小鼠睾丸组织中转录因子Elk1 cDNA的克隆

为了确定Ets家族转录因子Elk1在睾丸组织中有无表达,提取了正常小鼠睾丸组织的总RNA,经RT-PCR、序列测定证实Elk1在正常小鼠睾丸组织中有表达,为进一步探讨其与睾丸发育及精子发生的关系奠定了基础。

子宫内膜癌组织中GPX4、ELK1表达变化及其与上皮—间充质转化和预后的关系

目的 观察子宫内膜癌(EC)组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、含ETS域转录因子Elk1(ELK1)表达变化,分析二者与上皮—间充质转化(EMT)及预后的关系。方法 EC患者90例,留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用免疫组化法检测GPX4、ELK1蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测GPX4 mRNA、ELK1 mRNA及EMT相关基因[E-钙黏素(E-cad)、N-钙黏素(N-cad)、碱性螺旋—环—螺旋转录因子(TWIST)mRNA]。采用Pearson相关分析法分析EC组织中GPX4 mRNA、ELK1 mRNA与E-cad mRNA、N-cad mRNA、TWIST mRNA表达的相关性。采用R软件分析癌症基因组图谱数据库中EC的RNA-seq数据,绘制Kaplan-Meier曲线,比较不同GPX4、ELK1 mRNA表达情况EC患者的预后。结果 EC组织中GPX4、ELK1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1、N-cad、TWIST mRNA表达高于癌旁组织,E-cad mRNA表达低于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4 mRNA与ELK1 mRNA表达呈正相关;GPX4 mRNA、ELK1 mRNA表达与E-cad mRNA表达呈负相关,与N-cad mRNA、TWIST mRNA表达呈正相关(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1 mRNA表达与FIGO分期、组织学分级和淋巴结转移有关,FIGO分期越高、组织学分级越高、有淋巴结转移者肿瘤组织中GPX4、ELK1 mRNA表达更高(P均<0.05)。GPX4 mRNA高表达组、ELK1 mRNA高表达组5年总生存率分别低于低表达组(P均<0.05)。结论 EC组织中GPX4、ELK1呈高表达,二者表达与EMT、患者预后有关,有望成为EC患者预后评估的标志物。

ELK1转录激活PD-L1表达对结直肠癌细胞增殖及侵袭影响

目的含ETS域转录因子Elk1(ETS transcription factor Elk1,ELK1)作为原癌基因,具体分子作用机制仍不清楚。本研究探讨结直肠癌中ELK1与程序性死亡因子配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)表达相关性以及二者在促进结直肠癌细胞增殖中的作用及其机制。方法应用免疫组织化学染色方法检测ELK1与PD-L1在衡水市哈励逊国际和平医院病理科2017-03-02-2018-12-26收集87例结直肠癌及其癌旁正常黏膜组织中的表达。利用慢病毒转染技术对SW480细胞进行ELK1基因过表达,通过CCK8、Transwell小室和蛋白质印迹法检测在过表达ELK1基因前后SW480细胞系的增殖、侵袭和PD-L1表达水平的变化,采用双荧光素酶报告基因和染色质沉淀RT-qPCR实验验证ELK1是否直接通过ELK1基序结合到PD-L1的基因启动子区。结果ELK1在结直肠癌组织中的阳性表达率(75.86%,66/87)高于癌旁黏膜组织(12.64%,11/87),差异有统计学意义,χ^2=80.352,P<0.001。PD-L1在结直肠癌组织中的阳性表达率(59.77%,52/87)高于癌旁黏膜组织(3.45%,3/87),差异有统计学意义,χ^2=75.287,P<0.001。ELK1和PD-L1蛋白表达均与患者的性别、年龄和肿瘤部位无关联,P>0.05;而与其肿瘤分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移有关联,χ^2值分别为43.152、24.671和23.104,均P<0.001。ELK和PD-L1表达水平呈高度正相关,r=0.967,P<0.001。与空白对照组相比,ELK1过表达组细胞的增殖、侵袭和PD-L1表达均升高。ELK1干扰组细胞的增殖、侵袭和PD-L1表达均降低;双荧光素酶报告基因和染色质沉淀RT-qPCR实验研究结果表明,ELK1可直接结合在PD-L1启动子上。结论 ELK1可转录激活PD-L1表达,从而促进结直肠癌细胞增殖及侵袭。