ELISA及ECLIA法在乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测中的应用效果对比

目的观察乙型肝炎(乙肝)病毒感染血清学标志物应用酶联免疫吸附测定(ELISA)及电化学发光免疫分析(ECLIA)法检测的应用效果。方法90例乙型肝炎病毒感染患者,均予以ELISA及ECLIA法检测。对比两种检测方式的诊断准确率及对乙型肝炎病毒血清学标志物[乙型肝炎E抗体(HBeAb)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)]的阳性检出率。结果ECLIA法诊断准确率92.2%高于ELISA法的80.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。ECLIA法对HBeAb、HBsAg、HBeAg的阳性检出率分别为91.1%、91.1%、86.7%,显著高于ELISA法的80.0%、78.9%、66.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。两种检测方式对HBsAb、HBcAb的阳性检出率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ECLIA法对乙型肝炎病毒血清学标志物的阳性检出率均显著高于ELISA法,同时可对病情进行监测,具有更高的临床应用价值。

Highly-sensitive electrochemiluminescence biosensor for detection of inosine monophosphate in meat based on graphdiyne/AuNPs/luminol nanocomposites

Inosine monophosphate(IMP),as a critical umami substance,is one of the most important indicators for evaluating the quality of meat products.Here,a sensitive electrochemiluminescence(ECL)biosensor based on graphdiyne(GDY)/AuNPs/luminol nanocomposites was constructed to detect IMP.The GDY/AuNPs/luminol nanocomposites were synthesized by using simple one-pot method.GDY utilized its 2D framework to disperse and fix gold nanoparticles,which inhibited the agglomeration of gold nanoparticles and greatly improved its stability and catalytic properties.Importantly,GDY/AuNPs/luminol nanocomposites showed excellent catalytic ability and superior ECL activity towards luminol-H_(2)O_(2) systems due to the synergistic effect of GDY and AuNPs.Under optimal conditions,the prepared biosensor exhibited a wide linear range from 0.01 g/L to 20 g/L,a satisfactory limit detection of 0.0013 g/L,as well as an excellent specificity.Moreover,we carried out the precise analysis of IMP in actual meat samples with acceptable results compared to the liquid chromatography.We believe that this work could offer an efficient ECL platform for accurate and reliable report of IMP levels,which is significant for maintaining food quality and safety.

电化学发光在真菌毒素检测中的研究进展

电化学发光是一种由电化学激发的化学发光现象,具有发光背景低、灵敏度高、检测范围宽和可控性好等优势,已在体外诊断领域广泛商业化。受此鼓舞,电化学发光在食品安全和环境监测等领域的研究日益深入,已然是当下的研究热点之一。本文介绍了电化学发光机制和体系组成,总结了电化学发光结合免疫分析、适配体和分子印迹技术在真菌毒素检测中的研究进展,最后,提出并分析了电化学发光技术在食品安全检测中存在的主要问题和挑战。

电致化学发光传感技术的种类及在食品分析中的研究进展

电致化学发光传感技术(Electrochemiluminescence,ECL)是一种结合了电化学和光化学的分析方法,因其可控性强、灵敏度高和响应速度快等优势在食品分析领域引起了广泛关注。ECL是通过改变发射物或共反应物的浓度,使其信号强度发生变化,从而实现对目标物质的灵敏检测。首先,该文总结了经典ECL检测体系及基于新型发射物和共反应物的检测体系,并重点介绍了新型发射物中金属纳米团簇和量子点的最新进展,举例阐述其ECL传感器的结构和检测原理。其次,综述了ECL传感器在食品分析领域中的研究进展。最后对ECL传感技术的未来发展趋势进行了展望,为食品中营养成分和污染物的检测提供参考,同时也促进该技术的进一步研究,助力未来食品检测发展。

