果蝇中Ecp蛋白的表达、纯化与抗体制备

获得特异性抗Ecp多克隆抗体 ,为进一步研究ecp的功能奠定基础。利用特异引物 ,通过RT PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA ,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX 4T 1(His) 6C中 ,转染大肠杆菌DH5α,经诱导表达后 ,利用谷胱甘肽琼脂糖珠从细胞裂解物中特异吸附融合蛋白 ,经凝血酶裂解 ,释放出Ecp蛋白 ,再经Ni NTA亲和层析 ,最终获得高纯度的Ecp蛋白。用纯化的Ecp蛋白免疫新西兰家兔 ,亲和层析纯化抗Ecp抗体。利用该抗体进行的WesternBlot结果表明 :Ecp蛋白在野生型黑腹果蝇胚胎、三龄幼虫神经系统、成虫、成虫头部组织中均有明显表达 。

支气管哮喘患儿血清ECP及IgE水平的测定及其临床意义

目的:探讨血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)和免疫球蛋白E(IgE)水平在儿童哮喘发病过程中的相关性及意义。方法:实验共对80名哮喘患儿及20名健康儿童血清ECP及IgE进行测定,将实验结果进行统计比较从而得出结论。结果:哮喘患儿发作期血清ECP水平明显高于稳定期、缓解期及健康儿童,三者间比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);哮喘患儿发作期IgE水平高于缓解期和健康儿童,差异均具有统计学意义(P<0.01);但与稳定期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ECP和IgE都可体现哮喘患儿的发病情况,但相比于IgE,ECP能更好地反映嗜酸性粒细胞的活化状态和气道炎症的发病情况。因此哮喘患儿血清ECP水平可作为诊断哮喘、判断病情发展状况及指导炎症治疗的可靠指标。

壮医特色针挑疗法对支气管哮喘患者白细胞介素-4及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白影响的研究

目的研究壮医特色针挑疗法对支气管哮喘患者血清中白细胞介素4(IL-4)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平含量治疗前后的变化,以探讨其致病机制。方法选择符合病例纳入标准的支气管哮喘患者各35例。观察三组哮喘患者治疗4个疗程后其血清中IL-4及ECP水平含量的前后变化。结果壮医针挑治疗组哮喘患者血清中IL-4和ECP含量明显降低,且IL-4降低水平优于对照1组,对照2组(P<0.01,P<0.05),但ECP水平含量的降低与对照1组、对照2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论壮医特色针挑疗法能够有效地降低哮喘患者血清中IL-4和ECP,减轻支气管哮喘患者气道变应性炎症,提高临床疗效。

哮喘儿童诱导痰嗜酸粒细胞阳离子蛋白的测定与临床应用

目的探讨诱导痰液中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)测定在儿童哮喘中的应用价值。方法采用夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测77例不同时期、不同程度的哮喘患儿和27例正常儿童诱导痰液中ECP浓度,便携式肺功能仪测定肺通气功能。结果哮喘缓解组、轻度间歇组、中重度组诱导痰液中ECP含量[分别为(47.8±35.6)μg/L、(90.5±55.4)μg/L、(150.2±68.4)μg/L]与对照组[(5.6±20.2)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同程度哮喘患儿各组间诱导痰液中ECP含量差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘患儿诱导痰液中(ECP)含量与1s用力呼气容积占预计值百分比(FEV1.0%)呈显著负相关。结论诱导痰液中ECP是反映儿童组中重度哮喘及病情严重程度的客观指标。

支气管哮喘患者血清特异性IgE与ECP的关系

本文对174例支气管哮喘患者进行血清特异性IgE（Phadiatop法）和其中的46例同时作了血清嗜酸性阳离子蛋白（ECP）水平的检测。结果表明，支气管哮喘患者中有67．7％是由吸入性变应原所引起，与IgE介导的变态反应有关，血清特异性IgE水平与血清ECP小平是显著的线性正相关，说明ECP水平在一定程度上反映了吸入型（外源性）哮喘的变态反应水平，可对支气管哮喘的诊断分型提供帮助。

中医药对支气管哮喘ECP影响的研究

参阅相关文献,就中药复方、单味中药及提取物、穴位敷贴和其他外治法方面对支气管哮喘嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)影响的研究现状做简要综述,从而更好地揭示中医药治疗哮喘的作用机制。

血清嗜酸性细胞阳离子蛋白水平与支气管哮喘关系的探讨

目的:通过检测哮喘患者血清嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)水平,探讨ECP在哮喘发病机理中的作用以及诊疗中的意义。方法:应用Uni CAP100酶免疫荧光分析仪测定111例哮喘患者血清ECP水平,并以30例健康体检者作为对照组。结果:哮喘患者组血清ECP水平与健康对照组比较明显升高且差异显著,有统计学意义(P<0.01)。健康对照组及哮喘组患者组血清ECP水平男女性别之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血清ECP参与了哮喘的发病过程,哮喘患者血清ECP的含量变化与性别无关。ECP对于哮喘的诊断有重要意义,可作为临床诊断哮喘的有效的实验室辅助指标。

哮喘患者血浆ECP水平的临床观察

目的 :探讨血浆嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)在哮喘诊断及治疗中的价值。方法 :应用荧光酶免法定量测定 4 2例健康体检者、30例急性期及缓解期哮喘患者血浆ECP含量。结果 :急性组、缓解组与正常组比较 ,血浆ECP水平升高 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ;急性组与缓解组血浆ECP水平亦有显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论 :血浆ECP水平检测可作为哮喘患者诊断、监测、预后及指导抗炎治疗的参考指标。

