学龄前儿童乳牙釉质发育缺陷与龋病的关系研究

本研究采用简化的DDE指数,对1074名城乡学龄前儿童进行乳牙釉质发育缺陷和龋齿的现况调查.结果发现农村儿童DDE患病率(19.4%)明显高于城市儿童(8.7%).受检儿童龋齿的患病水平较高,城乡间差异有显著性.研究结果提示:釉质发育缺陷与龋病间有明显的相关性,釉质发育缺陷可以作为评估儿童人群龋病危险性的一个参数.

学龄前儿童乳牙釉质发育缺陷的患病状况及分布

目的：了解北京地区城乡学龄前儿童乳牙釉质发育缺陷（ＤＤＥ）的患病与分布状况；探讨营养状况与釉质发育缺陷间的关系。方法：采用简化的ＤＤＥ指数进行现况调查。结果：农村儿童ＤＤＥ的患病率（１９．４％）明显高于城市儿童（８．７％）；ＤＤＥ主要发生于上颌切牙；身高、体重测量所反映的儿童营养状况与ＤＤＥ间没有明显的相关性。结论：妊娠的后６个月到出生后６个月为乳牙对ＤＤＥ的敏感时期，因此早期预防非常重要。

乳牙釉质发育缺陷的患病状况及相关因素分析

目的 了解增城市儿童乳牙釉质发育缺陷 (DDE)的患病及分布状况 ,探讨其可能的致病因素。方法 采用世界卫生组织制定的标准进行临床检查及问卷调查。结果 增城市 2～ 4岁儿童乳牙DDE的患病率为 15 .5 % ,主要发生在上颌切牙。母亲在妊娠期患感冒使儿童DDE患病率增加 ,有显著性差别。

低出生体重儿、早产儿龋齿、釉质发育缺陷发病率及与釉质硬度关系的研究

目的 :研究低出生体重儿、早产儿乳牙龋齿、釉质发育缺陷的发病率并探讨其与釉质硬度的关系。方法 :选取低出生体重儿、早产儿及正常出生体重儿各 2 0 0例进行乳牙龋齿、釉质发育缺陷统计调查。同时收集口腔科门诊治疗中的上述两类儿童的自然脱落的釉质发育正常的乳前牙各 1 0颗做显微硬度测试 ,并与正常出生体重儿乳牙进行比较研究。结果 :低出生体重儿、早产儿乳牙龋齿、釉质发育缺陷的发病率明显高于正常出生体重儿 ,但发育正常的乳牙釉质硬度与正常出生体重儿无显著差异。结论 :低出生体重儿、早产儿乳牙龋齿发病率高与其釉质发育缺陷发病率高显著相关 ,而且仅与釉质发育缺陷的乳牙有关 。

3～5岁儿童乳牙釉质发育缺陷的流行状况调查及相关因素分析

目的了解上海市浦东新区3～5岁儿童乳牙釉质发育缺陷的患病情况、流行特征及影响因素。方法对1 500名上海市浦东新区3～5岁儿童采用临床检查和问卷调查进行乳牙釉质发育缺陷流行病学调查。问卷调查包括抽样对象的一般情况和与乳牙釉质发育缺陷相关的问题。结果本研究共调查了上海市浦东新区3～5岁儿童共1 373人,乳牙釉质发育缺陷的患病率为34.6%,乳牙釉质发育不全的患病率为17.3%。多因素分析结果显示:年龄、男性、儿童贫血和母亲孕期饮酒是乳牙釉质发育缺陷的相关影响因素(P<0.05)。结论上海市浦东新区3～5岁儿童乳牙釉质发育缺陷患病率为34.6%,其中存在釉质发育不全的儿童的患病率为17.3%。年龄、男性、儿童贫血、孕期饮酒是乳牙釉质发育缺陷的主要相关因素。年龄大的儿童或母亲怀孕期间有饮酒史的儿童,其乳牙釉质发育缺陷的患病率更高。男孩比女孩更易患乳牙釉质发育缺陷且严重程度更高。在1岁内有贫血病史的儿童,如果患有乳牙釉质发育缺陷,缺陷的严重程度更高。

牙釉质形成中的表观遗传学机制研究

牙釉质形成是受到关键基因时空性程序性调控的一系列复杂的生理进程。该过程覆盖年龄段长, 涉及生长发育时期多, 易因信号干扰或基因突变导致牙釉质发育缺陷性疾病(developmental defects of enamel, DDE)。表观遗传修饰在发育过程中对基因表达起重要的调控作用。近年, 高通量测序、染色质免疫共沉淀-高通量测序、DNA甲基化芯片等新技术层出不穷, 使得绘制全基因组表观遗传修饰图谱成为可能。DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等多种表观遗传时空特异性动态修饰在牙釉质形成过程中的调控作用扩展了人们对牙釉质形成调控网络的认识, 也为DDE的临床管理和干预措施提供了新的理论基础。本文简述了人牙釉质和啮齿类动物切牙牙釉质的形成过程, 总结表观遗传修饰在牙釉质形成中的动态特性, 阐述了表观遗传修饰在牙釉质形成及牙釉质发育缺陷发生发展中的潜在作用机制。

孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响

目的研究孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响及其可能的表观遗传学机制。方法通过随机数字表法将10只C57BL/6孕鼠分为对照组(皮下注射生理盐水)及孕期尼古丁暴露(prenatal nicotine exposure, PNE)组(皮下注射尼古丁溶液), 每组5只, 孕鼠生产后分别收集出生后0 d(postnatal day 0, P0;P14、P25含义依此类推)、P14、P25新生小鼠, 根据母代分组分为子代对照组及子代PNE组, 并记录P0、P25子代小鼠体质量。采用显微CT(micro-CT)扫描分析、扫描电镜和维氏显微硬度检测对子代小鼠牙槽骨和下颌切牙进行硬组织相关参数分析。提取P25子代小鼠下颌骨组织及第3代牙上皮干细胞(dental epithelial stem cell, DESC)中的总RNA, 通过实时荧光定量PCR检测成骨向及成釉向分化相关基因、增殖相关标志物和干细胞标志物的表达水平。采用石蜡切片免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, Pcna)、釉原蛋白(amelogenin, Amelx)、甲基转移酶ZESTE增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2, Ezh2)、组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化修饰(histone H3 trimethylated at lysine 27, H3K27me3)阳性染色分布及水平。使用细胞增殖(cell counting kit-8, CCK-8)试剂盒对外源性添加不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)尼古丁以及Ezh2抑制剂GSK126的DESC进行细胞活力检测。结果 PNE组孕鼠较对照组更容易出现不良妊娠结局, P0时子代PNE组小鼠体质量[(0.99±0.02)g]显著低于子代对照组[(1.20±0.04)g](P<0.001);P25时, 子代PNE组小鼠体质量[(9.65±1.32)g]显著低于子代对照组[(15.26±1.70)g](P<0.001), 死产率[(46.40±9.30)%]显著高于对照组(0)(P<0.001)。P14和P25时, 子代PNE组小鼠下颌切牙釉质矿化沉积点与第一磨牙近中面的距离数值[分别为(-1 349±45)、(-506±380)μm]均较子代对照组[分别为(-1 192±147)、(504±198)μm]显著减小(P<0.05, P<0.001), 提示矿化沉积点延迟。子代PNE组小鼠切牙釉柱及釉柱间质较对照组排列松散无序, 显微硬度[(245.7±18.4)MPa]较子代对照组[(371.9±28.7)MPa]显著降低(P<0.001)。HE染色显示子代PNE组小鼠前成釉细胞(pre-ameloblast, Pre-Am)区域排列较对照组紊乱, 矿化沉积点推迟, 暂时性扩增细胞(transit-amplifying cell, TA)及Pre-Am区域延长。免疫组织化学染色显示, 子代PNE组小鼠唇侧颈环(labial cervical loop, LaCL)整体Pcna表达较子代对照组显著增多(P<0.05), H3K27me3较对照组显著富集(P<0.01), 对应区域可见Ezh2表达显著增加(P<0.01), 同时成釉细胞胞质中Amelx阳性信号减弱。体外实验添加1 mmol/L 尼古丁能显著上调子代PNE组DESC的Pcna基因表达水平(P<0.01), 同时显著下调DESC标志物B淋巴瘤Mo-MLV插入蛋白1、富亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1和成釉细胞向分化的相关基因Amelx等的基因表达水平(P<0.05, P<0.05, P<0.01)。此外, 与0 h时相比, 干预24 h后1 mmol/L尼古丁可显著增强DESC的增殖活性(P<0.001), 添加10 μmol/L Ezh2抑制剂GSK126可挽救1 mmol/L尼古丁对DESC带来的增殖促进作用。结论孕期尼古丁暴露可能导致成釉向谱系定向分化过程延迟, 致子代小鼠DESC增殖及分化异常, 并且影响H3K27me3表观遗传修饰水平, 造成子代牙釉质发育障碍, 提示孕期尼古丁暴露是牙发育的危险环境因素。

牙釉质发育缺陷性疾病的环境影响因素及临床管理

牙釉质形成是有赖于多层机制协同调控的复杂生理过程,包括组织发生、形态发生、细胞分化等重要阶段,最终由牙源性上皮细胞定向分化为功能性成釉细胞,分泌基质并介导矿化。这一过程对各种局部和全身干扰因素非常敏感。牙发育与萌出过程始于胚胎阶段,持续至青春期甚至成年后这一漫长时期,各种干扰因素都可能使乳牙及恒牙的硬组织基质形成和矿化异常,导致牙釉质发育缺陷性疾病。其中,生命早期(从受精卵开始到8岁前)是对环境因素暴露最敏感的时期,同时也是乳牙及恒牙牙釉质发育的关键时期,这一时期的环境因素暴露往往导致不同程度的釉质发育缺陷。本文回顾了环境因素影响牙釉质发育缺陷性疾病的研究进展,概述了环境因素导致牙釉质发育缺陷性疾病的遗传学及表观遗传学机制,总结了针对该类疾病基于三级预防的临床管理策略,以期为从生命早期关键时间窗口预防牙发育异常,提供优生优育健康咨询及促进儿童口腔健康管理提供依据,通过前移儿童口腔疾病的预防关口,创建妇幼友好型社会,提高新生人口素质。