Determination of Total Flavonoids in Acanthopanax senticosus(Rupr. et Maxim.) Harms by Enzymolysis and Its Technological Optimization

In order to optimize the ultrasonic extraction technique for the total flavonoid of leaf yellows plus, the contents of 21 leaf yellows plus total flavonoid from four regions in Heilongjiang Province were comparatively analyzed. The ultrasonic extraction technology was optimized by Box-Behnken response surface method, and the total flavonoid content of 21 kinds of Acanthopanax senticosus(Rupr. et Maxim.) Harms from different producing areas were analyzed by cluster analysis. The optimal process conditions were determined as ultrasonic time 30 min, solid-liquid ratio 1 : 12 and ultrasonic power 250 W, and the average yield of the total flavonoid was 1.453 mg·g^ (-1). By optimizing the ultrasonic-assisted extraction method, the total flavonoid content from different producing areas was compared in the experiment, which provided certain data support for the optimization of the extraction process in the future and laid a certain theoretical foundation for the quality analysis of Chinese medicinal materials.

丁香苷的核磁共振研究

从产于黑龙江省的五加科植物刺五加茎叶中分离得到一化合物：丁香苷．利用１ＨＮＭＲ，１３Ｃ ＮＭＲ 和２Ｄ ＮＭＲ 等谱学方法对其１Ｈ

HPLC-ELSD法在刺五加药材糖类成分分析中的应用

建立一种高效、快速的高效液相色谱—蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)分析刺五加药材中糖类成分—葡萄糖及蔗糖组分。采用CHROMATOREX NH2柱为固定相;以乙腈:水为84.5:15.5(V/V)为流动相,流速1.0 mL.min-1;漂移管温度为100℃;氮气流速为2.5 L.min-1。在上述色谱条件下,葡萄糖和蔗糖的线性范围分别为0.023 2-0.116 0 mg.mL-1及0.099 6-0.496 5 mg.mL-1;且该二种糖的检测限分别(信/噪=3)为3.87 ng和3.31 ng。本方法无须进行糖衍生化而直接用于刺五加药材中糖类成分的分离分析。

无梗五加叶体外抗氧化活性研究

研究无梗五加叶及其不同部分的抗氧化活性,研究其作为食用天然抗氧化剂的可行性。采用DPPH.、ABTS+.自由基及还原性反应体系,利用分光光度法测定无梗五加叶总提液及其不同组分在不同浓度下的抗氧化能力和总酚含量。结果表明:无梗五加叶的不同部分对DPPH.、ABTS+.自由基均具有较强的清除能力,对Fe3+有较强的还原能力,其结果与浓度呈良好的量效关系。30%组分的抗氧化能力最强,在浓度为0.62 mg/mL时,对DPPH.及ABTS+.自由基的最大清除率分别为99.588%、99.387%,与同浓度VC的清除率接近,且其IC50分别为0.024 mg/mL0、.127 mg/mL。测得30%组分的总酚含量最高,为0.567%。无梗五加叶有较好的抗氧化能力,与总酚含量的相关性好,同时该结果也客观地反映了DPPH法、ABTS法及还原性法测定无梗五加叶抗氧化活性的准确性。

毛细管电泳法同时检测刺五加叶中的芦丁和金丝桃苷含量

目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加叶中芦丁、金丝桃苷含量的毛细管电泳法。方法采用毛细管电泳法,缓冲体系为0.2mol.L-1NaH2PO4,0.1mol.L-1Borax及双蒸水(10:7:3,pH8.8),熔融石英毛细管柱(25μm×45cm),分离电压为20kV,检测波长为254nm,进样时间为30s,进样高度10cm。结果芦丁、金丝桃苷在125～750,200～1200mg.L-1与峰面积线性关系良好,线性方程分别为:Y=144145ρ+423.8(r=0.9999)及Y=216836ρ-191.57(r=0.9999),样品平均回收率为99.38%及100.39%。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,不同生长时期、不同产地的刺五加叶中两成分均存在一定的差异。

