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甲状旁腺激素对HAEC细胞EndMT诱导作用及机制探讨 被引量:1
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作者 李宁 李亚斐 《中国血液净化》 2014年第9期647-649,共3页
目的探讨甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是否诱导血管内皮细胞上皮细胞-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)及相关机制。方法血管内皮细胞HAEC培养至对数期,分别加入不同剂量的全长重组PTH(10-12mol/L、10-1... 目的探讨甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是否诱导血管内皮细胞上皮细胞-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)及相关机制。方法血管内皮细胞HAEC培养至对数期,分别加入不同剂量的全长重组PTH(10-12mol/L、10-11mol/L、10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L)作用48h;再在10-8mol/L PTH作用下,选择12、24、36、60h 4个时间点;分别收集总蛋白。Western blot分析Ve-Cadherin、CD31、α-SMA、TGF-β1和ILK的表达改变。结果 Western blot结果表明在PTH作用下,血管内皮细胞标志分子Ve-Cadherin和CD31表达降低;纤维细胞标志分子α-SMA表达则显著升高,且呈时间和剂量依赖性。Western blot分析发现TGF-β1和ILK表达同时升高。结论 PTH减弱内皮细胞特征、增强纤维化特征,诱导HAEC细胞发生EndMT,TGF-β1-ILK通路是其调控的可能通路之一。 展开更多
关键词 甲状旁腺素 内皮细胞-间充质转化 尿毒症 整合素连接激酶
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基于CXCL12/CXCR4生物轴探讨清心饮抑制CVB3感染后CMVECs发生EndMT的作用
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作者 代楚行 陈俊 +1 位作者 王壹民 刘强 《浙江中医药大学学报》 CAS 2022年第7期699-707,727,共10页
[目的]探讨趋化因子12(chemokine 12,CXCL12)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)生物轴在清心饮含药血清抑制柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)感染后心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMVECs... [目的]探讨趋化因子12(chemokine 12,CXCL12)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)生物轴在清心饮含药血清抑制柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)感染后心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMVECs)发生内皮间充质转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)过程中的作用。[方法]取生长状态良好的CMVECs设计为正常对照组、模型组、CXCR4拮抗剂组、清心饮组和清心饮+CXCR4拮抗剂组。除正常对照组用含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的杜尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco’s modification of Eaglews medium,DMEM)培养外,其余各组CMVECs先用CVB3培养基感染2 h,后弃去CVB3培养基,改为普通培养。通过细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK8)检测各组细胞活力,免疫荧光(immunofluorescence,IF)、免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)等实验方法检测内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)、间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、CXCL12和CXCR4的蛋白及基因表达。[结果]与正常对照组比较,模型组CD31表达下降(P<0.01),α-SMA、CXCL12和CXCR4表达增强(P<0.01)。与模型组比较,CXCR4拮抗剂组、清心饮组CD31表达增强(P<0.01),α-SMA和CXCR4表达下降(P<0.01),CXCR4拮抗剂组CXCL12表达差异无统计学意义(P>0.05),清心饮组CXCL12表达下降(P<0.05)。与清心饮组比较,清心饮+CXCR4拮抗剂组CD31的表达增强(P<0.05),α-SMA、CXCL12和CXCR4表达下降(P<0.01,P<0.05)。[结论] CXCL12/CXCR4生物轴参与了CVB3感染后CMVECs发生EndMT的过程,拮抗CXCL12/CXCR4生物轴能够明显增强清心饮对该过程的抑制。 展开更多
