小鼠Ehrlich实体瘤局部DNA直接转染TGF-β1基因的研究

研究Ｅｈｒｌｉｃｈ 实体瘤局部ＤＮＡ 直接转染ＴＧＦ－β１ 基因的治疗效果。将真核表达载体ｐＳＶＴＧＦ－ β１ 直接瘤周转染Ｅｈｒｌｉｃｈ 实体瘤， 用原位杂交方法检测靶基因的表达， ＭＴＴ法检测脾脏细胞免疫功能， 并观察小鼠生存期及肿瘤生长速度。治疗组肿瘤细胞及瘤周组织有靶基因ｍ ＲＮＡ表达， 脾脏细胞免疫功能高于对照组， 肿瘤生长受到抑制， 治疗组小鼠生存期较对照组明显延长。ＴＧＦ－β１ 基因ＤＮＡ直接转染法可以明显抑制肿瘤生长，不影响全身细胞免疫功能，具有较大的潜在临床应用价值。

调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响

目的探讨调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响。方法将60只昆明种雄性小鼠随机分为模型组,调衡方大、中、小剂量组(按生药50、25、12.5g/kg),贞芪扶正胶囊组(0.83g/kg),热休克组,将传代培养的S180癌细胞接种于昆明种小鼠腹腔,灌胃给药12d后处死小鼠,分别抽取腹水制片,光镜下观察细胞形态,并采用免疫组织化学法检测腹水CD4、CD8表达及血清白细胞介素-10(IL-10)的活性。结果调衡方中剂量组可见腹水S180癌细胞大量坏死和凋亡,模型组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡方中、大剂量组腹水中CD4、CD8表达均增多(P<0.01),而热休克组则主要是CD8表达升高(P<0.05)。调衡方在25、50g/kg剂量下,对S180荷瘤小鼠外周血IL-10活性水平有抑制作用(P<0.05)。结论调衡方对小鼠腹水S180癌细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与抑制小鼠外周血IL-10的活性及增强CD4、CD8的表达水平有关,调衡方亦可致S180癌腹水癌细胞坏死和凋亡,机制可能与其提高细胞免疫功能,从而增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤能力有关,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移。

角果木提取物Tagalsin对小鼠艾氏腹水瘤抑制作用的研究

目的探讨角果木提取物Tagalsin的抗肿瘤作用及其对bcl-2/bax表达的影响,了解其抗肿瘤机制。方法建立小鼠艾氏腹水瘤实体瘤模型,随机分为5组,Tagalsin高剂量组给予Tagalsin 16.50mg/(kg.d)、中剂量组给予Tagalsin 3.30mg/(kg.d)、低剂量组给予Tagalsin 0.66mg/(kg.d),空白对照组给予等体积食用油,阳性对照组给予卡莫氟100mg/(kg.d),连续灌胃给药10d,然后分别计算各组抑瘤率、脾指数和胸腺指数,免疫组化方法检测bcl-2、bax的表达水平及其比值。结果与空白对照组比较,阳性对照组及Tagalsin各剂量组肿瘤生长缓慢(F=1 588.82,t=36.38～75.19,P<0.05),高、中、低剂量组及阳性对照组的抑瘤率分别为37.25%、34.10%、29.51%、61.03%;与空白对照组比较,阳性对照组及Tagalsin各剂量组脾指数和胸腺指数均显著降低;与阳性对照组比较,Tagalsin各剂量组胸腺指数均降低(F=95 874.12,t=2.54～474.59,P<0.05)。阳性对照组及Tagalsin各剂量组bcl-2/bax比值与空白对照组比较差异均具有显著性(F=342.89,t=23.30～47.19,P<0.05)。结论 Tagalsin可能通过下调bcl-2、上调bax的表达,从而抑制肿瘤的生长,且对小鼠的体液免疫有一定的调节作用。

