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TGF-β_1和Elastin在女性PFD患者阴道前壁结缔组织中的表达及对弹性纤维的影响 被引量:7
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作者 符爱珍 罗新 +6 位作者 张颖 杨琰 王晓玉 蒋学风 帅翰林 张敬丽 蓝建发 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期409-413,共5页
目的研究盆底功能障碍性疾病(PFD)患者阴道前壁结缔组织的病理特征,探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和弹性蛋白(Elastin)在PFD患者阴道前壁结缔组织中的表达及其对弹性纤维的影响。方法选择资料完整的59例PFD患者[其中压力性尿失禁(SUI)... 目的研究盆底功能障碍性疾病(PFD)患者阴道前壁结缔组织的病理特征,探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和弹性蛋白(Elastin)在PFD患者阴道前壁结缔组织中的表达及其对弹性纤维的影响。方法选择资料完整的59例PFD患者[其中压力性尿失禁(SUI)合并盆腔脏器脱垂(POP)30例,单纯POP 29例]阴道前壁结缔组织标本为研究组;同期45例非SUI、非POP患者标本为对照组。常规石蜡切片、苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色、弹性纤维染色,免疫组化法和Western blot法检测两组TGF-β1和Elastin的蛋白表达。结果弹性纤维染色显示研究组的弹性纤维较对照组明显稀疏变细。Western blot检测与免疫组化染色结果类似,两组阴道前壁结缔组织均见TGF-β1和Elastin的表达,但研究组较对照组明显减弱,差异有统计学意义(均P<0.01);相关性分析表明,TGF-β1和Elastin表达呈正相关。结论盆底结缔组织弹性纤维的破坏和缺失可能与PFD的发生密切相关,Elastin和TGF-β1的减少可能共同参与了PFD的发生、发展。TGF-β1可能是盆底弹性纤维Elastin表达的重要调控因子。 展开更多
关键词 压力性尿失禁 盆底器官脱垂 弹性纤维 转化生长因子β1 弹性蛋白
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绝经前盆腔器官膨出患者子宫主韧带中Elastin、LOX基因表达的研究 被引量:6
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作者 张琳琳 于浩 张师前 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第2期207-209,213,共4页
目的检测女性盆底器官膨出(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫主韧带中弹性蛋白(Elastin)和赖氨酰氧化酶(1ysyl oxidase,LOX)表达水平,探讨Elastin、LOX基因与POP发生机制间的关系。方法选择因POP而行全子宫切除术的绝经前患者42例,... 目的检测女性盆底器官膨出(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫主韧带中弹性蛋白(Elastin)和赖氨酰氧化酶(1ysyl oxidase,LOX)表达水平,探讨Elastin、LOX基因与POP发生机制间的关系。方法选择因POP而行全子宫切除术的绝经前患者42例,同期选择因妇科良性疾病、无压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)或POP行全子宫切除术绝经前患者27例作为对照。术中取子宫主韧带,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定Elas-tin和LOX的mRNA表达,免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测两种蛋白的表达。结果POP组子宫主韧带中Elastin、LOX mRNA及其蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),POP组患者子宫主韧带中Elastin与LOX mRNA及蛋白表达水平呈明显的正相关(P<0.05)。结论POP患者子宫主韧带Elastin表达减弱影响弹性纤维形成,同时LOX表达减弱可通过影响胶原与弹性纤维的交联亦使盆腔支持结构稳定性降低,进而参与POP的发生。 展开更多
关键词 盆底器官膨出 弹性蛋白 蛋白赖氨酸6-氧化酶
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Elastin基因在小鼠早期妊娠过程中的表达
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作者 王悦 王一妹 +3 位作者 王胜轩 郭加璇 李世杰 马兴红 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期129-133,共5页
弹性蛋白(Elastin)是一种关键的细胞外基质蛋白,对大动脉、肺、韧带、肌腱、皮肤和弹性软骨等许多脊椎动物组织的弹性和复原力至关重要。本实验旨在利用原位杂交、荧光定量PCR方法,研究Elastin mRNA在小鼠早期妊娠、假孕及人工诱导蜕膜... 弹性蛋白(Elastin)是一种关键的细胞外基质蛋白,对大动脉、肺、韧带、肌腱、皮肤和弹性软骨等许多脊椎动物组织的弹性和复原力至关重要。本实验旨在利用原位杂交、荧光定量PCR方法,研究Elastin mRNA在小鼠早期妊娠、假孕及人工诱导蜕膜化模型子宫中的表达。结果显示:在小鼠早期妊娠1~4d子宫中未检测到ElastinmRNA表达;随着妊娠进行,在妊娠第5天子宫肌层检测到ElastinmRNA微弱表达;在妊娠第6天的子宫壁肌层与第7、8天的肌层及蜕膜区Elastin mRNA表达逐渐增强。在小鼠假孕1~5 d子宫中,ElastinmRNA不表达。在人工诱导蜕膜化模型中,ElastinmRNA在子宫壁肌层及系膜侧蜕膜区均有表达。以上表明Elastin可能参与小鼠早期妊娠子宫壁肌层弹性的调控与蜕膜化过程。 展开更多
关键词 elastin 蜕膜化 小鼠 子宫
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Inhibition of elastin and collagen networks degradation in human skin by gingival fibroblast. In vitro, ex vivo and in vivo studies. 被引量:1
