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连接肽对融合蛋白ELP[I]_(30)-linker-eGFP相变的影响 被引量:1
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作者 张立超 李军明 +2 位作者 葛高顺 孔令岭 胡学军 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期401-405,共5页
研究G4S和Poly N连接肽对融合蛋白ELP[I]30-linker-eGFP相变的影响.将编码两种不同连接肽G4S和Poly N的绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)基因克隆到pET28-ELP[I]30表达载体中,在宿主菌E.coli BLR(DE3)中经IPTG诱... 研究G4S和Poly N连接肽对融合蛋白ELP[I]30-linker-eGFP相变的影响.将编码两种不同连接肽G4S和Poly N的绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)基因克隆到pET28-ELP[I]30表达载体中,在宿主菌E.coli BLR(DE3)中经IPTG诱导表达ELP[I]30-linker-eGFP,通过可逆相变循环(inverse transition cycling,ITC)及镍柱亲和层析纯化ELP[I]30-linker-eGFP蛋白.结果显示,成功构建、表达具有活性的两种连接肽的融合蛋白ELP[I]30-linker-eGFP,连接肽G4S使融合蛋白产生不可逆相变,而Poly N不影响融合蛋白可逆相变,该研究对类弹性蛋白标签的应用具有指导意义. 展开更多
关键词 连接肽 融合蛋白 纯化标签 类弹性蛋白 绿色荧光蛋白
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弹性肽在超分子组装中的应用 被引量:1
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作者 侯春喜 李逸佳 +3 位作者 王婷婷 刘盛达 闫腾飞 刘俊秋 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1163-1173,共11页
系统总结了弹性肽(ELPs)的自组装及其组装体的生物应用研究现状,讨论了ELPs的温控相变在构建超分子组装体方面的独特优势,探讨了ELPs纳米结构的序列敏感性,展望了ELPs在超分子组装中的实际应用.
关键词 弹性肽 自组装 纳米结构 温度响应 药物传递
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利用ELP自断裂标签在大肠杆菌中生产抗菌肽Oxysterlin 1 被引量:3
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作者 郭丽 刘化鑫 林瑛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2915-2923,共9页
抗菌肽是目前最有希望的抗生素替代品,但是使用重组技术生产抗菌肽的策略大多步骤烦琐且价格昂贵,不利于抗菌肽的规模化生产。Oxysterlin1是一种新型的天蚕素抗菌肽,主要对革兰氏阴性菌有抗菌活性,具有较低的细胞毒性。文中利用一种简... 抗菌肽是目前最有希望的抗生素替代品,但是使用重组技术生产抗菌肽的策略大多步骤烦琐且价格昂贵,不利于抗菌肽的规模化生产。Oxysterlin1是一种新型的天蚕素抗菌肽,主要对革兰氏阴性菌有抗菌活性,具有较低的细胞毒性。文中利用一种简单经济的方法在大肠杆菌中实现Oxysterlin 1的表达和纯化。将Oxysterlin 1基因克隆到含有弹性蛋白样多肽Elastin-like polypeptide(ELP)和蛋白质内含肽(Intein)的载体中,构建重组表达质粒pET-ELP-I-Oxysterlin1。重组蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式表达,进而通过简单的盐析和pH改变便可对目标小肽进行纯化。最终得到的Oxysterlin 1的产量约为1.2mg/L,抑菌试验显示出预期活性,为抗菌肽的规模化生产及深入研究其抑菌机理奠定基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 elp标签 蛋白质内含肽 抑菌活性
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利用ELP-Intein系统在大肠杆菌中生产抗菌肽DLP4 被引量:1
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作者 姜宇 李秀 林瑛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期2365-2376,共12页
DLP4 (defensin-like peptide 4)是一种新型昆虫防御素抗菌肽,对革兰氏阳性细菌具有强大的抗菌活性而且不易产生抗药性。本研究利用类弹性蛋白(elastin-like polypeptide, ELP)的相变特性和蛋白质内含子(intein, I)的C端断裂系统,通过... DLP4 (defensin-like peptide 4)是一种新型昆虫防御素抗菌肽,对革兰氏阳性细菌具有强大的抗菌活性而且不易产生抗药性。本研究利用类弹性蛋白(elastin-like polypeptide, ELP)的相变特性和蛋白质内含子(intein, I)的C端断裂系统,通过构建重组表达质粒pET-ELP-I-DLP4,以大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主细胞,诱导表达后的重组蛋白通过简单的离心、pH和温度转变进行纯化得到DLP4。研究中发现,在表达纯化过程中蛋白质内含子发生了C端提前断裂。为了解决这一问题,将其断裂为N端片段(I0;)和C端片段(I0;)后,分别与ELP或DLP4融合,构建了pET-ELP-I0;和pET-ELP-I0;-DLP4两种重组表达质粒。分别在大肠杆菌中诱导表达,将表达后的菌液混合,使蛋白质内含子恢复C端断裂活性,最终得到的DLP4的得率约为1.49 mg/L。抑菌试验证明纯化的DLP4表现出预期活性,这为DLP4在原核系统中的表达纯化提供了有效途径。 展开更多
关键词 抗菌肽 elp标签 蛋白质内含子 断裂蛋白质内含子 抑菌活性
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Biomolecular functionalization for enhanced cell–material interactions of poly(methyl methacrylate)surfaces 5th China-Europe Symposium on Biomaterials in Regenerative Medicine(CESB 2015)Hangzhou,China April 7–10,2015 被引量:2