关键词 清心饮 心脏微血管内皮细胞 柯萨奇B3病毒 内皮间充质转分化 CXCL12/CXCR4生物轴
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A novel Nanocellulose-Gelatin-AS-IV external stent resists EndMT by activating autophagy to prevent restenosis of grafts
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作者 Tianshu Chu Qingye Li +5 位作者 Chun Dai Xiang Li Xiang Kong Yangming Fan Hongyan Yin Jianjun Ge 《Bioactive Materials》 SCIE CSCD 2023年第4期466-481,共16页
Vein grafts are widely used for coronary artery bypass grafting and hemodialysis access,but restenosis remains the"Achilles’heel"of these treatments.An extravascular stent is one wrapped around the vein gra... Vein grafts are widely used for coronary artery bypass grafting and hemodialysis access,but restenosis remains the"Achilles’heel"of these treatments.An extravascular stent is one wrapped around the vein graft and provides mechanical strength;it can buffer high arterial pressure and secondary vascular dilation of the vein to prevent restenosis.In this study,we developed a novel Nanocellulose-gelatin hydrogel,loaded with the drug Astragaloside IV(AS-IV)as an extravascular scaffold to investigate its ability to reduce restenosis.We found that the excellent physical and chemical properties of the drug AS-IV loaded Nanocellulose-gelatin hydrogel external stent limit graft vein expansion and make the stent biocompatible.We also found it can prevent restenosis by resisting endothelial-to-mesenchymal transition(EndMT)in vitro.It does so by activating autophagy,and AS-IV can enhance this effect both in vivo and in vitro.This study has added to existing research on the mechanism of extravascular stents in preventing restenosis of grafted veins.Furthermore,we have developed a novel extravascular stent for the prevention and treatment of restenosis.This will help optimize the clinical treatment plan of external stents and improve the prognosis in patients with vein grafts. 展开更多
关键词 RESTENOSIS Vein graft Extravascular stent NC-Gelatin hydrogel endmt
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研究miR-219下调TGFBR2影响ENDMT途径抑制急性心肌梗死 被引量:2
