蚯蚓两种抗菌肽的分离纯化及部分性质

经硫酸铵沉淀、超滤、阳离子交换分离和反相快速蛋白质液相色谱 (FPLC)分析 ,得到了两种新的蚯蚓抗菌肽F 1与F 2 ,经电喷雾离子源质谱 (ESI MS)测定 ,其相对分子质量为 5 35 2 7和 5 19 2 7.串联质谱(MS/MS)数据表明F 1的肽序列为Ac Ala Met Val Ser Ser,F 2的肽序列为Ac Ala Met Val Gly Thr.最小抑菌浓度 (MIC)实验表明 ,F 1与F 2对鹑鸡肠球菌 (Enterococcus gallinarum )、绿脓杆菌 (Pseudomonaspyocyanea)、鲍氏不动杆菌 (Acinetobacterbaumanii)、土生克雷伯氏菌 (Klebsiellaterrigena)的最小抑菌浓度分别为 11 4mg/L和 12 85mg/L ,对粪肠球菌 (Enterococcusfaecalis)的最小抑菌浓度分别为 2 2 8mg/L和2 5 6 8mg/L.对真菌白色念株菌 (Candidaalbicans)

蚯蚓抗菌肽40 kD Fetidin基因的原核表达与复性

40 kD的fetidin是存在于蚯蚓体腔液中的一种具有较好抗菌活性的蛋白.为了获得大量fe-tidin,从蚯蚓(Eisenia fetida)中调取fetidin的基因,分别克隆到pKW32和pMXB10中,构建了融合和非融合表达载体,并转化大肠杆菌进行诱导表达.结果无论是融合还是非融合表达,产物均以包含体形式存在.融合表达产物通过亲和层析获得复性,复性产物对粘质沙雷氏菌具有抗菌活性.