咳嗽变异性哮喘患儿ECP、IgE及EOS检测的临床意义

目的探讨外周血嗜酸性粒细胞计数（EOS）、血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）及血清免疫球蛋白E（IgE）在咳嗽变异性哮喘的诊断、病情监测及疗效判断中的价值。方法将32例咳嗽变异性哮喘发作期患儿、30例咳嗽变异性哮喘缓解期患儿及30例正常儿童进行血清ECP及IgE水平测定，并用血球分析仪进行嗜酸性粒细胞计数。结果咳嗽变异性哮喘发作期ECP显著高于缓解期及健康对照组，缓解期患儿血清ECP水平明显下降接近正常对照组；发作期IgE明显高于缓解期和健康对照组，缓解期IgE仍高于正常对照组；咳嗽变异性哮喘患儿外周血EOS计数于急性发作期、缓解期及健康对照组三者之间均无统计学差异。结论血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）水平可客观而较直接地反映气道炎症的程度，预防疾病的发作。因此，动态检测血清ECP水平，可准确地判断气道炎症的控制情况，更有效地评价抗炎治疗的效果。

糖皮质激素支架植入联合鼻内镜手术对慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻腔通气功能及鼻黏膜恢复的影响

目的分析糖皮质激素支架植入联合鼻内镜手术对慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CSwNP)患者鼻腔通气功能及血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、纤维连接蛋白(Fn)和水通道蛋白-1(AQP-1)水平的影响。方法选择2022年1月-2023年2月该院收治的CSwNP患者60例,采用随机数表法分为试验组和对照组,各30例。试验组在原有鼻内镜手术基础上联用糖皮质激素支架植入治疗,对照组接受鼻内镜手术治疗,两组患者随访至术后12周。比较两组患者鼻部症状、生活质量、鼻腔结构、通气功能、血清ECP、Fn、AQP-1水平和不良反应发生情况。结果与治疗前比较,治疗后12周两组患者鼻腔黏膜结构评分(Lund-Mackay评分)、鼻部症状视觉模拟评分法(VAS)(包括:鼻塞、流涕、头部闷胀感、嗅觉减退、鼻腔干燥/结痂感)和血清ECP水平降低,鼻腔最小横截面至前鼻孔距离(DCAN)缩短,且试验组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后12周,两组患者鼻腔最小横截面积(NMCA)和鼻腔容积(NCV)增大,世界卫生组织生活质量测定量表简表(WHOQOL-100量表)评分、血清Fn和AQP-1水平升高,且试验组高于对照组(P<0.05)。治疗期间,两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖皮质激素支架植入联合鼻内镜手术可缓解CSwNP患者鼻部症状,改善鼻腔结构和通气功能,调节血清ECP、Fn和AQP-1水平,提高患者生活质量。

变应原免疫治疗变应性鼻炎的机制探讨

目的:通过观察特异性免疫治疗变应性鼻炎过程中效应细胞、抗体水平以及Th淋巴细胞亚群细胞因子的变化,来探讨其治疗机制。方法:随机选择25例变应性鼻炎患者进入特异性免疫治疗组,20例健康自愿者作正常对照组,评估和检测治疗组治疗前和治疗半年后以及正常对照组的症状体征评分、临床用药评分、外周血嗜酸球计数,血清ECP、TIgE、TIgG4、IL-4和IFN-γ等指标。比较治疗前后以及与正常对照组间各指标的差别及相关性。结果:①病例组比正常对照组显著性升高的指标包括症状体征评分、临床用药评分、外周血EOS、血清ECP、血清TIgE和血清TIgG4等;②病例组免疫治疗后显著性下降的指标有症状体征评分、临床用药评分、外周血EOS和血清ECP;③免疫治疗后的病例组血清TIgE比治疗前虽有减少,TIgG4有上升的趋势,但均无统计学意义;④治疗前症状体征评分与治疗前和治疗后的TIgG4对数均呈负相关;治疗前症状体征评分与外周血EOS和血清ECP均呈正相关。结论:①临床上可将外周血EOS计数和血清ECP结合起来,一起评价治疗或干预措施对变态反应性疾病的影响;②血清TIgG4与症状体征显著负相关,治疗后的TIgG4比正常对照显著升高,推测IgG4在变应性鼻炎的发生中起保护性抗体的作用。

VCAM-1和ECP在支气管哮喘发病中作用机制的研究

目的 探讨血清可溶性血管内皮细胞粘附分子 1(sVCAM 1)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)在支气管哮喘发病中的作用机制。方法 对年龄在 15～ 4 5岁的 2 3例支气管哮喘患者 (9例为发作期 ,14例为缓解期 )和 2 0例健康人采用酶联免疫双抗体夹心实验 (ELISA法 )测定了sVCAM 1,应用荧光免疫法测定了血清ECP、血清总IgE(tIgE)和特异性IgE(sIgE)。结果 哮喘组的血清sVCAM 1(几何均数 783 2 0± 1 5 7ng ml)显著高于对照组 (几何均数 5 4 1 10± 1 5 4ng ml) ,P值 =0 0 0 9;两组血清ECP含量未见明显差异 ,但哮喘急性发作期的血清ECP(16 2 2± 2 90 μg L)水平明显高于缓解期病人的ECP(3 0 5± 1 80 μg L)P <0 0 0 1;血清总IgE几何均数比较 ,哮喘组 (474 5 0± 2 38kU L)显著高于对照组 (2 4 34kU L± 2 2 5kU L)P <0 .0 0 1;血清特异性IgE分析提示蒿草花粉和户尘螨的sIgE不仅阳性检出率高 ,而且其血清sIgE的含量亦较高。结论 支气管哮喘患者的血清sVCAM 1较正常人高 ,这可能与嗜酸性粒细胞的移行有关 ;血清ECP的含量变化与哮喘患者的疾病状态有关 ;