.9±16.9 years.At the time of initial ultrasonography,a hailstorm pattern was present in 42.4%(25/59)of cases,a hemangioma-like pattern in 16.9%(10/59),a pseudocystic pattern in 15.3%(9/59),and a metastasis-like pattern in 25.4%(15/59).For the hailstorm pattern,the average lesion size was 67.4±26.3 mm.The average lesion size was 113.7±40.8 mm with the pseudocystic pattern and 83.5±27.3 mm with the hemangioma-like pattern.An average lesion size of 21.7±11.0 mm was determined for the metastasis-like pattern.Although the sonomorphologic pattern remained unchanged in 84.7%(50/59)of AE reference lesions,15.3%(9/59)showed a change over time.A change in pattern was seen exclusively for AE lesions initially classified as hemangioma-like or pseudocystic.A total of 70%(7/10)of AE lesions initially classified as hemangioma-like showed a relevant change in pattern over time,and 85.7%(6/7)of these were secondarily classified as having a hailstorm pattern,with the remainder(1/7;14.3%)classified as having a pseudocystic pattern.A total of 22.2%(2/9)of AE lesions initially classified as pseudocystic showed a relevant change in pattern over time and were classified as having a hailstorm pattern.For AE lesions initially classified as having a hailstorm or metastatic pattern,no pattern change was evident.All patients with pattern change were on continuous drug therapy with albendazole.CONCLUSION The sonomorphology of hepatic AE lesions may change over time.The hemangioma-like and pseudocystic patterns are affected. 展开更多
关键词 Alveolar echinococcosis echinococcus multilocularis ULTRASONOGRAPHY Sonomorphology Pattern change
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多房棘球蚴原头节感染后阻断PD-1对巨噬细胞吞噬功能的影响
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作者 张涛 张耀刚 +2 位作者 杨紫晗 沈银红 马艳艳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1095-1099,共5页
目的研究多房棘球蚴原头节感染后巨噬细胞吞噬功能的变化。方法免疫组化分析巨噬细胞在泡型包虫病患者肝脏中的分布;阻断PD-1、多房棘球蚴原头节与巨噬细胞共培养分析巨噬细胞的吞噬功能和CD47、PD-1的表达水平。结果CD68标记巨噬细胞... 目的研究多房棘球蚴原头节感染后巨噬细胞吞噬功能的变化。方法免疫组化分析巨噬细胞在泡型包虫病患者肝脏中的分布;阻断PD-1、多房棘球蚴原头节与巨噬细胞共培养分析巨噬细胞的吞噬功能和CD47、PD-1的表达水平。结果CD68标记巨噬细胞发现巨噬细胞在泡型包虫病患者病灶近旁肝脏组织聚集;多房棘球蚴原头节感染后与对照组相比,大肠杆菌的荧光强度降低(P<0.001),CD47和PD-1的表达增加;多房棘球蚴原头节感染给予信迪利单抗阻断PD-1与单独多房棘球蚴感染组相比,大肠杆菌的荧光强度增加(q=40.63,P<0.001)。结论阻断PD-1可恢复多房棘球蚴原头节感染巨噬细胞的吞噬功能。 展开更多
关键词 多房棘球蚴原头节 程序性死亡分子1 巨噬细胞 吞噬功能
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多房棘球蚴感染对小鼠肝脂质代谢的影响 被引量:1
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作者 李红 李艳萍 +4 位作者 刘婷丽 陈国梁 王立群 郭小腊 骆学农 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期263-271,共9页
