丝裂霉素C对制备干细胞饲养层效果的影响

【目的】筛选出丝裂霉素C制备干细胞饲养层的最佳处理浓度，为建立完善干细胞饲养层培养体系奠定基础。【方法】以STO（sIM小鼠成纤维细胞耐硫代鸟嘌呤和耐鸟苯苷亚系）、MEF（原代分离的小鼠胎儿成纤维细胞）和BRL（大鼠肝细胞）为研究对象，分别以0、2．5、5．0、10．0、15．0、20．0μg／mL丝裂霉素C处理汇合度为90％～100％的STO、MEF、BRL细胞单层2h，继续培养3d后统计各处理组饲养层细胞的存活数量及增殖细胞比例，并用EdU免疫荧光标记法检测细胞的增殖状况。【结果】随着丝裂霉素C处理浓度的增加，饲养层增殖细胞数量占总细胞数量的比例均呈逐渐降低趋势。丝裂霉素C处理STO、BRL、MEF的最佳浓度分别为5．0、10．0和10．0Izg／mL，对应的增殖细胞比例分别为6．8％、3．O％和2．1％。【结论】丝裂霉素c能有效抑制干细胞饲养层细胞的增殖并保持良好活性，但不同饲养层细胞的最佳处理浓度有所差异。