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作者 Xavier Punet Rodolphe Mauchauffe´ +3 位作者 Jose´C.Rodrı´guez-Cabello Matilde Alonso Elisabeth Engel Miguel A.Mateos-Timoneda 《Regenerative Biomaterials》 SCIE 2015年第3期167-175,共9页
The integration of implants or medical devices into the body tissues requires of good cell–material interactions.However,most polymeric materials used for these applications lack on biological cues,which enhanced mid... The integration of implants or medical devices into the body tissues requires of good cell–material interactions.However,most polymeric materials used for these applications lack on biological cues,which enhanced mid-and long-term implant failure due to weak integration with the surrounding tissue.Commonly used strategies for tissue–material integration focus on functionalization of the material surface by means of natural proteins or short peptides.However,the use of these biomolecules involves major drawbacks such as immunogenic problems and oversimplification of the constructs.Here,designed elastin-like recombinamers(ELRs)are used to enhance poly(methyl methacrylate)surface properties and compared against the use of short peptides.In this study,cell response has been analysed for different functionalization conditions in the presence and absence of a competing protein,which interferes on surface–cell interaction by unspecific adsorption on the interface.The study has shown that ELRs can induce higher rates of cell attachment and stronger cell anchorages than short peptides,being a better choice for surface functionalization. 展开更多
关键词 cell adhesion elastin-like recombinamer poly(methyl methacrylate) PMMA RGD peptide surface modification
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Extracellular Elastin Molecule Modulates Alzheimer’s AβDynamics In Vitro and In Vivo by Affecting Microglial Activities 被引量:3
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作者 Jingjing Li Yao Sun +7 位作者 Yingxia Liang Jun Ma Bo Li Chao Ma Rudolph ETanzi Hongjie Zhang Kai Liu Can Zhang 《CCS Chemistry》 CAS 2021年第7期1830-1837,共8页
Alzheimer’s disease(AD)is a neurodegenerative disorder,and the etiology of AD has not been completely elucidated.It remains unknown how the components from the brain’s extracellular matrix(ECM),particularly fibrous ... Alzheimer’s disease(AD)is a neurodegenerative disorder,and the etiology of AD has not been completely elucidated.It remains unknown how the components from the brain’s extracellular matrix(ECM),particularly fibrous entities,may influence the pathogenesis of AD.Herein,we report that treatment with elastin-like polypeptides(ELPs),a component of the brain ECM,significantly increases the extracellular levels of AD-related amyloid-beta(Aβ)peptides and decreases intracellular Aβlevels in human microglial cell model HMC3 cells(HMC3). 展开更多
关键词 Alzheimer’s disease peptides elastin-like polypeptides MICROGLIA PHAGOCYTOSIS
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