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作者 Bruno Gogly Francois Come Ferré +2 位作者 Hafida Cherifi Adrien Naveau Benjamin Philippe Fournier 《Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications》 2011年第1期4-14,共11页
Skin aging shows an imbalance between synthesis and degradation of the extracellular matrix. The overproduction of degradative enzymes (MMPs) during the chronology- and photo-induced aging leads to a degradation of th... Skin aging shows an imbalance between synthesis and degradation of the extracellular matrix. The overproduction of degradative enzymes (MMPs) during the chronology- and photo-induced aging leads to a degradation of the elastic and collagen networks. In a model of collagen and elastin destruction, we showed that the gingival fibroblast was able to preserve these macromolecules by inhibiting the overproduction of metalloproteinases by overproduction of TIMP-1 and modulation of the inflammatory cytokines activity. The objective of this study is to evaluate the effect of the gingival fibroblasts on human skin. The results in vitro and ex vivo show that the gingival fibroblast protects the skin collagen and elastic network by the inhibition of MMPs which leads to an overproduction of the TIMP-1. Moreover, the gingival fibroblast modulates the activity of some enzymes responsible for the inflammation;they inhibit the IL-1β and stimulate the production of TGF-β1. In vivo studies with a duration of six months and 50 women with pronounced wrinkles show that the culture supernatant of gingival fibroblasts diluted to 5% leads to a statistically significant decrease in the number and length of wrinkles. 展开更多
关键词 elastin COLLAGEN SKIN Matrix METALLOPROTEINASES GINGIVAL FIBROBLAST
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Elastin、LRP-1、VIP在盆腔脏器脱垂患者中的表达及检测价值 被引量:1
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作者 吴明秀 李秋萍 刘巍 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第6期983-986,991,共5页
目的探讨弹性蛋白(Elastin)、低密度脂蛋白相关受体-1(LRP-1)、血管活性肠肽(VIP)在盆腔脏器脱垂(POP)患者中的表达意义。方法选取南方医科大学附属东莞医院妇产科POP患者80例作为观察组,另选取同期因妇科良性病变而行子宫和双附件切除... 目的探讨弹性蛋白(Elastin)、低密度脂蛋白相关受体-1(LRP-1)、血管活性肠肽(VIP)在盆腔脏器脱垂(POP)患者中的表达意义。方法选取南方医科大学附属东莞医院妇产科POP患者80例作为观察组,另选取同期因妇科良性病变而行子宫和双附件切除且无POP患者40例作为对照组。对比两组、不同盆腔器官脱垂定量分期法(POP-Q)分级患者阴道前壁组织中Elastin、LRP-1、VIP蛋白、胶原纤维、弹性纤维表达情况,评价Elastin、LRP-1、VIP蛋白与胶原纤维、弹性纤维、POP-Q分级相关性。结果观察组阴道前壁组织中Elastin、LRP-1、VIP蛋白表达强度、表达量低于对照组,差异有统计学意义(u=6.574、3.421、6.784,t=15.879、6.767、15.955,P均<0.05);观察组中胶原纤维、弹性纤维表达少于对照组,POP-Q分级4级患者Elastin、LRP-1、VIP蛋白表达强度、表达量低于3级患者,差异有统计学意义(P<0.05);Elastin、LRP-1、VIP蛋白与胶原纤维、弹性纤维呈正相关,与POP-Q分级呈负相关(P<0.05)。结论Elastin、LRP-1、VIP在POP患者阴道前壁组织中呈明显低表达,与胶原纤维、弹性纤维、病情程度显著相关,增强其活性可能是防治POP的潜在疗法。 展开更多
关键词 盆腔脏器脱垂 弹性蛋白 低密度脂蛋白相关受体-1 血管活性肠肽 盆腔器官脱垂定量分期法分级
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新疆维吾尔族、汉族女性盆底器官脱垂患者Elastin蛋白表达的种族差异研究
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作者 李晓楠 古丽娜.阿巴拜克力 +1 位作者 何艳 艾比布汗.阿布来孜 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第2期206-209,213,共5页
