小麦品种电泳分类鉴定技术的标准化研究

在甘氨酸-乙酸缓冲系统(pH 3.10)下采用9％聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较研究了小麦(Triticumaestivum L.)“烟农15”、“济南13”、“莱州95”和“Marquis”品种的醇溶蛋白图谱误差变化及其有关控制方法。在每个凝胶板上误差呈规律性变化,迁移距离越大,谱带误差越大。同2.05cm谱带相比,9.25cm谱带标准误为0.0332,增大2倍;极差由1.5mm增大到4.5mm。国内3个小麦品种“莱州953”、“济南13”和“烟农15”群体内不存在电泳生物型。“莱州953”由于深色谱带多、分布合理,可作为基本电泳参照品种;“济南13”则由于总带数和特有谱带多,可作辅助参照品种。根据筛选的2.05、3.15、6.05和9.25cm标志带及其实际迁移大小,计算各电泳道谱带的矫正系数和矫正迁移距离。这种移动矫正法能使图谱误差降低约2/3。

油松种子醇溶蛋白提取剂比较

采用乙醇、尿素、2氯乙醇、2巯基乙醇等配成的不同浓度和成分的提取剂提取了山西太岳龙门口、陕西洛南、辽宁千山和河北雾灵山4个不同油松种群的种子醇溶蛋白;用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(APAGE)对蛋白提取液进行分析.条带数目反映所提取醇溶蛋白的数量,谱带颜色深浅反映不同提取剂得到的某种醇溶蛋白的量.结果表明,不同提取剂提取的醇溶蛋白图谱存在明显差异.由1%2巯基乙醇和12%尿素组成的复合提取剂提取效果最佳,其次是由20%2氯乙醇、1%2巯基乙醇和12%尿素组成的复合提取剂.提取的醇溶蛋白的电泳图谱可以用于油松种群的遗传多样性分析和系统演化的研究.

麦醇溶蛋白A-PAGE方法的优化和改进

以大麦、小麦品种等为材料 ,在 ISTA的标准电泳程序基础上分别进行浓度为 10 % ,12 % ,14% ,16 % ,18%和 2 0 %的酸性聚丙烯酰胺 ( A- PAGE)均一胶电泳来分离种子的麦醇溶蛋白 ,并与 10 %～ 2 0 %的线性梯度A- PAGE分离效果进行比较 .经优化和改进 ,结果表明 :18%的 A- PAGE方法效果最佳 ,既具有 ISTA推荐的A- PAGE方法制胶简便、电泳快速、重复性好的优点 ,又具有线性梯度 A- PAGE方法分辨率高的特点 ,尤其是在小分子量的快带区 ,电泳成带明显 ,达到梯度胶的分离效果 .在供试的大麦、小麦品种中 ,电泳图谱总条带数比 ISTA推荐的 10 %均一胶所得电泳图谱条带数分别增加 1～ 8条和 2～ 7条 .该方法既适用于大麦、也适用于小麦醇溶蛋白的分离 .并对 18%的 A-

不同提取剂对麦醇溶蛋白提取效果的电泳比较

以大麦、小麦品种为材料 ,分别采用醇溶蛋白提取剂乙醇、乙二醇、2 -氯乙醇、2 -巯基乙醇、尿素等配成不同浓度的单一组分提取剂和复合提取剂 ,在同一条件下提取大麦和小麦去胚种子的醇溶蛋白 ,通过 A- PAGE分离样品液发现 ,单一组分提取剂中 2 5 %的 2 -氯乙醇效果较好 ,5 %的 2 -巯基乙醇效果较差 ;复合提取剂中由 2 -氯乙醇和2 -巯基乙醇组成的提取剂效果最好。这种复合提取剂制备的样品液经电泳后 ,在图谱中条带丰富 ,带型清晰 ,无论对大麦还是小麦种子 ,都是最佳的醇溶蛋白提取剂。

牦牛血超氧化物歧化酶电泳多谱带现象研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下 ,各带会发生相互转化。

