巨型艾美耳球虫微线蛋白3结构域蛋白的免疫保护作用

巨型艾美耳球虫是4种严重危害养禽业的鸡球虫之一。实验室前期研究发现,巨型艾美耳球虫微线蛋白3 (EmMIC3)能够与肠上皮细胞结合,经细胞ELISA、间接免疫荧光及子孢子侵入抑制试验发现,EmMIC3的5个结构域中EmMAR2与小肠上皮细胞结合能力最强,EmMAR5与小肠上皮细胞结合能力最弱。本研究经原核表达和纯化获得重组蛋白EmMIC3、EmMAR2和vMAR5,并制备了这3种蛋白的抗血清。通过分别注射重组蛋白和多克隆抗体评估3种蛋白抵抗巨型艾美耳球虫感染的免疫保护作用。结果显示:免疫EmMIC3、EmMAR2和EmMAR5均能够提高抗原特异性IgY抗体水平;重组蛋白免疫组中,EmMIC3和EmMAR2的抗球虫指数分别为180.70和70.82,而EmMAR5的抗球虫指数为137.69;重组蛋白抗血清免疫组中,EmMIC3和EmMAR2的抗球虫指数分别为180.49和164.60,而EmMAR5的抗球虫指数为137.37。上述结果表明,不管是重组蛋白免疫组还是重组蛋白抗血清免疫组,与对照组相比,EmMIC3和EmMAR2都具有明显的免疫保护效果,且MIC3的免疫保护效果最好,而EmMAR5则不具有免疫保护效果。结构域蛋白EmMAR2的免疫保护效果不及EmMIC3,启示虽然EmMAR2具有较好的免疫保护效果,但是要发挥更好的抵抗巨型艾美耳球虫感染的免疫保护效果,可能需要其他4种结构域蛋白的协同作用。