目的研究维吾尔族、汉族女性盆底器官脱垂(POP)患者阴道前壁结缔组织中弹性蛋白(Elastin)的表达及盆底支持组织结构和代谢的变化在POP发生、发展中的作用。方法选择新疆医科大学第一附属医院妇科收治的诊断为POP、资料完整的POP患者118... 目的研究维吾尔族、汉族女性盆底器官脱垂(POP)患者阴道前壁结缔组织中弹性蛋白(Elastin)的表达及盆底支持组织结构和代谢的变化在POP发生、发展中的作用。方法选择新疆医科大学第一附属医院妇科收治的诊断为POP、资料完整的POP患者118例(试验组),因子宫良性病变行全子宫切除术患者82例(对照组)。采用免疫组织化学方法,测定各组阴道前壁组织中Elastin在蛋白水平的表达。并采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Elastin在基因水平的表达情况。结果 Elastin蛋白及Elastin mRNA在各组阴道前壁组织中均有表达,在试验组的表达量均明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),维吾尔族、汉族试验组之间及维吾尔族、汉族对照组之间Elastin蛋白及Elastin mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Elastin蛋白对盆底各器官具有支持作用,其在盆腔器官脱垂疾病的发生、发展中发挥重要作用。Elastin蛋白的表达无明显的维、汉种族差异性,此研究结果可为盆底功能障碍性疾病的研究提供一定的支持和帮助。 展开更多
关键词 盆底功能障碍性疾病 盆底器官脱垂 弹性纤维 弹性蛋白
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Spatial distribution and network morphology of epicardial,endocardial,interstitial,and Purkinje cell-associated elastin fibers in porcine left ventricle
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作者 Xiaodan Shi Song Zhang +13 位作者 Yue Liu Bryn Brazile Jim Cooley J.Ryan Butler Sara R.McMahan Karla L.Perez Jiazhu Xu Timothy Eastep Kytai T.Nguyen Pietro Bajona Matthias Peltz Huajian Gao Yi Hong Jun Liao 《Bioactive Materials》 SCIE CSCD 2023年第1期348-359,共12页
Cardiac extracellular matrices(ECM)play crucial functional roles in cardiac biomechanics.Previous studies have mainly focused on collagen,the major structural ECM in heart wall.The role of elastin in cardiac mechanics... Cardiac extracellular matrices(ECM)play crucial functional roles in cardiac biomechanics.Previous studies have mainly focused on collagen,the major structural ECM in heart wall.The role of elastin in cardiac mechanics,however,is poorly understood.In this study,we investigated the spatial distribution and microstructural morphologies of cardiac elastin in porcine left ventricles.We demonstrated that the epicardial elastin network had location-and depth-dependency,and the overall epicardial elastin fiber mapping showed certain correlation with the helical heart muscle fiber architecture.When compared to the epicardial layer,the endocardial layer was thicker and has a higher elastin-collagen ratio and a denser elastin fiber network;moreover,the endocardial elastin fibers were finer and more wavy than the epicardial elastin fibers,all suggesting various interface mechanics.The myocardial interstitial elastin fibers co-exist with the perimysial collagen to bind the cardiomyocyte bundles;some of the interstitial elastin fibers showed a locally aligned,hinge-like structure to connect the adjacent cardiomyocyte bundles.This collagen-elastin combination reflects an optimal design in which the collagen provides mechanical strength and elastin fibers facilitate recoiling during systole.Moreover,cardiac elastin fibers,along with collagen network,closely associated with the Purkinje cells,indicating that this ECM association could be essential in organizing cardiac Purkinje cells into“fibrous”and“branching”morphologies and serving as a protective feature when Purkinje fibers experience large deformations in vivo.In short,our observations provide a structural basis for future in-depth biomechanical investigations and biomimicking of this long-overlooked cardiac ECM component. 展开更多