栝楼愈伤组织和块根中天花粉蛋白相对含量的比较研究

目的：分析离体培养的栝楼叶片愈伤组织中天花粉蛋白（ＴＣＳ）的相对含量，并与栝楼块根进行比较。方法：采用丙酮沉淀方法，获得栝楼叶片愈伤和块根的蛋白提取物。应用免疫扩散反应、ＳＤＳＰＡＧＥ蛋白质凝胶电泳和电泳图谱的薄层扫描技术进行检测分析。结果：栝楼愈伤组织提取物中ＴＣＳ的相对含量最高，占被分析的４种总蛋白量的４４２２％。但其ＴＣＳ的绝对含量明显地低于块根中的含量。结论：栝楼块根中ＴＣＳ的绝对含量高于栝楼叶片愈伤组织，大约是愈伤组织的２６６倍。

RAPD技术在茄子种子鉴定中的应用研究

以龙杂茄2号、佳杂茄1号2个茄子杂种及其父母本为材料,使用MJ/PTC-200型PCR仪并对电泳图谱分析, 建立了适合茄子随机扩增多态性DNA分析的PCR扩增反应的体系,从40个随机引物中找到了2个可用于鉴定龙杂茄2号、3个可用于鉴定佳杂茄1号杂种纯度的引物。

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳结果常见问题及分析

介绍了醋酸纤维素薄膜电泳的应用,对血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳在实验教学过程中遇到的问题进行了研究,通过分析其电泳图谱,指出得到不良实验结果的原因,进一步探索提高其分离效果并得到良好结果的方法。

水稻醇溶蛋白提取剂的优化及其多态性研究

以4个不同的水稻品种为材料,分别采用6种不同的单一组分和复合组分的醇溶蛋白提取剂,在同一条件下提取水稻种子的醇溶蛋白。通过比较SDS-PAGE电泳图谱发现:单一组分提取剂中100%乙二醇效果最好,用此提取剂提取的醇溶蛋白经SDS-PAGE电泳后,图谱中带型清晰,分辨率高,条带位置准确,是水稻醇溶蛋白理想的提取剂;5%2-巯基乙醇提取效果最差。此外,还用得出的最佳提取剂提取了另外36个水稻品系的醇溶蛋白,用考马斯亮蓝G-250染色法和SDS-PAGE比较分析了醇溶蛋白的总含量和组成的多态性。结果表明:不同水稻品系在醇溶蛋白总量、各组分的百分含量等上表现出一定的多态性。

大麦醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的探索

以栽培大麦和中国近缘野生大麦为材料 ,用复合提取剂 (内含 2 5 % 2 -氯乙醇和 1 % 2 -巯基乙醇 )对其种子醇溶蛋白过夜提取后制备的样本液 ,在保持凝胶浓度 ( 1 8% )不变的基础上 ,通过改变交联度 ,催化剂用量 ,进样量以及电场强度和电泳时间所获得的不同电泳图谱 ,经比较分析可知 ,在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系中 ,交联度为 3 .3 3 % ,催化剂 ( 0 .6%H2 O2 )用量在 2 6μL～ 3 0 μL之间 ,进样量控制在 5 μL～ 1 0 μL之间 ,室温下 5 0 0V稳压电泳 90min左右对醇溶蛋白分离效果好 ,电泳图谱清晰 ,分辨率高。实验结果亦表明 ,适当提高交联度和H2 O2 用量 ,有助于增加凝胶硬度 ,加快凝胶聚合速度 。

用普通电脑－打印机描绘电泳图谱的研究

针对生物科学研究中电泳技术的广泛应用，而专配的图谱扫描仪还远未普及，造成电泳图谱记录工作繁琐的现状，进行了用普通微机－打印机描绘电泳图谱的研究，以ＱｕｉｃｋＢＡＳＩＣ为编程环境，主要采用８ＡＳＩＣ语言的作图语句和ＤＯＳ５．０以上版本中的ＧＲＡＰＨＩＣＳ作图命令，编写了微机描绘电泳图谱的程序，并编译成在ＤＯＳ系统下可直接执行的软件。此软件可在２８６．３８６或更高档的普通微机上运行，能在各种打印机上打印输出，该软件使用灵活简便，不仅可消除手描误差，而且打印出的电泳图谱整齐匀称美观，有效地提高图谱描绘的质量，为满足一般人员使用，特编有中文提示的程序。