电化学发光免疫测定技术对桥本氏甲状腺炎的灵敏性、特异性分析

目的 探讨桥本氏甲状腺炎(HT)患者应用电化学发光免疫测定技术(ECLIA)的灵敏性、特异性。方法 选取2020年8月至2022年8月在河南新乡医学院第二附属医院检查的疑似HT患者共计68例,所有患者均接受ECLIA、放射免疫法(RIA)测定,以症状、病理检查及随访结果作为金标准,比较不同测定技术的测定结果、阳性率、诊断价值及测定时间。结果 ECLIA测定游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA测定FT3、FT4、TSH、TPOAb、TgAb、TRAb阳性率较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性、曲线下面积(AUC)分别为95.83%、95.00%、97.87%、90.48%、95.59%、0.861,RIA分别为79.17%、60.00%、82.61%、54.54%、73.53%、0.753,ECLIA较RIA更高,差异具有统计学意义(P <0.05);ECLIA平均测定时间时间较RIA更短,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 ECLIA用于HT患者灵敏性、特异性均较高,且可缩短测定时间。

即时检测仪器与电化学发光仪检测心脏标志物的对比研究

目的:对比分析两种即时检测(POCT)仪器与Roche电化学发光仪检测心脏标志物的相关关系,为临床检验选择POCT仪器提供参考。方法:选取2020年11月在中国中医科学院西苑医院就诊的20例患者血液样本,其浓度范围覆盖检测结果可报告范围,使用两种POCT仪器(分别命名为仪器A和仪器B)检测血浆肌红蛋白(Myo)、肌酸激酶同工酶质量(CKMB mass)、心肌钙蛋白I(cTnI)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)/B型钠尿肽(BNP)的浓度水平,以电化学分析仪检测结果为参考,分别采用pearson相关分析和Kappa检验评价两种POCT仪器与Roche电化学发光仪检测结果的相关性和一致性。结果:仪器A和仪器B检测结果与Roche电化学发光仪检测Myo、CK-MB mass、cTnI、NT-proBNP/BNP结果均有较好的相关性(r_(仪器A)=O.994、0.989、0.917、0.996,r_(仪器B)=0.928、0.934、0.883、0.977,P<0.05)。在一致性比较中,仪器A检测Myo、CK-MB mass、cTnI、NT-proBNP与电化学分析仪的符合率分别为90%、100%、70%和100%;仪器B检测结果的符合率分别为90%、95%、70%和100%,两种POCT仪器与Roche电化学发光仪均具有较好的一致性(Kappa_(仪器A)=0.798、1.00、0.429、1.00,Kappa_(仪器B)=0.794、0.886、0.429、1.00)。两种仪器的精密度均<10%。结论:两种POCT仪器均能满足临床检测要求,在检测心脏标志物时与电化学发光仪有较好的相关性。

电化学发光检测儿茶酚开放实验设计及教学反思

为提高学生的综合科研能力,将电化学发光分析仪用于本科生的开放实验教学。以儿茶酚为检测目标,在文献调研和方案优化的基础上,教导学生进行材料的合成与表征、数据获取与分析、结论的提炼与表达。该开放实验有助于培养学生的创新能力以及分析和解决问题的能力。此外,对实验过程中教师和学生暴露出的许多不足进行了反思,为今后开放实验的改进提供了有意义的参考。

电化学发光法和直接化学发光法测定12项肿瘤标志物指标的相关性和一致性评价

目的:评估电化学发光法和直接化学发光法测定12项肿瘤标志物的相关性和一致性。方法:选取2023年3-8月首都医科大学附属北京天坛医院体检血清标本2426例,在12项肿瘤标志物中甲胎蛋白(AFP)446例、癌胚抗原(CEA)284例、糖类抗原72-4(CA72-4)289例、糖类抗原19-9(CA19-9)87例、糖类抗原125(CA125)205例、糖类抗原15-3(CA15-3)216例、总前列腺特异性抗原(TPSA)292例、游离前列腺特异性抗原(FPSA)292例、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)84例、神经元特异性烯醇化酶(NSE)84例、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)84例、胃泌素释放肽前体(PROGrp)63例。分别采用电化学发光法和直接化学发光法对12项肿瘤标志物指标进行检测,分析两种检测方法的相关性与及一致性。结果:Pearson和Spearman相关性分析显示,电化学发光和直接化学发光法检测肿瘤标志物的AFP、CEA、CA72-4、CA19-9、CA125、CA15-3、TPSA、FPSA、Cyfra21-1、NSE、SCC和PROGrp12项指标均具有显著正相关性(r=0.971、0.934、0.945、0.975、0.900、0.948、0.994、0.984、0.982、0.828、0.879、0.922,P<0.05);两种方法检测总符合率分别为98.21%、98.24%、98.27%、98.85%、97.07%、99.54%、99.66%、99.32%、92.86%、92.86%、95.24%和96.83%,除CA15-3和NSE因数据原因无法计算Kappa值外,其余均有一致性(Kappa=0.848、0.728、0.930、0.794、0.485、0.887、0.664、0.540、0.477、0.652,P<0.05)。结论:电化学发光法和直接化学发光法检测肿瘤标志物中AFP、CA72-4、CA19-9、TPSA相关性及一致性较好,CEA、CA125、FPSA、Cyfra21-1、SCC、PROGrp相关性较好,但一致性一般,CA15-3、NSE相关性较好。临床在参考实验室检测结果时应注意检测方法的不同可能存在着结果差异。

