我国部分地区黄羽肉鸡布氏艾美耳球虫感染情况调查

为了解我国黄羽肉鸡布氏艾美耳球虫感染情况,研究从16个省份的规模化黄羽肉鸡场收集不同日龄鸡粪便样品共696份,使用基于鸡球虫序列特征扩增区(SCAR)标记筛选基因的布氏艾美耳球虫特异性引物及探针,采用荧光定量PCR进行检测和鉴定。结果显示,布氏艾美耳球虫的总感染率为34.20%,16个省(市、区)养鸡场均存在布氏艾美耳球虫感染,且不同地区感染率差异显著(P<0.05)。不同日龄鸡群布氏艾美耳球虫的感染率差异不显著(P>0.05),40日龄以上鸡群感染率相对较高;双层平养模式鸡群感染率明显高于单层平养的鸡群。研究结果提示,目前我国各地区黄羽肉鸡布氏艾美耳球虫感染率较高,不同地区间总体感染率差异显著,不同日龄黄羽肉鸡群的感染率差异不显著,应在养殖过程中全程防控,且对双层平养鸡群进一步加强防控措施。

柔嫩艾美耳球虫耐药株与鸡3种球虫的同工酶的研究

对不同离子载体抗生素具有抗药性的柔嫩艾美耳球虫和药物敏感的柔嫩艾美耳球虫、布氏艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫的孢子化卵囊，采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳，进行了乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），葡萄糖磷酸异构酶（ＧＰＩ）和葡萄糖６磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）等同工酶的分析。试验结果显示，同工酶酶谱可以反应出球虫种间差异；而柔嫩艾美耳球虫抗性虫株的ＬＤＨ酶谱是２条带，敏感虫株是３条带，抗性株比敏感株缺少１条ＬＤＨ２带，两者的ＧＰＩ和Ｇ６ＰＤ的酶谱则没有差异。

布氏艾美耳球虫早熟弱毒虫株的选育

运用Ｊｅｆｅｒｓ（１９７５）选育法进行了Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株的选育，经过连续七代的选育，获得了Ｅｉｍｅｒｉａｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株，该虫株的潜隐期为１０８ｈ，比Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ亲本毒株提前了１２ｈ以上。免疫试验和致病性试验的结果表明Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟虫株具有免疫原性，对攻毒具有完全的保护作用。Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟虫株的致病力相对其亲本株大大降低。上述结果表明，Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ早熟弱毒虫株可用于鸡球虫弱毒疫苗的研制。

布氏艾美耳球虫南宁株的分离及鉴定

本试验从南宁市郊区某鸡场感染球虫病的病鸡粪便中收集到混合卵囊,采用改良过的琼脂单卵囊分离法从中分离纯化出2个球虫虫株,并对其中的1个球虫分离株进行了鉴定,鉴定结果为:该株球虫卵囊呈椭圆形或卵圆形,卵囊平均大小为(22.51±0.4790)μm×(15.94±0.5599)μm,平均卵型指数为1.41212±0.06714,裂殖体平均大小为31.33μm×27.46μm,潜在期为120h50min,排卵高峰期为感染后第6天,最短孢子化时间为18h50min,寄生部位为小肠中、下段,属中等毒力的球虫虫株。通过将这些测定和观察到的指标与各类文献中所记载的各种鸡艾美耳球虫的特征进行了对比,经过综合分析后,将该分离株球虫鉴定为布氏艾美耳球虫,并且将它命名为布氏艾美耳球虫南宁株,记为Eimeria.brunetti-GXNN。对该虫株的成功分离鉴定,为进一步了解本地球虫虫株的生物学特性,开展鸡球虫病的免疫预防奠定了基础。

布氏艾美耳球虫保定株的鉴定及致病性研究

本研究采用琼脂薄膜球虫单卵囊分离技术,从河北省保定市暴发球虫病的某鸡场鸡粪便中成功分离出布氏艾美耳球虫卵囊。生物学特性研究结果表明,该虫种潜隐期为125h,卵囊大小为26.1μm×21.3μm,形状指数为1.22,寄生与病变部位主要在小肠后段、直肠和泄殖腔,特征性病变是肠黏膜层有出血斑纹及血性内容物。感染一定剂量该球虫,鸡的生产性能受到影响,当感染剂量为2×105个/羽时会出现鸡死亡,表明该虫株具有较强致病性;应用特异PCR方法对获得的卵囊进行分子鉴定,结果确认所分离和纯化的球虫卵囊为布氏艾美耳球虫纯种,并将该虫株命名为布氏艾美耳球虫保定株———BBD株。