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EEF1A2基因变异致发育性癫痫性脑病33型1例
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作者 贺海兰 林雪芹 +4 位作者 王晓乐 彭盼 肖慧 尹飞 彭镜 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期861-864,共4页
患儿,男,7月龄,表现为重度全面发育落后、难治性癫痫、肌张力降低、眼球震颤、眼距宽、鼻梁塌陷、上唇外翻、高腭弓和隐睾,基因检测发现EEF1A2基因存在c.364G>A(p.E122K)新生杂合错义变异,最终该患儿确诊为EEF1A2基因变异致常染色体... 患儿,男,7月龄,表现为重度全面发育落后、难治性癫痫、肌张力降低、眼球震颤、眼距宽、鼻梁塌陷、上唇外翻、高腭弓和隐睾,基因检测发现EEF1A2基因存在c.364G>A(p.E122K)新生杂合错义变异,最终该患儿确诊为EEF1A2基因变异致常染色体显性遗传发育性癫痫性脑病33型。该病例报道提示,对不明原因婴儿期起病的重度-极重度全面发育落后/智力障碍、难治性癫痫患儿,尤其是存在肌张力低下、语言缺失、颅面部畸形者,应考虑EEF1A2基因变异可能,应尽早完善遗传学检测协助诊断。 展开更多
关键词 全面发育落后 智力障碍 癫痫 eef1a2基因 婴儿
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EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量:2
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作者 曹海霞 诸琦 +3 位作者 章永平 黄佳 张愫 姚玮艳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期174-176,共3页
目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将... 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2。PCR、WesternBlot检测EEF1A2基因的表达。结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1400bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因。构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2。结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 腺病毒科 eef1a2 腺病毒载体 基因克隆
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eEF1A2基因在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 潘欢 李洪涛 +7 位作者 朱君玲 王红英 杨昕 武丹 潘贞贞 何鸿昌 任显显 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第2期176-180,共5页
为探讨真核翻译延伸因子1A2在宫颈癌中的表达以及临床病理学意义。收集新鲜宫颈癌组织和宫颈正常组织样本各10例,运用实时荧光定量PCR方法检测了eEF1A2基因的mRNA表达水平。收集宫颈癌患者60例、宫颈上皮内瘤样病变患者45例和慢性宫颈... 为探讨真核翻译延伸因子1A2在宫颈癌中的表达以及临床病理学意义。收集新鲜宫颈癌组织和宫颈正常组织样本各10例,运用实时荧光定量PCR方法检测了eEF1A2基因的mRNA表达水平。收集宫颈癌患者60例、宫颈上皮内瘤样病变患者45例和慢性宫颈炎患者35例石蜡标本组织,采用免疫组织化学SP方法检测eEF1A2基因在宫颈组织中的蛋白表达状况。qRT-PCR结果显示,eEF1A2基因在宫颈癌组织mRNA表达水平较正常宫颈组织明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,eEF1A2蛋白质表达强阳性率、弱阳性率和阴性率表达在宫颈癌组织分别为46.6%,31.0%和22.4%,而在慢性宫颈炎组织中分别为21.2%,48.5%和30.3%,差异具有统计学意义(P<0.001)。由此可知,eEF1A2基因的表达增高可能在宫颈癌的发生、发展中发挥一定的作用,其机制有待进一步研究,观察eEF1A2表达情况对于宫颈癌的临床诊断、病理分级有参考价值。 展开更多
关键词 宫颈癌 eef1a2基因 基因表达 QRT-PCR 免疫组织化学
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长爪沙鼠Eef1a2基因的克隆与同源性分析
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作者 李玉娜 郭萌 +6 位作者 杜小燕 李长龙 霍学云 路静 吕建祎 刘欣 陈振文 《实验动物科学》 2017年第1期20-25,共6页
目的长爪沙鼠真核蛋白延长因子1a2(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2,Eef1a2)基因的克隆,测序和同源性分析。方法提取长爪沙鼠骨骼肌组织的mRNA,通过同源扩增和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA en... 目的长爪沙鼠真核蛋白延长因子1a2(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2,Eef1a2)基因的克隆,测序和同源性分析。方法提取长爪沙鼠骨骼肌组织的mRNA,通过同源扩增和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆Eef1a2 cDNA序列全长。通过DANSTAR软件比对长爪沙鼠和人类、大鼠、小鼠Eef1a2的cDNA和氨基酸序列,并分析其同源性。结果长爪沙鼠Eef1a2 cDNA序列全长1812 bp,编码区(coding sequence,CDs)1392 bp,编码463个氨基酸。其核苷酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为88.6%,94.0%和93.8%;长爪沙鼠Eef1a2氨基酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为100%,99.9%和99.9%。结论长爪沙鼠Eef1a2的核苷酸序列和氨基酸序列均与人、大鼠、小鼠高度同源。因此,长爪沙鼠可能是一种人类Eef1a2基因研究的理想模型。 展开更多