无梗五加果中总香豆素和6,7-二甲氧基香豆素的含量测定

目的测定无梗五加果中总香豆素及6，7-二甲氧基香豆素的含量。方法以东莨菪内酯为对照品，采用分光光度法，于348nm处测定总香豆素含量。采用HPLC法测定6，7-二甲氧基香豆素含量。色谱柱为Hypersil BDS C18（4．6mm×250mm，5 μm），流动相为甲醇-磷酸水溶液（pH3．0）-乙腈-四氢呋喃（体积比为15：77：6：2），检测波长为340nm。结果总香豆素质量浓度在3．44～12．9mg·L^-1（r=0．9992）内、6，7-二甲氧基香豆素质量浓度在1～40mg·L^-1（r=0．9999）内线性关系良好；平均回收率分别为100．6％、97．7％；总香豆素和6，7-二甲氧基香豆素的质量百分含量分别为0．12％、0．0037％。结论方法准确、可靠，可为无梗五加果的质量控制提供参考依据。

新资源短梗五加及其同属植物根皮中紫丁香苷的HPLC测定研究

目的:测定新资源短梗五加及糙叶藤五加、红毛五加、刺五加、白毛五加、韩五加、细柱五加、白簕五加等8种五加属植物根皮中紫丁香苷的含量。方法:采用RP-HPLC测定紫丁香苷的含量。色谱柱为ODSC18柱,流动相为20%甲醇溶液,流速为1.0ml/min,检测波长为265nm,柱温35℃。采用正交试验法考察乙醇浓度、提取时间、溶剂用量对提取效果的影响。结果:紫丁香苷在0.0148～0.074mg/ml(r=0.9999)范围内,进样量与峰面积具有良好的线性关系,回归方程:Y=15234560X-7881.767,R2=0.9999,平均回收率为98.24%。8种五加属植物中,糙叶藤五加紫丁香苷含量最高,短梗五加次之。最佳提取工艺为用水做提取剂,料液比1:15、煮沸提取3.5h。结论:本法简便,结果可靠,可用于新资源短梗五加及其同属植物的质量控制。

无梗五加果多糖组成及生物活性的研究

采用HPLC法对经脱色脱蛋白、DEAE52纤维素柱层析得到的主要多糖组分ASP-Ⅰ、ASP-Ⅱ进行单糖组成和纯度、相对分子质量(Mr)测定,表明无梗五加果多糖单糖组成为甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及岩藻糖,主要由Mr为21800、147000、45400和18100的4种均一多糖组成;其中,均一多糖ASP-Ⅰ由半乳糖和鼠李糖组成,物质的量之比为1:0.7,Mr为18100。对水提醇沉后得到的无梗五加果多糖进行部分生物活性研究表明,其在清除自由基、抗疲劳、耐缺氧及提高免疫调节能力等方面都具有一定功效。

胶束电动毛细管电泳同时检测刺五加中紫丁香苷及绿原酸的含量

目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加中紫丁香苷、绿原酸含量的胶束电动毛细管电泳法。方法采用胶束电动毛细管电泳法,缓冲体系为100mmol·L^-1NaH2PO4-100mmol·L^-1Borax-100mmol·L^-1SDS-双蒸水（6.25∶43.75∶37.5∶12.5,pH9.25）,熔融石英毛细管柱（25μm×45cm）,分离电压为16kV,检测波长为254nm,进样时间为25s,进样高度10cm。结果紫丁香苷、绿原酸在0.0625-2.0000,0.2500-8.0000g·L^-1与峰面积线性关系良好,线性方程依次为：Y=112904ρ＋1645.（r=0.9999）,Y=98191ρ-165.11（r=0.9999）;样品回收率分别为100.78%和99.56%;两种成分含量以刺五加根中最高。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,可用于刺五加药材的质量控制,不同部位两成分均存在一定的差异。