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作者 郭义威 王松涛 崔卫刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期8-15,共8页
目的:主要是miR-219通过对TGFBR2调控机制,介导ENDMT途径缓解急性心肌梗死的发展。方法:qRT-PCR检测AMI患者及AMI小鼠血清中miR-219的表达量;过microRNA靶基因数据库TargetScan进行筛选预测;萤光素酶报告基因法及qRT-PCR分析TGFBR2与miR... 目的:主要是miR-219通过对TGFBR2调控机制,介导ENDMT途径缓解急性心肌梗死的发展。方法:qRT-PCR检测AMI患者及AMI小鼠血清中miR-219的表达量;过microRNA靶基因数据库TargetScan进行筛选预测;萤光素酶报告基因法及qRT-PCR分析TGFBR2与miR-219的调控机制;通过心脏超声心动图检测AMI小鼠心肌注射miR-219慢病毒4周后的血分数(LVEF);采用qRT-PCR检测心肌注射miR-219慢病毒的AMI小鼠中Nppa的mRNA的表达量;通过Masson’s trichrome染色法检测小鼠4周后左心室纤维化变化;使用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)对小鼠左室切片进行免疫组化分析;通过Western blot检测P-smad2、P-smad3及TGFBR2缺氧诱导蛋白磷酸化的表达水平。结果:miR-219对AMI有调控作用; miR-219可抑制TGFBR2的mRNA表达,而miR-219 inhibitor可以抑制这种下调效果,miR-219对TGFBR2具有抑制调控性; miR-219可抑制急性心肌梗死的进程,促进梗死心肌功能的恢复; miR-219能促进AMI小鼠心肌组织血管的新生和成熟,最终心脏收缩能力上升,心功能恢复; miR-219能抑制TGFBR2抑制EndMT途径,导致缓解AMI的病理进程。结论:miR-219能通过抑制TGFBR2影响EndMT途径,心肌纤维化减少,促进血管的新生和成熟,心功能恢复,抑制AMI的病理发展。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 miR-219 TGFBR2 内皮间充质转化
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暖心康抑制内皮间充质转化减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并动脉粥样硬化小鼠斑块形成
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作者 王明炀 王陵军 +5 位作者 梁碧容 陈梓欣 曹艳红 张钰冰 李淑贤 刘景 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期789-797,共9页
目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg&#... 目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg·kg^(-1))以及暖心康低、中、高剂量组(生药量3.5、7.0、14.0 g·kg^(-1)),每组8只。采用将小鼠长期在睡眠期间暴露于慢性间歇性缺氧(CIH)环境,联合高脂饲料喂养,复制OSAHS合并AS小鼠模型。采用油红O染色法观察小鼠主动脉内壁斑块形成情况;Masson三色染色法评估小鼠主动脉根部粥样斑块的胶原含量;免疫荧光法检测主动脉斑块中内皮细胞标志物CD31及EndMT标志物Vimentin的表达情况;ELISA法测定血脂水平;qPCR法检测主动脉组织中EndMT标志物α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠的主动脉粥样斑块面积显著增加(P<0.01),主动脉根部斑块胶原沉积面积显著增加(P<0.01);斑块处CD31阳性表达细胞数量显著减少(P<0.01),Vimentin阳性表达细胞数量显著增多(P<0.01);血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P<0.01);主动脉组织中α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,暖心康各给药组的主动脉粥样斑块面积均显著减少(P<0.05,P<0.01),主动脉根部粥样斑块的胶原沉积面积均明显缩小(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠斑块处CD31阳性表达细胞数量明显增加(P<0.05),暖心康中、高剂量组小鼠斑块处Vimentin阳性表达细胞数量明显减少(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠的血清TG水平显著降低(P<0.01),暖心康各给药组小鼠的血清T-CHO、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),暖心康中、高剂量组小鼠的血清HDL-C水平显著升高(P<0.01);暖心康各给药组小鼠主动脉组织中α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论暖心康可以有效减轻OSAHS合并动脉粥样硬化小鼠的斑块形成,可能与其抑制EndMT,减少胶原纤维形成有关。 展开更多