关键词 长爪沙鼠 eef1a2 克隆 同源性分析
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eEF1A2敲除对小鼠骨骼肌组成的影响
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作者 宋子岱 郭萌 +4 位作者 裴朗 王妍 李长龙 杜小燕 陈振文 《实验动物科学》 2022年第2期17-22,共6页
目的 探究真核细胞翻译延长因子1-α2 (eEF1A2)缺失对小鼠骨骼肌的含量和组成的改变。方法 12月龄的eef1a2;CreER小鼠(iHBKO)及其对照eef1a2;CreER小鼠(Control)分别连续3 d腹腔注射30 mg/kg他莫昔芬,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Wes... 目的 探究真核细胞翻译延长因子1-α2 (eEF1A2)缺失对小鼠骨骼肌的含量和组成的改变。方法 12月龄的eef1a2;CreER小鼠(iHBKO)及其对照eef1a2;CreER小鼠(Control)分别连续3 d腹腔注射30 mg/kg他莫昔芬,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot验证小鼠骨骼肌eEF1A2敲除效率,利用HE染色检测小鼠骨骼肌形态,qRT-PCR检测小鼠骨骼肌主要纤维类型标志物的表达变化。结果 与对照组小鼠相比,iHBKO小鼠骨骼肌实现了eEF1A2的高效敲除。敲除小鼠腓肠肌脏器系数下降,但腓肠肌形态及横截面积无明显变化。eEF1A2基因敲除还导致快肌腓肠肌和趾长伸肌中慢肌标志物肌球蛋白重链7(myosin heavy chain 7,Myh7)表达明显升高,快肌标志物肌球蛋白重链4(myosin heavy chain 4,Myh4)明显降低,而慢肌比目鱼肌和胫骨前肌的Myh4和Myh7显著降低。结论 eEF1A2缺失降低了腓肠肌脏器系数,并导致小鼠快肌纤维向慢肌纤维的转化。 展开更多
关键词 eef1a2 基因敲除 小鼠 骨骼肌
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敲低EEF1A2增强拉帕替尼对HER2+乳腺癌细胞的药效
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作者 梁馨予 刘佳君 刘建文 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期59-69,共11页
探究乳腺癌中翻译延伸因子1α2(EEF1A2)与HER2之间的潜在关系。通过TCGA(TheCancerGenomeAtlas)分析EEF1A2mRNA在乳腺癌中的表达情况;利用MTT(噻唑蓝)、克隆形成和Transwell实验方法检测了HER2+乳腺癌细胞SKBR3和MDA-MB-453在EEF1A2蛋... 探究乳腺癌中翻译延伸因子1α2(EEF1A2)与HER2之间的潜在关系。通过TCGA(TheCancerGenomeAtlas)分析EEF1A2mRNA在乳腺癌中的表达情况;利用MTT(噻唑蓝)、克隆形成和Transwell实验方法检测了HER2+乳腺癌细胞SKBR3和MDA-MB-453在EEF1A2蛋白表达敲低及拉帕替尼处理后的增殖、迁移和凋亡情况。结果表明EEF1A2 mRNA在HER2+乳腺癌组织中高表达,并降低了HER2+乳腺癌患者的总生存率;同时,SKBR3和MDA-MB-453细胞中EEF1A2敲低会增强拉帕替尼对细胞体外增殖、迁移和侵袭的抑制,以及对凋亡的促进。Western blot实验结果表明,下调EEF1A2会增强拉帕替尼对HER2+乳腺癌细胞中HER2/AKT通路的抑制。EEF1A2蛋白可成为改善拉帕替尼治疗HER2+乳腺癌效果的潜在靶标。 展开更多
关键词 乳腺癌 翻译延伸因子1α2 HER2 AKT 拉帕替尼
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EEF1A2基因对胰腺癌细胞生长和增殖的影响 被引量:2
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作者 曹海霞 诸琦 +5 位作者 丁健青 张愫 姚玮艳 钱爱华 周琳 章永平 《中华胰腺病杂志》 CAS 2008年第6期376-378,共3页
目的探讨EEF1A2转基因对胰腺癌细胞SW1990生长和增殖的作用。方法应用腺病毒载体将EEFIA2基因转染人胰腺癌细胞SW1990,采用MTY法检测细胞的增殖,软琼脂克隆形成试验检测细胞的生长,应用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果带EEFIA2... 目的探讨EEF1A2转基因对胰腺癌细胞SW1990生长和增殖的作用。方法应用腺病毒载体将EEFIA2基因转染人胰腺癌细胞SW1990,采用MTY法检测细胞的增殖,软琼脂克隆形成试验检测细胞的生长,应用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果带EEFIA2的腺病毒感染SW1990细胞后,EEF1A2mRNA表达增加,72h的A750值为1.2996±0.2091,培养6d的细胞数为81250±1767,14d的克隆形成率为82%,均较空载体腺病毒组和PBS组显著增加(P〈0.05);G.期细胞比例为28.5%,S期细胞比例为60.9%,前者较空载体腺病毒组和PBS组显著减少,后者较空载体腺病毒组和PBS组显著增加(P〈0.05)。结论EEF1A2基因可以显著促进人胰腺癌细胞SW1990的生长和增殖。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 细胞增殖 eef1a2