HPLC法同时测定无梗五加果中东莨菪内酯和异嗪皮啶的含量

目的建立同时测定无梗五加（Acanthopanax sessiliflorusr（Rupr．et Maxim．）Seem．）果中东莨菪内酯和异嗪皮啶含量的HPLC法。方法采用Zirchrom Kromasil ODS C18（4．6mm×200mm，5／lm）色谱柱，流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸（体积比为13：1：86：1），流速为1．0mL·min^-1。柱温为室温，检测波长为344nm。结果东莨菪内酯和异嗪皮啶分别在0．975～7．80mg·L^-1和0．360～2．88mg·L^-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程分别为A=2．150×10^4P^- 2．964×100（r=0．9991）和A=1．776×10^p-1．947×10^3（r=0．9997），平均回收率分别为101．2％和98．8％，测得样品中东莨菪内酯和异嗪皮啶的含量分别为30．5μg·g^1（RSD=1．7％）和7．90μg·g^-1（RSD=2．4％）。结论方法准确、可靠，可为无梗五加果的质量控制提供参考依据。

刺五加组织培养与细胞工程进展

综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状。分别从体细胞胚胎发生的影响因素外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议。

渐危药用植物刺五加产地适宜性区划研究

目的:确定刺五加适宜分布区域,为野生资源普查、资源保护、野生抚育和种植提供依据。方法:应用中药材产地适宜性分析地理信息系统(TCMG IS)区划我国刺五加适宜生长区域。结果:全国共有11个省和直辖市的269个县市为刺五加的适宜产地,该区域地理位置位于小兴安岭、长白山、大兴安岭、燕山山脉、太行山和秦岭山脉,其中黑龙江省适宜面积占全国总面积的49.3%,其次为内蒙古自治区为22.4%,吉林省16.5%,辽宁省4.3%,河北省、北京市、河南省、山西省、陕西省、四川省和甘肃省等7省市总计仅占7.4%。

无梗五加果化学成分的研究(英文)

从无梗五加(Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim.)Seem.)果70%乙醇提取物中分离鉴定了12个化合物。经波谱鉴定为东莨菪内酯(1),原儿茶酸甲酯(2),槲皮素(3),无梗五加苷B(4),金丝桃苷(5),(-)-pinoresinol-4,4′-di-O-β-D-glucopyranoside(6),chiisanoside(7),22α-hydroxychiisanoside(8),niduloic acid(9),胡萝卜苷(10),东莨菪苷(11)和无梗五加苷D(12)。其中化合物9为新天然产物,化合物1,2,6和11是首次从五加科植物中分离得到,化合物3是首次从五加属植物中分离得到。

用神经网络和遗传算法优化怀槐悬浮细胞合成异黄酮

为了获得怀槐悬浮细胞合成异黄酮的最适培养条件 ,采用ANNs(人工神经网络 )结合RAGA(实数编码加速遗传算法 )对培养基组成进行全局寻优。培养基中影响异黄酮染料木素产率的主要组成是KNO3、(NH4 ) 2 SO4 、2 ,4 D和 6 BA。在它们的有效作用浓度范围内 ,用随机 1 0组培养基组合及细胞染料木素产率为输入和输出由ANNs对数据建模 ,由RAGA优化模型参数。建立的优化模型准确性高 ,依赖模型由RAGA全局寻优获得的最佳培养基组合是 1 4 9 6 8mg L (NH4 ) 2 SO4 、2 936 1 0mg LKNO3、0 0 1mg L 2 ,4 D和 0 1 9mg L 6 BA ,染料木素产率达 1 4 1 3mg L ,与模型预测值的误差为 7 38%。结果表明 ,运用神经网络结合遗传算法优化怀槐细胞合成异黄酮的培养条件是可行的 。

刺五加药材提取工艺的研究

目的建立刺五加药材提取工艺。方法以异秦皮啶和甲醇浸出物为指标,采用正交试验法,对最佳提取工艺进行工艺参数考察。结果刺五加粗粉加12倍量的75%乙醇分3次回流提取,每次2.0h为最佳提取工艺。结论该提取工艺合理,生产实际操作简单,适合于大规模生产。