ECLIA法与RRA法检测血清促甲状腺激素受体抗体的对比研究

目的探讨ECLIA检测TRAb的可行性和实用性。方法采用德国罗氏全自动电化学发光免疫分析法(ECLIA)与实验室常规检测TRAb的放射受体分析法(RRA)这两种方法同时检测血清促甲状腺激素受体抗体(TRAB)含量,共检测血清样本317份,其中甲状腺功能亢进患者159例,健康者158例。结果 ECLIA检测TRAb数值与RRA有显著差异(P<0.01),但与RRA检测值整体相关(r=0.792,P<0.01)。取各自正常参考值上限后,两种方法诊断符合率为86.0%,分类一致性Kappa值为0.896(P>0.05)。结论 ECLIA检测TRAb在精密度方面良好,且操作简便,检测速度快。

ECLIA与RIA测定人血清甲状腺自身抗体的结果分析

目的:ECLIA与RIA测定人血清甲状腺自身抗体的结果分析。方法:临床诊断甲状腺功能检查及病理金标准确诊35例HT样本,28例GD样本及13例其他内分泌疾病的样本,15例正常对照组。按诊断试验常用指标:对ECLIA与RIA测定TgAb、TpoAb值敏感度、特异度、准确度和似然比等进行分析。结果:①ECLIA测定TgAb、TpoAb的敏感度、特异度均在90%以上显著高于RIA(75%);两种方法分别检测76例样本,经配对资料的χ2检验:ECLIA测定的TgAb与RIA测定TGA,P<0·05;ECLIA测定的TpoAb与RIA测定MCA,P<0·05;两种方法的阳性检出率均存在显著差异。②ECLIA测定TpoAb阳性率显著高于ECLIA测定TgAb阳性率,更显著高于RIA测定TgAb、MCA阳性率。③由两种方法计算准确度TgAb、TpoAb,ECLIA(91·2%,94·5%)高于RIA(78%,78%),两种方法测定TgAb、TpoAb的一致率基本是匹配的。两者间计算TgAb、TpoAb阳性、阴性预测值ECLIA高于RIA。结论:ECLIA特异性、灵敏性、准确度、阳性率显著优于RIA;ECLIA检测TpoAb诊断HT比TgAb更有优势。

电化学发光免疫传感器及其在食品安全检测中的应用

近年来,多种新型的食品安全检测技术逐渐发展起来。其中,电化学发光免疫传感器凭借其简单、快捷、检出限低、特异性强等特点,被应用于检测转基因作物蛋白、抗生素、违规添加剂、生物毒素等多个领域。本文对电化学免疫传感器的发光体系、构建模式及其近几年在食品安全检测中的应用进行综述。