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真核延伸因子-1A2基因在宫颈癌侵袭和迁移中的作用研究 被引量:1
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作者 靳馥源 潘泽民 +6 位作者 辛慧珍 者湘漪 张春贺 李洪涛 潘贞贞 李冬妹 郑威楠 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第3期353-358,共6页
目的探讨真核延伸因子-1A2(eEF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法设计eEF1A2基因的siRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞、HeLa细胞和C33A细胞,实验组包括:转染Si-eEF1A2-1和SieEF1A2-2的细胞组,未转染的细胞和非干扰... 目的探讨真核延伸因子-1A2(eEF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法设计eEF1A2基因的siRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞、HeLa细胞和C33A细胞,实验组包括:转染Si-eEF1A2-1和SieEF1A2-2的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。采用Western blot方法检测eEF1A2和E-cadherin在宫颈癌细胞中蛋白质表达水平,通过划痕实验和基质胶包被transwell实验分析细胞迁移能力,通过CCK-8实验和平板克隆实验检测细胞增殖。结果宫颈癌细胞中,siRNA干扰的细胞与对照组相比eEF1A2蛋白质表达水平降低,E-cadherin蛋白质表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验si-eEF1A2转染的细胞与对照组相比较,愈合间隙宽,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移实验,RNA干扰的细胞与对照组相比,穿过小室基底膜的细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);si-eEF1A2干扰的细胞CCK8增殖实验、细胞克隆形成实验中可以抑制宫颈癌细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。结论降低宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞eEF1A2基因表达水平,可以抑制癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 宫颈癌 eef1a2基因 SIRNA干扰 侵袭 迁移
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人类真核延伸因子1A2与生长因子受体结合蛋白2在胰腺癌组织中的表达及临床病理意义 被引量:1
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作者 周维霞 蒋晓红 +2 位作者 杨勇 陈瑞东 胡端敏 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第14期2049-2054,共6页
目的:探讨人类真核延伸因子1A2(eukaryotic elongation factor 1A2,EEF1A2)和生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound 2,GRB2)在胰腺癌组织中的表达、相互关系及临床病理意义.方法:应用免疫组织化学方法检测97胰腺癌及其... 目的:探讨人类真核延伸因子1A2(eukaryotic elongation factor 1A2,EEF1A2)和生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound 2,GRB2)在胰腺癌组织中的表达、相互关系及临床病理意义.方法:应用免疫组织化学方法检测97胰腺癌及其周边胰腺组织中EEF1A2和GRB2蛋白表达情况.结果:EEF1A2蛋白在胰腺癌周边组织中不表达,但在77.8%(76/97)的胰腺癌组织中表达阳性.EEF1A2的异常表达与胰腺癌周边淋巴结转移(χ2=4.28,P=0.039)和神经浸润显著相关(χ2=4.11,P=0.043).GRB2蛋白在胰腺癌和周边胰腺组织中阳性表达率分别为82.5%(80/97)和30.2%(31/97),胰腺癌组织中GRB2蛋白阳性率显著高于周边胰腺组织(χ2=48.5,P<0.001).GRB2阳性表达率与淋巴结转移显著相关(χ2=4.63,P=0.031).胰腺癌中EEF1A2和GRB2表达具有显著等级正相关(rs=0.451,P<0.001).结论:EEF1A2和GRB2的表达与胰腺癌的生物学行为密切相关,且两者之间的表达强度具有显著等级正相关. 展开更多
关键词 胰腺癌 人类真核延伸因子1A2 生长因子受体结合蛋白2 转移
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人类真核延伸因子1A2对胰腺癌细胞侵袭、转移能力的影响 被引量:3
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作者 诸琦 曹海霞 +5 位作者 黄佳 丁健青 张愫 李百文 姚玮艳 章永平 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期751-754,共4页