旨在探讨多房棘球蚴感染早期对小鼠肝脂质代谢的影响。选取60只清洁级BALB/c小鼠(6周龄,雄性)随机分为试验组和对照组,每组30只。试验组小鼠每只腹腔接种600个原头蚴,对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS缓冲液。采用原位两步循环灌流及多步... 旨在探讨多房棘球蚴感染早期对小鼠肝脂质代谢的影响。选取60只清洁级BALB/c小鼠(6周龄,雄性)随机分为试验组和对照组,每组30只。试验组小鼠每只腹腔接种600个原头蚴,对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS缓冲液。采用原位两步循环灌流及多步低速差速离心分离纯化肝实质细胞。利用高通量测序分析感染3月小鼠肝实质细胞差异表达的mRNA,并对其进行KEGG、GO分析和qRT-PCR验证。制备多房棘球蚴感染2、3和6月小鼠的肝组织切片,分别进行油红O染色,并通过qRT-PCR检测多房棘球蚴感染不同感染时期肝实质细胞脂质代谢相关基因的表达水平。结果表明,与未感染对照组相比,小鼠感染多房棘球蚴后3、6月肝脂肪沉积明显增多;感染2月的肝实质细胞脂质合成相关基因Scd1、Fasn和Srebf1,以及脂质氧化分解相关基因Acox1和Cpt1α均明显上调;感染3月的肝实质细胞Scd1、Fasn、Srebf1及Cd36的表达水平均明显升高,而Acox1、Cpt1α、Pparγ和Pparα的表达水平明显降低。上述结果表明,多房棘球蚴感染早期可能通过促进肝实质细胞的脂质合成,抑制脂质氧化分解,从而导致肝脂质沉积。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 肝实质细胞 脂质代谢 脂质沉积
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多房棘球绦虫基因组DNA三种提取方法的比较
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作者 王明坤 孜比姑·肉素 +4 位作者 李德伟 余倩 李静 张传山 王慧 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第7期875-880,886,共7页
目的综合比较95℃水浴法、碱裂解法及离心柱法提取多房棘球绦虫虫体基因组DNA的质量差异,筛选出适用于PCR鉴定多房棘球绦虫线粒体DNA分型的DNA提取方法。方法无菌条件下取适量多房棘球绦虫原头节(Protoscoleces,PSCs)、囊壁组织样本为... 目的综合比较95℃水浴法、碱裂解法及离心柱法提取多房棘球绦虫虫体基因组DNA的质量差异,筛选出适用于PCR鉴定多房棘球绦虫线粒体DNA分型的DNA提取方法。方法无菌条件下取适量多房棘球绦虫原头节(Protoscoleces,PSCs)、囊壁组织样本为实验材料,分别采用95℃水浴法、碱裂解法及离心柱法提取虫体样本中的基因组DNA,检测其浓度与A260/A280比值,并以提取的DNA为模板,通过PCR扩增多房棘球绦虫核基因延伸蛋白样蛋白(Ezrin/radixin/moesin-like protein,elp)和线粒体基因细胞色素b(Cytochrome b,cob)、NADH脱氢酶亚基2(NADH dehydrogenase subunit 2,nad2)和细胞色素c氧化酶亚基I(Cytochrome c oxidase subunit 1,cox1)的片段,综合比较3种方法提取的基因组DNA扩增效果。结果3种方法均可从PSCs中提取出基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳和核酸定量结果显示离心柱法提取的基因组DNA A260/A280比值最高,差异具有统计学意义(P<0.01),且在加样模板总量一致的情况下,以离心柱法提取的PSCs DNA为模板扩增的cob、nad2和cox1基因产物电泳条带清晰、明亮,片段长度准确;而使用95℃水浴法和碱裂解法提取的PSCs基因组DNA仅有效扩增出cob基因条带。通过离心柱法提取的囊壁组织DNA为模板仅扩增出elp基因片段,小鼠组织基因组DNA未扩增出任何虫体的目的基因片段。结论使用离心柱法从多房棘球绦虫PSCs中提取的基因组DNA质量最佳,能够有效扩增出虫体线粒体基因片段,且无宿主来源细胞的污染,可满足后续实验室对多房棘球绦虫不同虫株的基因型鉴定研究。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 原头节 囊壁 基因组DNA 提取
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多房棘球蚴囊液对沉默DDIT4后小鼠肝细胞生物学功能的影响
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作者 尹凤娇 徐凯 +8 位作者 陈佳昕 仁增卓嘎 乜茹 冶赓搏 庞明泉 樊海宁 曹得萍 王海久 王志鑫 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2023年第3期195-202,共8页