多种气相色谱联用技术分析陕西刺五加茎挥发油的化学成分

采用气相色谱 /四极杆质谱(GC/qMS)、气相色谱 /正交加速飞行时间质谱(GC/oaTOFMS)和气相色谱 /傅里叶变换红外光谱 (GC/FTIR)联用技术,对一种陕西产刺五加Acanthopanaxsenticosus(Rupr. etMaxim. )Harms茎挥发油的化学成分进行了分析。基于GC/qMS谱库的检索功能,结合GC/FTIR在结构鉴别上的优势和GC/oaTOFMS对质谱碎片离子精确的质量测定功能,成功地实现了对 68个色谱组分的定性分析。与使用单一的联用技术(例如GC/qMS)相比,利用多种色谱联用技术在定性分析上的互补性,可以明显提高对组成复杂的挥发油类样品分析的可靠性。

刺五加果肉化学成分的研究(Ⅱ)

应用多种色谱技术进行分离纯化,从刺五加果肉水提取物中分离得到12个化合物,经理化性质和波谱分析鉴定其结构分别为:(-)-3,4-二香草基四氢呋喃(1)、桧脂素(2)、5α,8α-桥二氧麦角甾-6,22-双烯-3-醇(3)、刺五加苷A(4)、刺五加苷B(5)、尿嘧啶(6)、2-呋喃甲酸(7)、琥珀酸(8)、Phthalic acid bis-(2-ethyl-hex-yl)ester(9)、硬脂酸甘油酯(10)、正二十四烷酸(11)和正三十八烷(12)。其中化合物1、3、6、7、8和9为首次从本植物中分得。

气相色谱保留参数用于刺五加果挥发油中萜烯及萜烯氧化物的分类

根据刺五加挥发油中24个挥发性成分在5个程序升温条件下的保留时间,采用基于Levenberg-Marquardt法的软件GC_AB计算得到相应成分的气相色谱保留参数(A,B值)。通过对其中的萜烯及萜烯氧化物之间A,B关系的相关性分析,发现相同碳数的单萜烯、倍半萜烯和其氧化物分别具有良好的A-B线性相关性,但单萜烯与倍半萜烯、单萜烯与其氧化物、倍半萜烯与其氧化物的A-B关系不共线。研究表明,在中草药挥发油之类的复杂未知混合物体系的分析中,通过色谱保留参数进行萜烯及萜烯氧化物的分类是一种很有潜力的辅助定性方法。

黑龙江椴树属植物叶表皮形态学观察

利用扫描电子显微镜对紫椴(Tilia amurensis Rupr.)及糠椴(T.mandshurica Rupr.et Maxim.)叶片的微观形态结构特征进行观察,并进行微观形态结构的比较研究。研究结果表明紫椴与糠椴叶片上表皮微观形态相同,而下表皮气孔器的形态类型、蜡质纹饰和角质膜的形态特征、单位面积上星状毛的数量均表现出很大的差异。这些微观形态差异可作为区分紫椴和糠椴的分类学依据。

无梗五加果多糖与黄酮类化合物的研究

采用薄层色谱法对树脂纯化后的无梗五加果总黄酮进行了研究,表明以聚酰胺为固定相、微乳液为展开剂进行薄层层析鉴定效果最好,共分得9个组分。各种层析条件下的Rf值分析表明,无梗五加果中含药用成分金丝桃苷,未发现芦丁和槲皮素。采用HPLC法对经脱色、脱蛋白、DEAE52纤维素柱层析得到的主要多糖组分ASPⅠ-、ASP-Ⅱ进行单糖组成和纯度、相对分子质量(Mr)测定,表明无梗五加果多糖单糖组成为甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及岩藻糖,主要由Mr为21800、147 000、45 400和18 100的4种均一多糖组成;其中,均一多糖ASPⅠ-由半乳糖和鼠李糖组成,物质的量之比为1∶0.7,Mr为18 100。对水提醇沉后得到的无梗五加果多糖进行生物活性研究表明,其具有抗疲劳和耐缺氧的能力。