关键词 Heart ECM Epicardial elastin Endocardial elastin Interstitial elastin Purkinje-cell associated elastin
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MMP-12、Timp-1、Elastin在女性压力性尿失禁 患者阴道壁组织中的表达 被引量:3
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作者 张晓丹 李晓果 +2 位作者 许雅娟 张彩霞 王鲁文 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第4期596-599,共4页
目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-12)、基质金属蛋白酶抑制剂(Timp-1)、弹性蛋白(Elastin)在女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁中的表达及三者与SUI发病的关系。方法:研究组(SUI组)为30例有完整随访资料的女性SUI患者阴道壁结缔组织标本,盆... 目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-12)、基质金属蛋白酶抑制剂(Timp-1)、弹性蛋白(Elastin)在女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁中的表达及三者与SUI发病的关系。方法:研究组(SUI组)为30例有完整随访资料的女性SUI患者阴道壁结缔组织标本,盆底器官脱垂组(POP组)为30例有完整随访资料的女性盆底器官脱垂(POP)患者的阴道壁结缔组织标本,对照组为30例无SUI和POP的妇女,3组标本分别行免疫组化染色,了解MMP-12、Timp-1、Elastin三者的表达情况,同时采用PCR方法测定各组阴道壁组织中Elastin mRNA的表达。结果:SUI组患者MMP-12的表达较对照组显著升高,两组之间差异有统计学意义(P<0.05),Timp-1及Elastin的表达较对照组显著下降,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。而MMP-12、Timp-1、Elastin的表达在SUI与POP组之间的差异无统计学意义,免疫组化检测Elastin表达结果和PCR检测结果相吻合,呈现一致的变化趋势。结论:MMP-12高表达,Timp-1作为MMP-12的抑制剂,Timp-1的低表达,使Elastin的降解增加,从而使弹性纤维减少,导致盆底组织的弹性降低。 展开更多
关键词 压力性尿失禁 MMP-12 TIMP-1 elastin
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一款紧致化妆品的功效评价方法研究 被引量:1
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作者 马月滢 刘琦 +3 位作者 加萌 王俊杰 王玮 赵华 《日用化学工业(中英文)》 北大核心 2024年第1期73-79,共7页
通过对以棕榈酰五肽-4为主要功能成分化妆品的功效进行评价,研究建立人体紧致功效评价方法体系。筛选31名20~50岁女性受试者,分别在使用产品0周、4周和8周,通过客观测试数据、图像方法及受试者自我评估方法对皮肤各项指标进行评估,采集... 通过对以棕榈酰五肽-4为主要功能成分化妆品的功效进行评价,研究建立人体紧致功效评价方法体系。筛选31名20~50岁女性受试者,分别在使用产品0周、4周和8周,通过客观测试数据、图像方法及受试者自我评估方法对皮肤各项指标进行评估,采集受试者脸颊、眼角部位的皮肤弹性、皮肤真皮密度等参数,以及TPEF图像及SHG图像,并进行比较分析。结果显示,8周后皮肤弹性、真皮密度(P<0.001)及真-表皮链接指数(DEJI)(P<0.01)有显著变化,与受试者自我评分结果一致,表明方法之间具有相关性。该研究方法可为建立化妆品紧致功效评价方法体系提供技术支持。 展开更多
关键词 弹性 紧致度 双光子成像技术 超声 化妆品功效评价 弹性纤维 胶原纤维
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弹性蛋白对前交叉韧带力学响应影响的弹性蛋白酶定量分析
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作者 张闻天 邓羽平 +8 位作者 刘晓云 李彩娟 王勉 梁泽宇 熊亮 黄刚 陈广新 李子涛 黄文华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第22期3451-3456,共6页
背景:前交叉韧带在复杂的生理加载环境下具有其独特的非线性力学特性。弹性蛋白作为前交叉韧带力学特性的重要贡献者,其在轴向拉伸下对前交叉韧带力学响应特性尚不明确。目的:定量分析弹性蛋白对前交叉韧带拉伸力学响应的影响。方法:制... 背景:前交叉韧带在复杂的生理加载环境下具有其独特的非线性力学特性。弹性蛋白作为前交叉韧带力学特性的重要贡献者,其在轴向拉伸下对前交叉韧带力学响应特性尚不明确。目的:定量分析弹性蛋白对前交叉韧带拉伸力学响应的影响。方法:制备弹性蛋白酶溶液及对照缓冲液。将猪前交叉韧带样品制备成小规格样品,随机分别浸泡于0,0.1,1.0,2.0,5.0,10.0 U/mL的弹性蛋白酶溶液中6 h,另取相同规格小样品分别浸泡于2 U/mL的弹性蛋白酶溶液中0,1,3,6,9,12 h,以确定适合弹性蛋白靶向酶的浸泡条件并进行消化效果验证,使用组织学染色比较酶处理对组织结构与成分的影响。将韧带样品随机分为酶处理组和PBS组,分别浸泡在2 U/mL弹性蛋白酶溶液和PBS中6 h,于浸泡前、后均进行力学拉伸测试。结果与结论:①生化结果表明,2 U/mL弹性蛋白酶溶液浸泡6 h能将弹性蛋白含量降低31.1%,且没有显著影响组织内其他力学相关成分;②组织学结果显示,弹性蛋白酶可渗透入组织内部,浸泡后的组织松散程度增加;③在浸泡前、后的力学结果中,PBS组的多项力学性能均显著下降,酶处理组仅有低张弹性模量显著升高及初长度显著增加;④组间比较结果显示,浸泡前PBS组与酶处理组差异均无显著意义,而浸泡后的酶处理组的低张弹性模量、初始斜率、饱和斜率和初长度比PBS组显著增加;⑤以上结果表明,弹性蛋白降解显著影响了前交叉韧带的生物力学属性,进一步补充了对前交叉韧带结构-功能关系之间的理解。 展开更多
关键词 前交叉韧带 生物力学 弹性蛋白 EVG染色 准静态拉伸 黏弹性
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大肠杆菌表达高性能融合鱿鱼环齿-类弹性蛋白的发酵优化