关键词 暖心康 内皮间充质转化 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 动脉粥样硬化 小鼠
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SIRT3缺陷对脓毒症心肌损伤的影响及作用机制
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作者 徐天华 刘鹏昊 崔德荣 《医学研究杂志》 2024年第3期55-61,共7页
目的探讨SIRT3缺陷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌损伤的影响及作用机制。方法通过对SIRT3基因敲除(SIRT3^(-/-))小鼠及野生型(wild type,WT)小鼠进行LPS(10mg/kg)腹腔注射24h制备脓毒症心肌损伤模型,等体积0.9%氯... 目的探讨SIRT3缺陷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌损伤的影响及作用机制。方法通过对SIRT3基因敲除(SIRT3^(-/-))小鼠及野生型(wild type,WT)小鼠进行LPS(10mg/kg)腹腔注射24h制备脓毒症心肌损伤模型,等体积0.9%氯化钠溶液(normal saline,NS)腹腔注射作为对照,设立WT-NS组、WT-LPS组、SIRT3^(-/-)-LPS组、SIRT3^(-/-)-NS组。通过对人心脏微血管内皮细胞进行LPS(10μg/ml)刺激24h制备细胞损伤模型。正常培养作为对照,使用SIRT3过表达慢病毒及阴性对照病毒进行细胞转染,设立对照组、LPS组、LPS+SIRT3过表达组、阴性对照病毒组。采用心脏超声检测各组小鼠收缩末期及舒张末期左心室后壁厚度、左心室舒张末期容积。天狼星红染色检测各组心脏组织的胶原蛋白含量。免疫荧光法观察各组心脏微血管中内皮-间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)标志蛋白:血小板-内皮细胞黏附分子(platelet-endothelial cell adhesion molecule,CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。采用Western blot法检测CD31、α-SMA、SIRT3蛋白和自噬相关蛋白LC3、p62的表达情况。结果心脏超声发现,SIRT3^(-/-)-LPS组左心室舒张末期容积、收缩末期及舒张末期左心室后壁厚度均增加(P<0.001)。天狼星红染色结果表明,SIRT3缺陷可显著提升LPS诱导的脓毒症小鼠心脏组织的胶原蛋白含量(P<0.001)。LPS可诱导小鼠心脏微血管内皮细胞发生EndMT,而SIRT3缺陷会加重这一变化(P<0.05)。LPS可诱导小鼠心脏组织自噬水平应激性升高,而SIRT3缺陷会降低自噬水平(P<0.05)。体外实验同样证实了LPS诱导人心脏微血管内皮细胞自噬应激性增强(P<0.001),此时SIRT3蛋白表达下降伴随着EndMT的发生(P<0.05),而SIRT3过表达明显减轻了EndMT的程度(P<0.001),自噬水平进一步增加(P<0.05)。结论SIRT3缺陷能加重LPS诱导的脓毒症小鼠心脏舒张功能障碍及纤维化程度,其机制可能与其降低心脏组织自噬水平,促进心脏微血管内皮细胞发生EndMT有关。 展开更多
关键词 脓毒症 心肌损伤 心脏纤维化 内皮-间充质转化 SIRT3
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EndMT在血管重塑中的作用及相关信号通路 被引量:5
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作者 林昌建 孔辉 +1 位作者 解卫平 王虹 《江苏医药》 CAS 2016年第12期1384-1386,共3页
肺血管重塑是肺高压的主要特征。内皮细胞可由血管内膜层迁移并转化为间充质细胞或平滑肌样细胞,这一过程称为内皮间充质转化(EndMT),可引起血管重塑。与EndMT相关的信号通路主要有转化生长因子β、Wnt、Notch等。抑制EndMT发生有望成... 肺血管重塑是肺高压的主要特征。内皮细胞可由血管内膜层迁移并转化为间充质细胞或平滑肌样细胞,这一过程称为内皮间充质转化(EndMT),可引起血管重塑。与EndMT相关的信号通路主要有转化生长因子β、Wnt、Notch等。抑制EndMT发生有望成为延缓或阻止肺高压进展的一种治疗手段。 展开更多
关键词 血管重塑 endmt 信号通路 间充质细胞 平滑肌样细胞 肺高压 内皮细胞 转化生长因子 Notch 冠脉结扎
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靶向抑制表皮生长因子受体可通过干扰血管内皮细胞间充质转分化治疗肝纤维化 被引量:2