眼镜蛇毒细胞毒素的体内外抗肿瘤活性及毒性比较

目的比较舟山眼镜蛇毒细胞毒素(CTX)Ⅹ～ⅩⅢ(CTXⅩ～ⅩⅢ)的毒性及抗肿瘤活性,筛选低毒高效的CTX。方法以Meier法测定CTX近似半数致死量(LD50);通过描记心电图测定引起大鼠100%死亡的最小剂量(MLD);以磺酰罗丹明B(SRB)法观察CTX对体外培养的Bel7404细胞和HL60细胞的杀伤作用;观察荷U14及艾氏腹水癌(EAC)小鼠腹腔注射(ip)CTXⅫ、ⅩⅢ的效果,测定肿瘤生长抑制率。结果CTXⅩ～ⅩⅢ对小鼠(iv)的近似LD50值分别为(1.16±0.12),(1.80±0.21),(0.75±0.21),(1.85±0.15)mg/kg;MLD为(183±18),(310±26),(224±16),(343±28)μg/kg(P<0.001)。CTX对Bel7404细胞作用24h的IC50分别为:(2.22±0.28),(2.97±0.10),(1.12±0.13),(2.46±0.28)μg/mL;对HL60细胞作用24h的IC50为:(1.97±0.06),(2.61±0.24),(1.61±0.18),(2.40±0.30)μg/mL(P<0.01)。CTXⅫ和ⅩⅢ(ip)对U14实体瘤和EAC腹水癌均有剂量依赖性抑制作用。结论4种CTX中,Ⅹ、Ⅻ毒性较强,Ⅺ次之,ⅩⅢ最弱。CTX对体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用强弱顺序为:Ⅻ>Ⅹ>ⅩⅢ>Ⅺ。Ⅻ和ⅩⅢ对小鼠体内接种的U14及EAC的抑制作用是ⅩⅢ>Ⅻ。在4种CTX中,ⅩⅢ的抗肿瘤作用相对较强,毒性最低。

EL4细胞STAT4沉默前后培养上清对小鼠肿瘤生长的影响

目的:探讨沉默小鼠T淋巴瘤细胞(EL4细胞)信号转导和转录激活因子4(STAT4)前后,其改变的培养上清液成分对H22肝癌荷瘤小鼠腹水生长及个体生存状况的影响。方法:应用ELISA方法检测肿瘤细胞STAT4沉默后培养上清液中白介素(IL)-10水平;将H22肝癌荷瘤小鼠随机分为STAT4(+)组、STAT4(-)组、IL-10组、培养基组,分别腹腔注射STAT4沉默前、后培养细胞上清液,IL-10,1640培养基,检测荷瘤小鼠体质量、腹围、腹水、生存率及腹水瘤细胞存活等指标;RT-PCR半定量检测荷瘤小鼠脾细胞的Foxp3mRNA表达。结果:STAT4沉默后培养细胞上清液IL-10水平明显增高;用不同的培养上清液成分注射后STAT4(-)组体质量增长率较STAT4(+)组显著降低,与培养基组各指标比较差异无统计学意义;15d内生存率比较,STAT4(-)组显著高于STAT4(+)组、IL-10组;STAT4(-)组脾细胞Foxp3表达水平高于其他3组。结论:STAT4沉默后培养细胞上清液局部注射荷瘤小鼠,能抑制癌性腹水增长,显著提高存活率,但脾细胞Foxp3mRNA水平明显增高,可抑制荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫,这与近期观察到的结果相悖。

帚状江蓠乙醇提取物对小鼠Ehrlich腹水癌的抑制作用(英文)

目的:探讨帚状江蓠乙醇提取物对小鼠Ehrlich腹水癌的抑制作用。方法:通过向小鼠腹腔注射Ehrlich腹水癌细胞建立肿瘤模型。为了解帚状江蓠乙醇提取物的口服急性毒性,在造模后24 h,给予实验小鼠口服不同剂量的帚状江蓠乙醇提取物,观察小鼠存活时间。其次,通过检测Ehrlich腹水癌荷瘤小鼠生存时间、体外细胞毒性、血清生物学指标以及肝脏酶水平等来评估帚状江蓠的抗肿瘤作用。结果:与模型对照组相比,帚状江蓠乙醇提取物不仅抑制了肿瘤的形成,也延长了Ehrlich腹水癌荷瘤小鼠的生存时间(P<0.05或P<0.01)。帚状江蓠乙醇提取物可逆转Ehrlich腹水癌荷瘤小鼠各项生物学指标及肝脏酶水平的变化。结论:本研究表明,海藻类植物帚状江蓠具有抗肿瘤作用,且其抗肿瘤的效果可能与服用剂量有关。