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作者 姜正日 殷仁凯 +1 位作者 王泽建 钱江潮 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期71-79,共9页
为了实现重组蛋白SRT-ELP36在大肠杆菌中的高效表达,利用携带重组蛋白SRTELP36基因的pET-25b(+)表达载体,分别在摇瓶和5 L发酵罐上进行了发酵条件优化,并在50 L发酵罐中进行放大验证。经转化表达质粒后,宿主菌BL21(DE3)的菌体生长和蛋... 为了实现重组蛋白SRT-ELP36在大肠杆菌中的高效表达,利用携带重组蛋白SRTELP36基因的pET-25b(+)表达载体,分别在摇瓶和5 L发酵罐上进行了发酵条件优化,并在50 L发酵罐中进行放大验证。经转化表达质粒后,宿主菌BL21(DE3)的菌体生长和蛋白体积产量均高于BLR(DE3),可用于蛋白SRT-ELP36表达。摇瓶发酵条件优化结果表明,TB(Terrific Broth)培养基、装液比(装液量与摇瓶体积之比)为5%、诱导温度为37℃、对数生长结束期添加0.5 mmol/L的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导剂,菌体最高OD_(600)(波长600 nm处的吸光值)达到22.3,最高蛋白体积产量达0.60 g/L。在5 L发酵罐中进行补料分批培养条件优化,在OD_(600)为35时添加终浓度为0.5 mmol/L的IPTG启动诱导,并控制过程菌体氧消耗速率(OUR)为(180±5) mmol/(L·h),菌体的最高OD_(600)和蛋白体积产量分别达到了88、1.85 g/L,单位菌体蛋白产量为70 mg/g。在50 L发酵罐中,参照5 L工艺控制条件进行发酵过程放大,菌体最高OD_(600)达到103,重组蛋白SRT-ELP36的体积产量和单位菌体产量进一步提高到了2.22 g/L和90 mg/g,是目前文献报道SRT蛋白表达的最高水平,为高性能融合鱿鱼环齿-类弹性蛋白的工业化生产提供了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 鱿鱼环齿蛋白 类弹性蛋白 力学性能 发酵优化
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ELP-SOD融合蛋白的纯化及其脂质体制备
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作者 朱月蓉 陈星宇 +2 位作者 冯娇燕 周奔 樊燕蓉 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期44-51,66,共9页
目的:通过重组E.coli细胞表达类弹性蛋白多肽超氧化物歧化酶(elastin-like polypeptides-superoxide dismutase,ELP-SOD)融合蛋白,利用ELP蛋白有温度敏感的相变特性,经过三轮可逆相变循环(ITC)获得高活性的纯化ELP-SOD酶。结合脂质体包... 目的:通过重组E.coli细胞表达类弹性蛋白多肽超氧化物歧化酶(elastin-like polypeptides-superoxide dismutase,ELP-SOD)融合蛋白,利用ELP蛋白有温度敏感的相变特性,经过三轮可逆相变循环(ITC)获得高活性的纯化ELP-SOD酶。结合脂质体包裹技术制备具有较长半衰期和酶活性的ELP-SOD脂质体,为重组人源SOD在医疗、保健、化妆品等领域的应用奠定基础。方法:利用SDS-PAGE及Tanon3500凝胶成像系统、Image studio软件对ELP-SOD进行纯度检测;采用改良的邻苯三酚自氧化法(325 nm法)测定SOD融合蛋白的酶活性;调节不同的pH值及温度梯度测定融合蛋白的pH稳定性及热稳定性;添加Cu^(2+)/Zn^(2+)提高ELP-SOD酶活性;以大鼠血浆进行模拟体内半衰期实验;用不同浓度ELP-SOD的培养基分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和小鼠成纤维细胞(L929细胞)孵育来验证细胞毒性;薄膜水化法制备ELP-SOD脂质体并测定其包封率;制备小鼠离体皮肤,采用TP-6透皮扩散仪进行体外释放实验,用Franz扩散池考察ELP-SOD脂质体运载ELP-SOD的透皮效率。结果:ELP-SOD融合蛋白的最高表达量为10 mg/L,纯度为97.8%,酶比活为4894.5 U/mg;其在pH 5.0~8.0、温度低于60℃时稳定性较高;ELP的接入对于SOD的半衰期有一定的延长作用,且有较好的生物安全性;ELP-SOD脂质体的包封率达到80%以上,能够进一步延长ELP-SOD的半衰期,且其透皮效率明显高于ELP-SOD。结论:通过可逆热相变性技术简化了ELP-SOD融合蛋白纯化步骤,并结合脂质体制备技术,延长了酶蛋白生物半衰期,提高了生物利用度。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 类弹性蛋白多肽 可逆相变循环 脂质体
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elastin基因exon20、24、25的变异与盆底功能障碍性疾病的研究 被引量:2
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作者 贾丽 石彬 +1 位作者 曹霁雯 江静 《中国医师杂志》 CAS 2011年第11期1459-1463,共5页
目的检测elastin基因exon20、24、25在盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfounction,PFD)女性患者中的突变情况,探讨基因变异与PFD疾病的关系。方法选择本院妇科因PFD住院手术的病人30例为实验组(A组),同期非PFD患者20例为对... 目的检测elastin基因exon20、24、25在盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfounction,PFD)女性患者中的突变情况,探讨基因变异与PFD疾病的关系。方法选择本院妇科因PFD住院手术的病人30例为实验组(A组),同期非PFD患者20例为对照组(B组);实验组患者按照美国盆腔器官脱垂定量分期法(pelvic organ prolaps quantitation,POP—Q)评分分为轻、重度(A1、A2)两组,均于术前采集静脉血,应用PCR、DNA直接测序法获得elastin基因exon20、24、25的序列,并与NCBIGENEBANK中标准序列比对,观察基因变异情况。结果(1)exon20检测到杂合错义点突变(c.114G|A),编码蛋白由甘氨酸变为丝氨酸,A2组与B组、A1组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。(2)exon24检测到杂合错义点突变(c.81C|G),编码蛋白由脯氨酸变为丙氨酸。各组之间比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。(3)exon25A各组患者均未发现基因突变。(4)20—21内含子检测到杂交突变(c.17T|c),A2组与B组、A1组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。(5)24—25内含子检测到杂交突变(C.69A|T),各组之间比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论PFD患者检测到elastin基因exon20、exon24的变异,以elastin基因exon20变异为主,其变异使编码蛋白发生改变,PFD患者发病可能与的elastin基因突变有关。 展开更多