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作者 曹兴旺 杨思艺 +5 位作者 袁静簃 郭庆 曾韵桃 谢成亮 毕涛 魏微 《成都医学院学报》 CAS 2023年第1期27-32,共6页
目的观察靶向性抑制表皮生长因子受体(EGFR)的抑制剂AZ-5104对小鼠肝纤维化症状的影响,探讨AZ-5104改善肝纤维化的作用机制。方法选用了12只雄性C57小鼠,随机分为常规组、模型组和给药组,每组4只。除常规组外,其余两组腹腔注射浓度为20%... 目的观察靶向性抑制表皮生长因子受体(EGFR)的抑制剂AZ-5104对小鼠肝纤维化症状的影响,探讨AZ-5104改善肝纤维化的作用机制。方法选用了12只雄性C57小鼠,随机分为常规组、模型组和给药组,每组4只。除常规组外,其余两组腹腔注射浓度为20%(0.8 g/kg)的CCl4,3 d/次,共注射4次,同时喂养高脂饲料和含有5%蔗糖的饮用水。给药组小鼠腹腔注射AZ-5104,CCl4注射完成后次日注射药物,第3天不做处理,重复4次上述操作,第4次药物注射完成后,处死小鼠取材,对小鼠肝脏进行常规病理学检测以及免疫荧光染色。结果CCl4所诱导的模型组与常规组比较,肝小叶内部结构严重损坏,周围纤维结缔组织数量明显增多,并且有大小不等的假小叶形成;给药组较模型组肝纤维化症状明显改善,肝纤维化过程中血管内皮细胞间充质转分化(End MT)明显减弱。结论AZ-5104作为靶向性抑制EGFR的抑制剂可改善小鼠肝纤维化,其抗纤维化效果的发挥可能与抑制纤维化过程中End MT密切相关。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 血管内皮细胞间充质转分化 肝纤维化
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Notch信号通路与内皮-间充质转化及肺纤维化关系的研究进展
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作者 张伟津 蔡丽云 《中外医学研究》 2023年第21期177-181,共5页
肺纤维化是一种慢性进行性的呼吸系统疾病,在老年群体中表现出很高的患病率。目前仍是一种难以治愈的间质性肺部疾病。近来研究表明,肺内皮细胞可通过内皮-间充质转化(EndMT)参与肺间质纤维化的形成和发展从而导致纤维化。Notch信号通... 肺纤维化是一种慢性进行性的呼吸系统疾病,在老年群体中表现出很高的患病率。目前仍是一种难以治愈的间质性肺部疾病。近来研究表明,肺内皮细胞可通过内皮-间充质转化(EndMT)参与肺间质纤维化的形成和发展从而导致纤维化。Notch信号通路不仅广泛参与EndMT的过程而且广泛参与肺等器官的纤维化疾病,影响肺纤维化患者的预后。因此,本文主要对Notch信号通路与EndMT及肺纤维化的关系做一综述。 展开更多
关键词 肺纤维化 NOTCH信号通路 内皮-间充质转化
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ALK2使内皮细胞转化为类干细胞的机制
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作者 罗文 何月 +1 位作者 刘曼 张吉翔 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期564-568,共5页
内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程是血管内皮细胞转化为类干细胞的基础,持续激活状态的ALK2在EndMT过程起到关键的促进作用,EndMT发生后内皮细胞能获得类干细胞的表现型。TGF-β2和BMP4作... 内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程是血管内皮细胞转化为类干细胞的基础,持续激活状态的ALK2在EndMT过程起到关键的促进作用,EndMT发生后内皮细胞能获得类干细胞的表现型。TGF-β2和BMP4作为特异性配体激活ALK2,下调某些内皮细胞标志物并上调某些间质细胞标志物,促进EndMT过程。此外,编码ALK2的基因序列在206号氨基酸上突变形成R206H ALK2后作用类似持续激活状态ALK2,同样也能达到促进内皮细胞向间充质细胞转分化的目的。 展开更多
关键词 ALK2 血管内皮细胞 类干细胞 endmt
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自噬对急性心肌梗死后大鼠内皮细胞间质转分化及心肌纤维化的调节机制 被引量:2
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作者 邹晋 杨琴 +4 位作者 李宾公 柯旋 郝艳琴 李雪莲 李幸幸 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1099-1104,1126,F0003,共8页