目的探讨外源性人类真核延伸因子(EEF)1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞株后,细胞侵袭转移能力的改变。方法应用腺病毒载体将EEFlA2基因导入人胰腺癌SW1990细胞中,采用划痕实验、Transwell小室、细胞粘附实验检测转染前后细胞运动、... 目的探讨外源性人类真核延伸因子(EEF)1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞株后,细胞侵袭转移能力的改变。方法应用腺病毒载体将EEFlA2基因导入人胰腺癌SW1990细胞中,采用划痕实验、Transwell小室、细胞粘附实验检测转染前后细胞运动、侵袭、转移及粘附能力的改变。结果Ad5/F35-EEF1A2转染后继续培养48h的SW1990细胞,可见预期大小的特异性条带。实验组24h后细胞迁移率为(74.43±2.12)%,与阴性对照组和空白对照组比较差异有统计学意义[(44.08±5.92)%和(48.09±3.54)%,P〈0.05]。实验组48h后穿膜细胞数为(65.42±8.24)个,与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[(20.10±5.82)个和(23.25±5.23)个,P〈0.05]。实验组48h后穿膜细胞数为(61.30士5.68)个,与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[(32.04±3.60)个和(32.33±2.51)个,P〈0.05],且对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型胶原、纤维结合蛋白、粘蛋白的粘附力增强(P〈0.05)。结论腺病毒介导的EEF1A2高表达能明显增强胰腺癌SW1990细胞的运动、侵袭、转移及粘附能力。提示EEF1A2可能通过改变胰腺癌细胞的生物学特性影响胰腺癌的发生发展。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 真核延伸因子1A2 人类 细胞株 肿瘤
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eEF1A1低表达对肝癌细胞凋亡、增殖与迁移的影响及eEF1A1/A2与ANXA7间的相互作用 被引量:6
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作者 周淑亭 王丽 +8 位作者 黄玉红 张军 魏元怡 王静文 王洪海 邢博漪 宣威 黄贺 唐建武 《肿瘤学杂志》 CAS 2018年第8期755-763,共9页
[目的]研究shRNA抑制eEF1A1表达对肝癌Hca-P细胞凋亡、增殖、迁移的影响,并通过分别下调eEF1A1和ANXA7的表达,探讨肝癌Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2与ANXA7表达的相关性及潜在的相互作用。[方法]构建靶向eEF1A1基因的shRNA质粒表达载体,... [目的]研究shRNA抑制eEF1A1表达对肝癌Hca-P细胞凋亡、增殖、迁移的影响,并通过分别下调eEF1A1和ANXA7的表达,探讨肝癌Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2与ANXA7表达的相关性及潜在的相互作用。[方法]构建靶向eEF1A1基因的shRNA质粒表达载体,瞬时转染至小鼠肝癌Hca-P细胞中,设无处理组(CON)、eEF1A1-shRNA组(eEF1A1-shRNA)、转染pGPU/GFP/Neo-NC的阴性对照组(NC)三组细胞进行实验。采用实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测eEF1A1的抑制效果,并分别检测各组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达。CCK-8法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测对细胞增殖、凋亡、迁移的影响。此外,复苏已稳定低表达ANXA7的Hca-P细胞,通过实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测无处理组(CON)、ANXA7-shRNA转染组(ANXA7-shRNA)、阴性对照组(NC)三组Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达。[结果]eEF1A1靶向shRNA成功下调小鼠肝癌Hca-P细胞中eEF1A1基因的表达。流式细胞仪检测显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组细胞凋亡率分别为2.85%±0.37%、4.71%±0.21%和3.01%±0.33%,eEF1A1-shRNA组的细胞凋亡较CON组和NC组明显增加(P〈0.05);CCK-8实验发现,eEF1A1-shRNA转染细胞后细胞增殖能力较CON组和NC组明显下降;Transwell实验显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组迁移细胞数目为123.75±9.26、66.84±17.47、115.31±12.59,eEF1A1-shRNA组细胞迁移能力较CON组和NC组显著减弱(P〈0.05)。qRT-PCR和Westernblot检测显示,eEF1A1-shRNA组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组明显降低(P〈0.05),相较其无处理组的蛋白表达水平,eEF1A2和ANXA7分别下降了57%和21%;ANXA7-shRNA组中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组亦明显降低(P〈0.05)。[结论]通过靶向eEF1A1的shRNA使eEF1A1低表达,可诱导细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力及迁移能力。eEF1A1、eEF1A2与ANXA7的表达密切相关,且eEF1A1与ANXA7存在相互作用,可能共同参与调控肿瘤的发生与发展。 展开更多
关键词 eEF1A1 eef1a2 ANXA7 肝肿瘤
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