目的探讨多房棘球蚴囊液(Hydatid cyst fluid,HCF)对沉默DNA损伤诱导转录因子4(DNA damage-inducible transcript 4,DDIT4)后小鼠肝细胞生物学功能的影响。方法1.采用免疫蛋白印迹法(Western Blot)、实时荧光定量法(RT-qPCR)检测经HCF... 目的探讨多房棘球蚴囊液(Hydatid cyst fluid,HCF)对沉默DNA损伤诱导转录因子4(DNA damage-inducible transcript 4,DDIT4)后小鼠肝细胞生物学功能的影响。方法1.采用免疫蛋白印迹法(Western Blot)、实时荧光定量法(RT-qPCR)检测经HCF处理的小鼠肝细胞中DDIT4蛋白的表达量,以检测转染效率;2.选用慢病毒转染小鼠正常肝细胞DDIT4后做HCF处理,采用细胞计数试剂8法(CCK-8)检测各组小鼠肝细胞的细胞活性;3.用Western Blot法检测Beclin-1、Caspase-3、LC3等凋亡自噬相关蛋白水平;4.用透射电镜观察HCF对小鼠肝细胞超微结构的影响。结果1.经HCF作用后慢病毒转染小鼠肝细胞的DDIT4基因及蛋白表达水平检测结果显示,LV-Ddit4-RNAi 1、LV-Ddit4-RNAi 2、LV-Ddit4-RNAi 3组分别与LV-Ddit4-NC组比较,前三组DDIT4蛋白含量显著下降,LV-Ddit4-RNAi 3组尤为显著(P<0.01)。2.LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL组细胞OD值明显大于LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL组(P<0.01);与HCF共培养48 h后,沉默DDIT4组细胞形态接近正常AML-12细胞的形态,多呈椭圆形或者圆形,且细胞生长密度较LV-Ddit4-NC组明显为高。3.与LV-Ddit4-NC con组比较,LV-Ddit4-NC 0.4 mg/mL HCF组和LV-Ddit4-NC 0.8 mg/mL HCF组的LC3-II、Beclin-1、Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P<0.01);分别与LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL HCF组比较,LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL HCF组的LC3-II、Beclin-1、Caspase-3蛋白表达水平显著降低,均具有统计学意义。4.两对照组细胞胞质未见明显损伤,线粒体基质较均匀,粗面内质网未见明显扩张,自噬水平低;LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL组细胞损伤较轻,未见粗面内质网扩张,胞质内存在较多脂滴,自噬数量增多;LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL组细胞损伤严重,粗面内质网严重扩张,胞质内存在大量脂滴,可见大量自噬结构。结论HCF对沉默DDIT4后小鼠肝细胞生物学功能的影响:1.AML-12细胞增殖;2.AML-12细胞凋亡、自噬数量减少。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 囊液 沉默DNA损伤诱导转录因子4 细胞 凋亡 自噬
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控制性低中心静脉压技术用于肝包虫病手术的研究进展
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作者 贾钰婕 袁红 吕志坚 《中外医学研究》 2023年第32期181-184,共4页
肝包虫病又称为肝棘球蚴病,这是一种主要由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的幼虫累及于肝脏所引起的人兽共患性寄生虫疾病。青海省位于我国青藏高原东北部,是我国肝包虫病流行的严重区域,患者的生活因为该病而受到严重影响。随着医学的不... 肝包虫病又称为肝棘球蚴病,这是一种主要由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的幼虫累及于肝脏所引起的人兽共患性寄生虫疾病。青海省位于我国青藏高原东北部,是我国肝包虫病流行的严重区域,患者的生活因为该病而受到严重影响。随着医学的不断进步,近年来外科手术已经成为治疗肝包虫病的主要手段。由于肝脏血供十分丰富,为了更加有效提高肝包虫病手术的安全性,临床通过控制性低中心静脉压(CLCVP)技术以减少手术创面的出血量。但也有一些研究指出CLCVP技术在肝脏手术中存在一定滞后性。因此,探讨是否通过CLCVP技术以辅助外科手术从而有效控制肝包虫病的流行具有一定的现实意义。 展开更多
关键词 肝包虫病 细粒棘球绦虫 多房棘球绦虫 控制性低中心静脉压 出血量
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Infection of sheep by Echinococcus multilocularis in Gansu,China:evidence from mitochondrial and nuclear DNA analysis
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作者 Nigus Abebe Shumuye Li Li +16 位作者 Wen-Hui Li Nian-Zhang Zhang Yan-Tao Wu Yao-Dong Wu Wen-Jun Tian Lin-Sheng Zhang Xiao-Feng Nian Guo-Dong Dai Wei-Gang Chen Sheng-Zhi Gao Xue-Qi Tian Jun-Shi Liu Bin Li Nigatu Kebede Bao-Quan Fu Hong-Bin Yan Wan-Zhong Jia 《Infectious Diseases of Poverty》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期107-107,共1页