目的探讨通过干预急性心肌梗死(AMI)后大鼠自噬水平抑制心肌微血管内皮细胞间质转分化(EndMT)进而减少心肌纤维化的可行性。方法将SD雄性大鼠随机分为四组,Sham组(n=15)、AMI组(n,=16)、AMI+RAP组(n=15)及AMI+3-MA组(n=14)。使用雷帕霉... 目的探讨通过干预急性心肌梗死(AMI)后大鼠自噬水平抑制心肌微血管内皮细胞间质转分化(EndMT)进而减少心肌纤维化的可行性。方法将SD雄性大鼠随机分为四组,Sham组(n=15)、AMI组(n,=16)、AMI+RAP组(n=15)及AMI+3-MA组(n=14)。使用雷帕霉素(rapamycin,RAP)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预AMI后SD大鼠的自噬水平,通过心脏彩超观察各组大鼠心脏左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末径(LVIDd)及左室收缩末径(LVIDs)的变化;应用Masson’s trichrome染色检测心肌胶原纤维化面积;Western blot测定心肌梗死区域CD31、αSMA、COLI、LC3及Bedim的表达水平;免疫荧光染色观察心肌梗死区域CD31+/aSMA+双阳性细胞数目及血管内皮细胞LC3的表达水平。结果与AMI组比较,AMI+RAP组胶原容积分数降低,LVEF和LVFS增加,LVIDd及LVIDs缩小(P<0.05),而AMI+3-MA组胶原容积分数增加(P<0.05),LVEF、LYFS、LVIDd及LVIDs变化差异无统计学意义。LC3-Ⅱ在AMI后1d内明显上调,持续1~2d,而后表达逐渐减低(p<0.05)。AMI后第7天,心脏组织CD31表达下降,αSMA、COL1表达增加,CD31+/αSMA+双阳性细胞增加(P<0.05),LC3、Beclinl未见明显改变。与AMI组比较,AMI+RAP组CD31表达升高,αSMA、COL1表达下降,CD31+/αSMA+双阳性细胞下降,LC3-Ⅱ、Bedim表达增加(P<0.05),AMI+3-MA组则相反(P<0.05)。结论EndMT促进了AMI后的心肌纤维化,而提高AMI后的自噬水平,可抑制EndMT,减轻心肌纤维化,改善心功能。 展开更多
关键词 内皮细胞间质转分化(endmt) 自噬 缺氧 急性心肌梗死(AMI) 心肌纤维化 雷帕霉素(RAP)
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肺动脉高压时肺血管内皮间质转化相关miRNAs网络调控的生物信息学分析 被引量:10
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作者 张卫芳 熊爱珍 +4 位作者 吴卫华 祝田田 邹小舟 刘汀 胡长平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1294-1300,共7页
目的探索肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)时肺血管内皮间质转化(End MT)相关miRNAs及其下游靶点的网络调控。方法利用文献挖掘PH相关基因及EndMT/EMT相关miRNAs。利用Biological General Repository for Interaction Datasets(Bi... 目的探索肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)时肺血管内皮间质转化(End MT)相关miRNAs及其下游靶点的网络调控。方法利用文献挖掘PH相关基因及EndMT/EMT相关miRNAs。利用Biological General Repository for Interaction Datasets(Bio GRID)数据库得到基因相互作用关系。利用生物信息学(DIANA3、Miranda4、Pic Tar5、Target Scan6、miRDB7和micro T-CDS8)预测相应miRNAs的靶基因关系,超几何分析预测与肺动脉高压End MT相关miRNAs,通过对miRNAs参与功能分区中的情况筛选评分最高的miRNAs并选择部分进行实验验证,利用Cytocape 3软件构建miRNAs与其下游靶点的相互作用网络。结果根据文献挖掘出与PH有关的基因230个,与End MT/EMT相关miRNAs共189个,对应成熟体322个。其中98个miRNAs可能与PH时End MT有关。其中,仅有22个miRNAs同时参与了TGF-β/BMP、低氧和炎症3个功能通路,评分最高,分别为miR-let-7家族、miR-124、miR-130家族、miR-135、miR-144、miR-149、miR-155、miR-16-1、miR-17、miR-181家族、miR-182、miR-200家族、miR-204、miR-205、miR-21、miR-224、miR-27、miR-29家族、miR-301a、miR-31、miR-361和miR-375。对let-7g、miR-21、miR-124及miR-130家族进行实时荧光定量PCR验证发现其在低氧诱导PH大鼠肺动脉中表达均明显变化。结论利用生物学信息技术从大量miRNAs中筛选得到的22个miRNAs同时参与TGF-β/BMP、低氧和炎症信号通路,可能与PH时End MT相关,为后续深入研究PH时End MT提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 肺动脉高压 MIRNAS 内皮间质转化 网络调控 生物信息学 网络药理 相互作用