关键词 弹性蛋白/遗传学 外显子 变异(遗传学) 骨盆底/病理生理学
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Effect of kappa elastin on melanogenesis in A375 human melanoma cells and its related mechanism 被引量:1
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作者 TIAN Shan HE Pei-ying ZHANG Jian-zhong CHEN Zhou 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2012年第22期4088-4092,共5页
Background Elastin derived peptides can regulate melanocyte precursor development. Ultraviolet irradiation, infrared radiation and heat can increase the synthesis of tropoelastin in human skin epidermis. The aim of th... Background Elastin derived peptides can regulate melanocyte precursor development. Ultraviolet irradiation, infrared radiation and heat can increase the synthesis of tropoelastin in human skin epidermis. The aim of this study was to investigate whether the over expressed tropoelastin in epidermis has some role in melanogenesis of melanocytes. Methods A375 human melanoma cells were treated with different concentrations of kappa elastin for 24 hours. A375 human melanoma cells were randomly assigned to control, kappa elastin, and lactose pre-incubated groups. The cell viabilities were detected by the methyl thiazoleterazolium assay. Melanin content and tyrosinase activity in A375 melanoma cells were measured. The expressions of endothelin B receptor (ETBR) mRNA and c-kit mRNA in A375 melanoma cells were measured by quantative reverse transcription polymerase chain reaction. Results Fifty pg/ml of kappa elastin significantly increased the melanin content by 56.64% compared with the control (P 〈0.05). Kappa elastin increased cellular tyrosinase activity by 46.73% compared with the control at 24 hours (P 〈0.05). Kappa elastin increased the expressions of ETBR and c-kit mRNA levels by 2.13-fold and 2.47-fold compared with the controls, respectively. When pre-incubating cells with a lactose solution (10 mmol/L), the inhibition on melanin production was 34.96% compared with the kappa elastin group (P 〈0.05), tyrosinase activity was inhibited by 29.93% compared with kappa elastin group (P 〈0.05), and the expressions of ETBR mRNA and c-kit mRNA were decreased by 1.56-fold and 0.82-fold compared with kappa elastin group, respectively. Conclusion Kappa elastin increased the melanogenesis in A375 melanoma cells via the stimulation of tyrosinase activity and the expression of ETBR and c-kit. The over expressed tropoelastin produced by keratinocytes might play a role in melanogenesis of epidermal melanocytes. 展开更多
关键词 kappa elastin MELANIN tyrosinase activity endothelin B receptor C-KIT
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RANTES和elastin在肝细胞癌中的表达及意义
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作者 向志钢 杨竹林 +2 位作者 林丽 刘云贵 李继红 《中华全科医学》 2011年第4期515-516,F0003,共3页