玉米种子蛋白电泳图谱图象中泳道边界提取方法研究

对玉米种子蛋白电泳图谱的特点进行了分析，在此基础上进一步提出电泳图谱图象中泳道边界的分析方法──边界提取时的阈值迭代技术及其相关的图象锐化回归技术。

新疆玉米主要杂交种及其亲本指纹图谱构建

品种稳定、内在的特征,可供种子纯度检验及品种鉴定与管理,构建品种的指纹图谱具有重要的现实意义。采用脂酶同工酶、种子贮藏蛋白电泳及RAPD技术,初步建立了新疆玉米主要推广杂交种及其亲本自交系的三种指纹图谱。结果表明,种子脂酶同工酶、种子贮藏蛋白电泳谱带,在各供试品种与其亲本自交系间其图谱均具有较大差异,供试的24个材料间RAPD多态性差异明显。此三种图谱均可作为供试材料稳定、内在的特征,为准确地鉴定品种纯度及品种认定提供参考和标准,具有一定应用前景。

3种点样方法对血清蛋白醋酸纤维膜电泳结果影响的对比研究

研究用盖玻片、滤纸和盖玻片+擦镜纸3种血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳点样方法对电泳结果的影响,评价盖玻片与擦镜纸相结合的新型点样方法在教学实验中的应用效果,并分析3组的蛋白质相对含量有无差异。结果表明:在相同实验条件下,盖玻片+擦镜纸组的电泳结果优于其他2种,3组的蛋白质相对含量无明显差异;盖玻片与擦镜纸相结合的点样方法较单纯使用盖玻片或滤纸的点样方法点样成功率有很大提高,出现的不良结果较少,能有效解决学生在电泳实验操作中的点样问题,可在教学实验中推广。

小麦种子蛋白图谱鉴定技术的应用

采用一种新型电泳方法，研究了山东省小麦生产上重要品种的电泳图谱特征。莱州９５３、鲁麦１４、鲁麦１５、烟农１５和鲁麦１号品种蛋白图谱的特征谱带分别是１．４５ｃｍ、１．６５ｃｍ、６．１５ｃｍ、７．１５ｃｍ和５．５５ｃｍ。它们的图谱符合系数在４９．３５％～６８．７５％。这种电泳技术分离性能强，能将来自同一组合的鲁麦５号、鲁麦８号和鲁麦１１相互区别开。这３个品种的符合系数高达６０％～７１．８８％，表明遗传上非常相似。这些在小麦种子检验和杂交育种中将有着重要意义。

白血病细胞线粒体超微结构及其蛋白质双向电泳分析

探讨白血病细胞线粒体（mt）形态、结构和功能的异常与mt蛋白组分变化间的可能的关系。方法采用离心法分离纯化了可移植性小鼠腹水型白血病细胞（L7811）及正常615纯系小鼠胸腺细胞线粒体，对其超微结构进行了电镜观察。结果对它们各自蛋白质双向电泳图谱分析后发现在PH4．5～6．5，MW15～35KD范围内正常对照有8个蛋白质斑点在L7811l白血病细胞线粒体电泳图谱相应位置未观察到，而在PH6左右、MW10～17KD区域内白血病样品有3个蛋白质斑点，在正常对照的电泳图谱相应区域也未观察到。结论白血病细胞与正常对照细胞相比线粒体在超微结构和蛋白质组成上均有明显差异。

我国普通小麦醇溶蛋白PAGE图谱与小麦品种、品质的关系

本实验利用我国农科院提供的全国20余省市60种小麦样品及加拿大硬红春麦marquis样品,经非解离连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),分析小麦醇溶蛋白电泳谱带与小麦品种和品质的关系。实验结果表明,不同小麦品种呈现各自的特征谱带;γ蛋白相对迁移率与面筋品质相关。由此说明,利用小麦醇溶蛋白PAGE图谱能够迅速、准确、简便地鉴定小麦品种与品质。