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miR-330-5p负性调控ADAM17基因抑制人心脏微血管内皮细胞的间质转化 被引量:1
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作者 鞠延玲 朱国伟 +1 位作者 赵旭 臧雪莲 《贵州医药》 CAS 2016年第10期1011-1014,共4页
目的探讨人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)间质转化(EndMT)过程中miR-330-5p和ADAM17基因的表达,阐明miR-330-5p对EndMT的影响。方法培养HCMEC,应用TGF-β1诱导后,利用免疫荧光化学检测CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达。运... 目的探讨人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)间质转化(EndMT)过程中miR-330-5p和ADAM17基因的表达,阐明miR-330-5p对EndMT的影响。方法培养HCMEC,应用TGF-β1诱导后,利用免疫荧光化学检测CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达。运用生物信息学方法对miR-330-5p和ADAM17基因的配对关系进行预测。脂质体2000转染miR-330-5p模拟物后,Real-time PCR检测miR-330-5p、ADAM17和α-SMA mRNA的表达,Western blotting检测ADAM17和α-SMA蛋白的表达。结果光镜下可见诱导后细胞由鹅卵石形态变为长梭形,免疫荧光化学显示诱导前有强烈的CD31表达,诱导后出现α-SMA的高表达。生物信息学软件TargetScan和miRanYda显示miR-330-5p和ADAM17基因二者靶向配对良好。Real-time PCR和Western blotting检测结果均表明过表达miR-330-5p能够降低ADAM17和α-SMA mRNA及蛋白的表达。结论 miR-330-5p通过下调人心脏微血管内皮细胞中ADAM17基因的表达,进而抑制TGF-β1诱导的EndMT。 展开更多
关键词 微小RNA 解整合素-金属蛋白酶17 内皮间质转化 人心脏微血管内皮细胞
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复方精油对PM_(2.5)诱导小鼠肺微血管内皮细胞内皮间质转化的影响
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作者 马柯欣 徐靖斌 +3 位作者 任飞 许新 刘超生 李发胜 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第6期1006-1012,共7页
探讨复方精油对PM_(2.5)诱导小鼠肺微血管内皮细胞(MHC)内皮间质转化(EndMT)的干预作用,并从TGF-β1/SMAD3/p-SMAD3通路分析其可能的调节机制。建立PM_(2.5)诱导小鼠MHC和复方精油干预模型,测定细胞活力和迁移能力的变化;采用RT-qPCR和W... 探讨复方精油对PM_(2.5)诱导小鼠肺微血管内皮细胞(MHC)内皮间质转化(EndMT)的干预作用,并从TGF-β1/SMAD3/p-SMAD3通路分析其可能的调节机制。建立PM_(2.5)诱导小鼠MHC和复方精油干预模型,测定细胞活力和迁移能力的变化;采用RT-qPCR和Western blot检测CDH5、CD31、Col1、Acta2、S100A4和TGF-β信号通路相关因子的水平变化。结果表明复方精油可减弱PM_(2.5)对细胞迁移能力的影响;EndMT相关因子的表达随PM_(2.5)作用时间的延长呈现正向发展趋势,复方精油对PM_(2.5)诱导产生的EndMT有良好的干预作用;TGF-β1、TGF-βR1和p-SMAD3的表达均呈现下降趋势,EndMT相关因子的表达水平也有所逆转。复方精油可缓解PM_(2.5)诱导的EndMT进程,其作用与TGF-β1/SMAD3/p-SMAD3信号通路相关。 展开更多
关键词 PM_(2.5) 复方精油 内皮间质转化(endmt) TGF-β1/SMAD3/p-SMAD3通路
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Chemerin/ChemR23与糖尿病肾病内皮-间质转分化的相关性研究 被引量:2
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作者 张诗翊 胡晓茹 +5 位作者 尚进 王晓阳 王筝 张艳 郭佳 赵占正 《河南医学研究》 CAS 2018年第9期1537-1540,共4页