目的研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中趋化因子受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated-upon activation normal T expressed and secreted,RANTES)和弹性蛋白(elastin)的表达水平,并探讨其临床病理意义。方法选... 目的研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中趋化因子受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated-upon activation normal T expressed and secreted,RANTES)和弹性蛋白(elastin)的表达水平,并探讨其临床病理意义。方法选择42例手术切除的HCC癌组织和癌旁组织标本,常规石蜡包埋切片后ABC免疫组化法检测RAN-TES和elastin的表达情况。结果 42例HCC癌组织中RANTES和elastin的表达阳性率和表达评分均显著高于癌旁组织:RANTES5,4.8%vs 19.0%(P<0.01)1,.88±1.78 vs 0.69±1.28(P<0.01);elastin,45.2%vs 19.0%(P<0.05),1.64±1.85 vs 0.66±1.28(P<0.01);RANTES和elastin的表达情况与HCC的主要临床病理特征无明显关系;相关性分析显示HCC癌组织中RANTES和elastin的表达评分呈正相关(r=0.445,P<0.05)。结论 RANTES和elastin的表达与HCC的发生、发展可能关系密切;elastin与趋化因子RANTES密切相关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 趋化因子 弹性蛋白 免疫组织化学
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Fibulin-3、TIMP-3和elastin在压力性尿失禁患者阴道壁组织中的表达 被引量:1
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作者 李晓果 张晓丹 +1 位作者 许雅娟 王鲁文 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第1期109-111,共3页
目的:检测女性压力性尿失禁患者阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin的表达,探讨其与压力性尿失禁(SUI)的关系。方法:选取30例女性SUI患者作为研究组(SUI组),选择同期30例盆底器官脱垂患者(POP组)、30例妇科良性疾病患者作为对照组... 目的:检测女性压力性尿失禁患者阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin的表达,探讨其与压力性尿失禁(SUI)的关系。方法:选取30例女性SUI患者作为研究组(SUI组),选择同期30例盆底器官脱垂患者(POP组)、30例妇科良性疾病患者作为对照组,采用免疫组织化学法(SP二步法)检测阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin的表达。结果:Fibulin-3、TIMP-3和elastin在SUI组和POP组患者中的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Fibulin-3、TIMP-3和elastin在SUI组和POP组患者中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。SUI组Fibulin-3与TIMP-3的表达呈正相关,Fibulin-3和elastin的表达无明显的相关性。结论:Fibulin-3表达降低,TIMP-3活性降低,盆底支持组织胶原和elastin降解增加,组织弹性降低,盆底结构松弛,可能与压力性尿失禁的发生有关。 展开更多
关键词 压力性尿失禁 Fibulin-3 基质金属蛋白酶抑制剂-3 弹性蛋白
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非洲猪瘟病毒无标签p35蛋白的制备及间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 吴植 卢会鹏 +4 位作者 王安平 谢军 曹世诺 徐艳 朱善元 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期1209-1216,共8页
为了进一步提高非洲猪瘟病毒(ASFV)间接酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测方法的特异性,本研究构建了类弹性蛋白(ELP)标签与ASFV p35融合表达载体,利用相变循环分离纯化融合蛋白后,用烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVP)切除ELP标签,制备获得无标签... 为了进一步提高非洲猪瘟病毒(ASFV)间接酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测方法的特异性,本研究构建了类弹性蛋白(ELP)标签与ASFV p35融合表达载体,利用相变循环分离纯化融合蛋白后,用烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVP)切除ELP标签,制备获得无标签p35蛋白,以此为包被抗原,通过一系列的条件摸索和优化,建立ASFV间接ELISA抗体检测方法。结果显示,ELP-p35融合蛋白的相对分子质量大小约为80000;制备获得的无标签p35蛋白能够被非洲猪瘟阳性血清所识别;抗原包被最佳质量浓度为2.00μg/ml,待检血清最佳稀释比例为1∶200,二抗最佳稀释比例为1∶10000,阴性和阳性判定阈值OD450为0.171;与口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和伪狂犬病毒(PRV)等阳性血清无交叉反应,特异性好;批内、批间试验结果显示变异系数都小于5.000%,重复性好;可检测400倍稀释的血清,敏感性较高;与商品化检测试剂盒(ING)检测结果的符合率高达100%。结果表明,用本研究制备的ASFV无标签p35蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法可用于ASFV抗体的检测,为该病的进一步精准检测提供了技术手段。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 类弹性蛋白 无标签p35蛋白 间接ELISA方法