铜对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及肝功能和免疫功能的影响

目的通过建立H22荷瘤小鼠模型,探讨适宜的铜浓度对小鼠肿瘤生长及肝功能和免疫功能的影响。方法选取SPF级昆明种小鼠80只,随机分为灌胃给水组(A组),灌胃给水+四硫钼酸铵盐(TM)组(B组),分别灌胃给予0.06、0.30、1.50mg/kg硫酸铜组(C、D、E组),分别灌胃给予0.06、0.30、1.50 mg/kg硫酸铜+1mg/kg TM组(F、G、H组)。按照分组用硫酸铜溶液给小鼠灌胃4周后,将H22腹水瘤细胞接种于小鼠右腿部,建立H22荷瘤小鼠模型。再根据相应的分组及所给予的硫酸铜浓度继续灌胃4周。8周后,处死小鼠。采用ICP-MS检测小鼠血清中铜的浓度;采用全自动生化分析仪检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和白蛋白(ALB)的水平;采用实时定量PCR方法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达。结果与A、F、G、H组相比,D、E组肿瘤均有不同程度的增长,差异有显著性(F=9.034,P<0.05)。各组小鼠的肝功能指标AST、ALT和ALB以及脾脏指数和胸腺指数比较差异无显著性(P>0.05)。ICP-MS检测结果显示,各组小鼠血清铜水平比较差异有显著性(F=3.803,P<0.05);且血清铜的浓度与肿瘤质量间具有相关性(r=0.316,P<0.05)。C、D、E组肿瘤组织中VEGF和bFGF mRNA的相对表达量与A组比较均明显升高,差异具有显著意义(F=40.118、197.090,P<0.05)。结论适宜的铜浓度能够影响H22移植瘤小鼠肿瘤的生长,可能是通过上调VEGF和bFGF mRNA的表达水平,从而达到促进肿瘤生长的作用,且其促进作用呈剂量依赖性。

重组腺病毒bcl-xs基因对人卵巢癌裸鼠移植瘤作用的研究

目的 观察重组腺病毒bcl xs基因 (adv bcl xs基因 ,简称bcl xs基因 )对人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制和荷瘤裸鼠生存率的影响 ,为卵巢癌的基因治疗提供实验基础。方法 采用以复制缺陷型腺病毒bcl xs基因感染的人胚肾细胞 ,使bcl xs基因在人胚肾细胞内扩增 ,扩增后的bcl xs基因感染大鼠卵巢癌细胞株NUTU 19,观察bcl xs基因对NUTU 19细胞的生长抑制作用并检测其病毒滴度后 ,将bcl xs基因导入人卵巢癌裸鼠移植瘤中 ,观察bcl xs基因对腹水的生长抑制作用 ,计算裸鼠的生存时间 ,并观察bcl xs基因对裸鼠全身和局部的毒副作用 ;电镜观察bcl xs基因的病毒颗粒 ,以免疫细胞化学染色测定bcl xs基因表达情况。结果 bcl xs基因可在人胚肾细胞内扩增 ,对NUTU 19细胞有抑制和杀伤作用 ,并在裸鼠体内呈过度表达 ,使裸鼠腹水形成的时间由 5～ 10d延长至 11～ 2 3d ,裸鼠平均生存时间由 2 4d延长至 39d。bcl xs基因对裸鼠全身和局部无明显毒副作用。结论 bcl xs基因导入人卵巢癌裸鼠移植肿瘤 ,能延缓腹水形成 ,延长裸鼠的生存时间 。

Menadione reduced doxorubicin resistance in Ehrlich ascites carcinoma cells in vitro

目的：研究维生素Ｋ３（Ｍｅｎ）降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对阿霉素（Ｄｏｘ）的抗药性．方法：测定谷胱甘肽（ＧＳＨ），细胞膜流动性及谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性．细胞存活力以甲基四唑蓝法测定．结果：ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ，ＧＳＴ及膜流动性均较ＥＡＣ细胞增加（Ｐ＜００１）．Ｄｏｘ对ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＩＣ５０为２２３（１５８－２８８）ｍｇ·Ｌ－１．Ｍｅｎ５或１０ｍｇ·Ｌ－１可降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ（Ｐ＜００１），１ｍｇ·Ｌ－１对ＧＳＨ无影响（Ｐ＞００５），但可降低细胞膜流动性（Ｐ＜００５）．Ｍｅｎ１，５或１０ｍｇ·Ｌ－１可使ＤｏｘＩＣ５０降低到９．６（７８－１１３），６０（２８－９２），或５３（３９－６７）ｍｇ·Ｌ－１（Ｐ＜００１）．结论：Ｍｅｎ在体外降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对Ｄｏｘ抗药性与对ＧＳＨ的耗竭有关．