BackgroundIn the normal life cycle of the parasite(Echinococcus multilocularis)that causes alveolar echinococcosis,domestic and wild carnivores act as definitive hosts,and rodents act as intermediate hosts.The present... BackgroundIn the normal life cycle of the parasite(Echinococcus multilocularis)that causes alveolar echinococcosis,domestic and wild carnivores act as definitive hosts,and rodents act as intermediate hosts.The presented study contributes to the research on the distribution and transmission pattern of E.multilocularis in China having identified sheep as an unusual intermediate host taking part in the domestic transmission of alveolar echinococcosis in Gansu Province,China.MethodsFrom 2020 to 2021,nine whitish different cyst-like were collected from the liver of sheep in Gansu Province for examination.A near complete mitochondrial(mt)genome and selected nuclear genes were amplified from the cyst-like lesion for identification.To confirm the status of the specimen,comparative analysis with reference sequences,phylogenetic analysis,and network analysis were performed.ResultsThe isolates displayed≥98.87%similarity to E.multilocularis NADH dehydrogenase sub-unit 1(nad1)(894 bp)reference sequences deposited in GenBank.Furthermore,amplification of the nad4 and nad2 genes also confirmed all nine samples as E.multilocularis with>99.30%similarity.Additionally,three nuclear genes,pepck(1545 bp),elp-exons VII and VIII(566 bp),and elp-exon IX(256 bp),were successfully amplified and sequenced for one of the isolates with 98.42%similarity,confirming the isolates were correctly identified as E.multilocularis.Network analysis also correctly placed the isolates with other E.multilocularis.ConclusionsAs a result of the discovery of E.multilocularis in an unusual intermediate host,which is considered to have the highest zoonotic potential,the result clearly demonstrated the necessity for expanded surveillance in the area. 展开更多
关键词 echinococcus multilocularis China SHEEP Liver PHYLOGENY
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多房棘球蚴单克隆抗体的免疫特性分析
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作者 段兰利 赵莉 +10 位作者 王冰洁 班万里 徐宁 陈云英 郭璐 余婉蓉 阿热艾·阿哈太 徐晶 穆尼拉·特列吾汗 喻昌盛 张壮志 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期67-72,共6页
用免疫学方法对2株抗多房棘球蚴单克隆细胞株进行免疫特性分析。研究制备抗多房棘球蚴单克隆抗体1G11、1C1,亲和层析纯化并检测纯度,采用ELISA、Western blot和免疫组化法分别检测所获抗体的抗体效价、特异性以及抗体在免疫组织化学定... 用免疫学方法对2株抗多房棘球蚴单克隆细胞株进行免疫特性分析。研究制备抗多房棘球蚴单克隆抗体1G11、1C1,亲和层析纯化并检测纯度,采用ELISA、Western blot和免疫组化法分别检测所获抗体的抗体效价、特异性以及抗体在免疫组织化学定位。结果显示,经亲和层析纯化获得的单克隆抗体1G11、1C1在分子质量约55 ku及24 ku可见清晰的重、轻链条带;ELISA与Western blot结果显示,单克隆抗体1G11、1C1与多房棘球蚴能特异性结合,与细粒棘球蚴抗原、细颈囊尾蚴抗原、多头蚴抗原不反应且无交叉反应;经免疫组化鉴定2株抗多房棘球蚴单克隆抗体均能与多房棘球蚴特异性结合。结果表明,抗多房棘球蚴单克隆抗体具有良好的免疫特性,为后期包虫病诊断试剂的研发提供了物质基础。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 单克隆抗体 免疫特性 免疫组化