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温度响应的黄曲霉毒素B_(1)纳米抗体重组表达、复性及生物活性 被引量:2
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作者 张乐平 涂追 +4 位作者 李燕萍 李小江 帅文苑 张航 何庆华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第18期141-148,共8页
将不同长度类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptide,ELP)与纳米抗体融合表达,获得具有温度响应能力的抗黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))纳米抗体。采用递归定向连接克隆得到重组表达载体pET30a-G8-ELP20、pET30a-G8-ELP40、... 将不同长度类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptide,ELP)与纳米抗体融合表达,获得具有温度响应能力的抗黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))纳米抗体。采用递归定向连接克隆得到重组表达载体pET30a-G8-ELP20、pET30a-G8-ELP40、pET30a-G8-ELP60、pET30a-G8-ELP80,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,表达后经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析显示4种融合蛋白均以不溶性包涵体形式存在于菌体沉淀中,对其进行变性处理后,分别采用稀释复性、可逆相变循环(inverse transition cycling,ITC)纯化、透析复性、柱上复性4种方式对包涵体蛋白进行复性。SDS-PAGE分析4种复性方式分别获得的4种融合蛋白,结果显示其纯度差异不显著,但ITC纯化蛋白得率最高,分别为83%、90.7%、89.5%、88.3%;间接竞争酶联免疫吸附实验测定复性后融合蛋白活性,结果表明由稀释复性法获得的G8-ELP80重组蛋白IC50最低(4.35 ng/mL);浊度分析法测得融合不同长度ELP标签纳米抗体的相变温度分别为45、38、32、28℃;圆二色谱分析显示4种融合蛋白二级结构均以β-折叠、β-转角为主,与预估结果相符。本研究将ELP标签与抗AFB1纳米抗体融合表达,实现了纳米抗体的温度刺激响应性,系统比较了不同复性方式对蛋白特性的影响,为后续AFB1检测分析提供了基础。 展开更多
关键词 纳米抗体 类弹性蛋白 融合表达 可逆相变循环 包涵体复性
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髌腱弹性蛋白降解对其准静态拉伸力学性能的影响 被引量:2
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作者 刘晓云 邓羽平 +7 位作者 李飞飞 赵东良 杨洋 黄涛 谭文长 吴耀彬 黄文华 李严兵 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第18期2831-2836,共6页
背景:髌腱是维持膝关节稳定的重要结构,在拉伸作用下表现出特有的非线性力学特性,但是弹性蛋白在拉伸载荷下对髌腱力学行为的影响尚不清楚。目的:通过弹性蛋白的靶向酶处理,研究弹性蛋白对髌腱力学性能的影响。方法:(1)将30个40-50 mg... 背景:髌腱是维持膝关节稳定的重要结构,在拉伸作用下表现出特有的非线性力学特性,但是弹性蛋白在拉伸载荷下对髌腱力学行为的影响尚不清楚。目的:通过弹性蛋白的靶向酶处理,研究弹性蛋白对髌腱力学性能的影响。方法:(1)将30个40-50 mg新鲜猪髌腱平均分配到5种不同弹性蛋白酶浓度(0,1,5,10,20 U/m L)中孵育以及在5个不同的时间(0,1,4,6,12h)的弹性蛋白酶溶液中孵育,最后检测弹性蛋白含量。(2)将髌腱分别在PBS溶液、5 U/m L弹性蛋白酶溶液中处理8h,进行Verhoeff VanGieson(VVG)染色和Masson染色。(3)将20个新鲜猪髌腱随机分为PBS对照组和弹性蛋白酶处理组(弹性蛋白酶组),在试样表面标记9个点后进行纵向拉伸及应力松弛实验,使用光学非接触法计算标记点的位移用于后续应变分析并计算应力;然后将试样分别在PBS溶液、5 U/m L弹性蛋白酶溶液中孵育8 h,再次进行同样的力学测试。结果与结论:(1)在5 U/m L弹性蛋白酶溶液中孵育8 h可以满足此次实验要求;(2)与处理前相比,PBS组和酶处理组的组织拉伸应力显著降低,均降低约40%(P<0.001,P<0.01);与处理前相比,处理后的松弛百分比显著增加,前后相差约12%(P<0.05);在归一化的平均应力-时间曲线上,酶处理组比PBS组应力降低更大,两者相差约16%(P<0.0001);(3)以上结果表明,弹性蛋白在髌腱的拉伸力学特性及黏弹性特性中起到重要作用,进一步补充了对多尺度肌腱结构-功能关系的理解,这有利于未来对微观结构本构模型的发展和改进,以模拟髌腱病变及手术干预。 展开更多
关键词 髌腱 生物力学 应力松弛 弹性蛋白 准静态拉伸 弹性蛋白酶 黏弹性 酶处理
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弹性蛋白肽的制备工艺优化及其理化性质分析 被引量:1
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作者 李清岚 刘颖 崔春 《中国调味品》 CAS 北大核心 2023年第6期189-194,220,共7页
采用牛动脉弹性蛋白为原料,以弹性蛋白酶抑制活性和蛋白回收率为评价指标,研究弹性蛋白肽制备工艺和理化性质。结果表明,胰酶在酶添加量1.0%、pH 11、温度45℃和时间15 h的条件下酶解弹性蛋白,弹性蛋白酶抑制活性(蛋白浓度为10 mg/mL)为... 采用牛动脉弹性蛋白为原料,以弹性蛋白酶抑制活性和蛋白回收率为评价指标,研究弹性蛋白肽制备工艺和理化性质。结果表明,胰酶在酶添加量1.0%、pH 11、温度45℃和时间15 h的条件下酶解弹性蛋白,弹性蛋白酶抑制活性(蛋白浓度为10 mg/mL)为35.63%,蛋白回收率可达80.08%;弹性蛋白酶解过程中,部分β-折叠和α-螺旋转化为β-转角,酶解产物小于1000 Da的肽段占45.50%,富含疏水性氨基酸和芳香族氨基酸,具有较强还原力,清除DPPH和ABTS自由基的IC 50值分别为6.90,3.41 mg/mL,且在温度<85℃、pH为中性和碱性的条件下具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 弹性蛋白 胰酶 MMP-12抑制活性 蛋白回收率 理化性质
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