ECLIA定量检测HBsAg及HBeAg与HBV-DNA相关分析

目的 探讨电化学免疫发光法（ECLIA）定量检测HBeAg和HBsAg，并分析与DNA（HBV-DNA）含量之间的相关性，为临床提供诊断治疗依据。方法 筛选乙肝病人标本500份，以荧光定量PCR法检测HBV-DNA（以HBV-DNA〉500copies／ml为阳性），按DNA含量不同分9组，同步以ECUA检测HBeAb、HBeAg、HBsAg。结果 HBeAg的含量（IU／m1）与HBV-DNA的含量（copies／m1）成正相关（r=0．99），在HBV-DNA5×10^2～1×10^6copies／ml时，HBV-DNA的阳性率比HBeAg高（P〈0．05），在HBV-DNA大于1×10^6copies／ml时，HBV-DNA的阳性率与HBeAg相比差异无显著性（P〉0．05）；HBV-DNA在500～1×10^6copies／ml之间，HBeAb有较高的阳性率，并随着HBV-DNA含量增加而逐渐下降。HBsAg的含量COI（cutoffindex）与HBV-DNA含量呈负相关（r=-0．94）。结论 ECLIA的HBeAg定量检查可指示病人的传染性强弱，但尚不是最可靠的指标；HBeAg阴性、HBeAb阳性不是传染性消失的可靠指标；HBsAg的定量检测意义不大。

ECLIA、CMIA、ELISA3种方法测定血清抗CCP抗体在RA诊断中的应用

目的评价电化学发光法(ECLIA)、化学发光法(CMIA)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)3种方法测定血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的差异及在类风湿关节炎(RA)诊断中的作用。方法采用ECLIA、CMIA及ELISA测定45例临床确诊的RA患者、34例非RA患者及24例其他患者(包括HBsAg阳性9例、anti-HCV阳性8例、EB-IgA阳性7例)血清中抗CCP抗体水平。结果 3种方法测定所有标本抗CCP抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但ELISA与ECLIA及CMIA间的一致性均较差(Kappa<0.75),ECLIA与CMIA间一致性良好(Kappa>0.75),ECLIA灵敏度优于CMIA及ELISA,CMIA特异性优于ECLIA及ELISA。HBsAg、anti-HCV、EB-IgA阳性均可造成ELISA结果假阳性,累计阳性率达33.33%。结论在临床标本抗CCP抗体检测中,ECLIA灵敏度最高,CMIA特异性最好,ECLIA、CMIA优于ELISA,具有重要临床应用价值。

ECLIA与IRMA测定促甲状腺激素的对比研究

促甲状腺激素（TSH）是垂体前叶分泌的促进甲状腺代谢的糖蛋白类激素，其水平测定是诊断甲状腺疾病，特别是甲亢、甲低、亚临床甲亢最灵敏的标志物，也是首选的检测指标。也受体内血清中FT3、FT4反馈抑制，是一个典型的负反馈调节系统嘲。本实验采用全自动酶促放大化学发光免疫分析法（ECLIA）和免疫放射分析法（IRMA）测定TSH含量，并对结果进行分析，现报告如下。

基于G-四链体电化学发光生物传感器灵敏检测端粒酶活性

端粒酶活性的分析检测对于癌症诊断、预后治疗等具有重要意义。该研究利用G-四链体(G4) DNA的金属配合物靶向发光探针[Ir(ppy)_(2)(pip)]PF_(6),构建了灵敏检测癌细胞端粒酶活性的电化学发光(ECL)生物传感器。首先将引物DNA组装在电极表面,然后与癌细胞提取的端粒酶共同孵育,具有活性的端粒酶在引物末端生成端粒重复序列从而形成G4结构,随后[Ir(ppy)_(2)(pip)]PF_(6)通过与G4靶向作用结合到延长的序列中。结果表明[Ir(ppy)_(2)(pip)]PF_(6)的ECL信号与端粒酶活性呈现正相关,传感器的电化学发光强度与癌细胞浓度在10-5×10^(5)cell/mL呈现良好的线性关系,检出限(LOD)为3 cell/mL。实验还表明了传感器具有良好的稳定性、适用性、抗干扰性和重现性,最后将该传感器用于测定真实人类血清和尿液样本中的端粒酶活性,得到了满意的结果。