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自然杀伤细胞及CD8^(+)T细胞缺失对泡球蚴感染小鼠肝功能的影响
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作者 阿依努尔·艾尔肯 罗黎 +3 位作者 阿卜杜艾尼·啊卜力孜 阿卜杜海外尔·阿卜杜合力力 塔来提·吐尔干 吐尔干艾力·阿吉 《中国医药导报》 CAS 2023年第22期8-12,17,共6页
目的观察自然杀伤(NK)细胞、CD8^(+)T细胞的缺失对泡球蚴感染小鼠肝功能的影响。方法选取6~8周龄,体重为18~20 g的SPF级雌性C57BL/6小鼠共30只,按随机数字表法将其分为对照组、泡球蚴感染组、NK细胞清除组、NK细胞清除对照组、CD8^(+)T... 目的观察自然杀伤(NK)细胞、CD8^(+)T细胞的缺失对泡球蚴感染小鼠肝功能的影响。方法选取6~8周龄,体重为18~20 g的SPF级雌性C57BL/6小鼠共30只,按随机数字表法将其分为对照组、泡球蚴感染组、NK细胞清除组、NK细胞清除对照组、CD8^(+)T细胞清除组、CD8^(+)T细胞清除对照组,每组5只。泡球蚴感染组、NK细胞清除组、NK细胞清除对照组、CD8^(+)T细胞清除组、CD8^(+)T细胞清除对照组均经门静脉注射多房棘球绦虫头节(10个头节/μl,200μl),对照组经门静脉注射等量生理盐水。实验第4周,NK细胞清除组腹腔注射NK细胞清除抗体,100μg/次,1次/周,同时NK细胞清除对照组腹腔注射等量IgG2a同型对照抗体;CD8^(+)T细胞清除组腹腔注射CD8^(+)T细胞清除抗体200μg/次,1次/周,同时CD8^(+)T细胞清除对照组腹腔注射等量IgG2b同型对照抗体。实验第12周采集六组外周血分离血浆并检测小鼠肝肾功能指标总蛋白(TP)、碱性磷酸酶、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、血清白蛋白(ALB)、乳酸脱氢酶、尿酸、尿素、肌酐。结果泡球蚴感染组外周血GPT、GOT高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NK细胞清除组外周血GPT、GOT高于NK细胞清除对照组,TP、ALB低于NK细胞清除对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。CD8^(+)T细胞清除组外周血TP低于CD8^(+)T细胞清除对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泡球蚴感染会导致一定程度的肝功能损伤,尤其在NK细胞耗竭状态下肝功能损伤会进一步加重。 展开更多
关键词 泡球蚴感染 自然杀伤细胞 CD8^(+)T细胞 肝功能
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小鼠感染泡球蚴后细胞因子水平的变化 被引量:30
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作者 魏晓丽 丁剑冰 +2 位作者 许晏 温浩 林仁勇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期361-364,共4页
目的 观察人工接种泡球蚴 (EM)昆明小鼠体内 6种细胞因子水平的动态变化 ,研究泡球蚴病的免疫学机制。 方法 实验组和对照组小鼠分别腹腔接种泡球蚴及生理盐水 ,持续观察 2 60d ,收集各组血清用ELISA法检测血清中白细胞介素 2 (IL ... 目的 观察人工接种泡球蚴 (EM)昆明小鼠体内 6种细胞因子水平的动态变化 ,研究泡球蚴病的免疫学机制。 方法 实验组和对照组小鼠分别腹腔接种泡球蚴及生理盐水 ,持续观察 2 60d ,收集各组血清用ELISA法检测血清中白细胞介素 2 (IL 2 )、γ干扰素 (IFN γ)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、IL 4、IL 5、IL 10水平。 结果 实验组 6种细胞因子水平始终高于正常对照组 ,其中辅助性T细胞 1(Th1)类细胞因子IL 2水平在感染后 80d达到峰值 ,感染 14 0d后迅速降低 ;TNF α水平在感染后 40d较对照组明显上升 ,感染 10 0d左右达到峰值 ,14 0d后迅速下降 ;IFN γ在感染 80d后达到峰值 ,14 0d后缓慢下降 ;而在 80d以前 ,辅助性T细胞 2 (Th2 )类细胞因子IL 4、IL 5、IL 10维持在较低水平 ;10 0d后 ,这 3类细胞因子明显上升 ,其中IL 4、IL 10水平在 10 0d达到峰值 ,IL 5水平在 14 0d达到峰值 ,以后维持在较高水平。 结论 Th2细胞介导的体液免疫与Th1细胞介导的细胞免疫共同参与了宿主抗棘球蚴免疫。感染早期以Th1细胞介导的细胞免疫应答为主 ,感染中晚期转化为以Th2细胞介导的体液免疫为主。 展开更多
关键词 感染 细胞因子水平 对照组 IL-10 IL-5 IL-4 小鼠 人工接种 EM 果实
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