ECLIA和ELISA检测乙肝病毒血清标志物对比探讨

目的探讨电化学发光免疫技术(ECLIA)定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-Markers,HBV-M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测HBV-M的优、缺点及临床意义。方法采用ECLIA法和ELISA法同时测定80例HBV感染者和30例体检健康者HBV-M五项指标(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc),并对两种方法检测结果进行比较。结果两种方法测定HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc结果符合率分别为94.54%、95.45%9、4.54%、80.00%、95.45%。经相关分析:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc均有相关(0.400<r<0.700,P<0.001),且呈中等相关。差异比较:HBsAg、抗-HBs和抗-HBc无统计学意义(P>0.05),HBeAg和抗-HBe有统计学意义(P=0.031和P=0.004)。结论 ECLIA和ELISA检测HBV-M五项指标有较好的符合性。ECLIA自动化程度高、检测范围宽。检测e系统较ELISA敏感。能定量检测,对评估HBV低水平感染及潜伏期感染、乙肝疫苗接种效果以及抗病毒治疗疗效判断具有重要的临床意义。

聚鲁米诺修饰复合电极电化学发光分析法测定豆类样品中钼(Ⅵ)含量

本研究基于Mo(Ⅵ)对鲁米诺电还原发光信号的增敏作用,结合石墨烯与带正电荷的纳米金((+)AuNPs)的电信号放大作用,建立了一种灵敏且准确检测豆类种子中Mo(Ⅵ)含量的电化学发光新方法。采用滴涂法先将Nafion-石墨烯修饰于玻碳电极表面,再通过静电组装及电化学聚合技术依次将(+)AuNPs、鲁米诺修饰于电极表面,从而制得Nafion-石墨烯/(+)AuNPs/聚鲁米诺复合修饰电极。通过循环伏安法与电化学发光技术对复合修饰电极进行了初步表征,并对测定Mo(Ⅵ)的实验条件进行了优化。结果表明,在饱和硼砂缓冲溶液、电位扫描速率100 mV/s、富集时间13 min等优化实验条件下,Mo(Ⅵ)浓度在5.0×10^(−9)~1.0×10^(−6)mol/L范围内与复合修饰电极表面增敏的电还原发光信号呈现良好的线性关系,检出限(3σ)与相对标准偏差分别为2.1×10^(−9)mol/L及2.4%(C=1.0×10^(−7)mol/L,n=11)。应用该方法测定了黄豆与绿豆中Mo(Ⅵ)的含量,回收率在91.42%~108.0%之间。该方法简单、经济,有望应用于其它豆类种子中Mo(Ⅵ)含量的准确检测。

ECLIA和CMIA检测HE4对卵巢癌的诊断价值探讨

目的探讨全自动电化学发光免疫分析法(ECLIA)和化学发光微粒子免疫法(CMIA)检测人血清附睾蛋白4(HE4)对卵巢癌的诊断价值。方法收集39例卵巢癌、63例卵巢良性疾病和50名体检健康者血清。分别采用ECLIA和CMIA法检测血清HE4,评估两种检测方法对卵巢癌的诊断价值。结果两种方法测定的HE4值,呈高度正相关(r=0.997,P<0.01);卵巢癌组HE4水平均显著高于同种方法检测的卵巢良性疾病组和体检健康人群组,差异具有统计学意义(P<0.01);以卵巢良性疾病为对照,ECLIA测定血清HE4用于辅助诊断卵巢癌,ROC曲线下面积为0.813;CMIA测定血清HE4用于辅助诊断卵巢癌,ROC曲线下面积为0.782。两种检测方法均具有较高的特异性和较好的准确性。结论ECLIA和CMIA测定血清HE4结果较为一致,均可作为临床卵巢癌辅助诊断的良好方法。

基于共振能量转移策略的电化学发光免疫传感器及肌红蛋白灵敏检测

基于硫化镉纳米线(CdS NWs)与金纳米粒子(Au NPs)之间的共振能量转移(RET)效应,构建了一种简单、高效的夹心型电化学发光(ECL)免疫传感器,用于肌红蛋白(Myo)的灵敏检测。由于CdS NWs的ECL发射光谱与Au NPs的紫外-可见吸收光谱可产生完美重叠,二者可发生高效的RET,从而猝灭CdS NWs的ECL信号,实现Myo含量的灵敏检测。在优化条件下,测得Myo的线性范围为1.0×10^(-12)~1.0×10^(-7)g/mL,检出限为8.8×10^(-13)g/mL。将该传感器用于人血清样品中Myo含量的测定,检测结果与医院提供的参考值相吻合,相对误差不超过7.5%,具有潜在的实际应用能力。