目的探讨Chemerin/ChemR23与糖尿病肾病肾小球血管内皮细胞内皮-间质转分化(EndMT)的相关性。方法糖尿病无肾病患者(DM组)20例,糖尿病肾病患者(DN组)60例,分为3组,A组:尿白蛋白/尿肌酐(UACR)为30~300 mg/g,eGFR≥60 ml/(min·1.73 m... 目的探讨Chemerin/ChemR23与糖尿病肾病肾小球血管内皮细胞内皮-间质转分化(EndMT)的相关性。方法糖尿病无肾病患者(DM组)20例,糖尿病肾病患者(DN组)60例,分为3组,A组:尿白蛋白/尿肌酐(UACR)为30~300 mg/g,eGFR≥60 ml/(min·1.73 m^2)的患者20例;B组:UACR>300 mg/g,eGFR≥60 ml/(min·1.73 m^2)的患者20例;C组:UACR>300 mg/g,eGFR<60 ml/(min·1.73 m^2)的患者20例,以同期健康体检者(20例)为对照(NC组),ELISA法检测血清中Chemerin、TGF-β1的分泌量;DN患者中行肾活检术的共8例,以10例正常肾组织标本作对照,免疫组化检测肾组织Chemerin、ChemR23、α-SMA及CD31的表达。结果与NC组相比,DM组及DN组患者血清中Chemerin、TGF-β1的含量增加,且DN组升高更为明显,二者具有正相关性并随病情进展而逐渐增加;肾组织中Chemerin、ChemR23含量随糖尿病肾病病情进展而增加,α-SMA表达增多,CD31表达则减少。结论 Chemerin/ChemR23参与了DN中的EndMT过程。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 Chemerin/ChemR23 内皮细胞转分化
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Shh/Twist1对大鼠肺动脉内皮细胞间质转化及血管重构的作用机制
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作者 刘蕾 马德宾 +1 位作者 史亮 孙文武 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第1期45-50,共6页
目的探讨Shh/Twist1对低氧诱导的大鼠肺动脉内皮细胞间质转化及血管重构的影响及机制。方法将原代分离的大鼠肺动脉内皮细胞分为正常对照组(不予低氧处理)和低氧诱导的肺动脉高压(PAH)细胞模型(3%O_(2)低氧处理3 d),PAH细胞模型又分为... 目的探讨Shh/Twist1对低氧诱导的大鼠肺动脉内皮细胞间质转化及血管重构的影响及机制。方法将原代分离的大鼠肺动脉内皮细胞分为正常对照组(不予低氧处理)和低氧诱导的肺动脉高压(PAH)细胞模型(3%O_(2)低氧处理3 d),PAH细胞模型又分为模型组、Shh抑制组(造模前采用Shh抑制剂预处理细胞)及siRNA-Twist1组(造模前采用siRNA-Twist1预处理细胞);于3%O_(2)培养细胞3 d时,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,小管形成实验检测细胞的成管能力,Real-time PCR法检测细胞的CD 31、vWF、α-SMA mRNA的表达,Western blot法检测细胞的Shh、Twist1、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白的表达。结果与模型组比较,Shh抑制组和siRNA-Twist1组的迁移和成管能力均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Real-time PCR及Western blot结果显示,与模型组比较,Shh抑制组和siRNA-Twist1组α-SMA mRNA及VEGF、MMP2蛋白的表达水平降低,CD 31、vWF mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制Shh/Twist1表达能显著降低大鼠肺动脉内皮细胞的内皮间质转化及血管重构能力。 展开更多
关键词 肺动脉高压 肺动脉内皮细胞 缺氧 内皮间质转化 血管重构 SHH TWIST1
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Notch信号与卡波西肉瘤相关疱疹病毒关系的研究进展 被引量:2
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作者 郑国霞 谭晓华 +1 位作者 齐燕 杨磊 《中国病毒病杂志》 CAS 2017年第5期394-398,共5页
卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)等肿瘤的病因。一系列研究显示KSHV病毒基因与Notch信号通路分子的交互作用在调控KSHV复制以及促进肿瘤发生中发挥了重... 卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)等肿瘤的病因。一系列研究显示KSHV病毒基因与Notch信号通路分子的交互作用在调控KSHV复制以及促进肿瘤发生中发挥了重要作用。Notch信号传导通路由配体、受体、转录因子、效应分子等组成,相邻细胞间通过Notch信号调节细胞分化、增殖和凋亡、器官形成和形态发生等过程。本文就KSHV对Notch信号的调控以及Notch信号在KSHV复制及肿瘤形成中的作用作一综述。 展开更多
关键词 卡波西肉瘤相关疱疹病毒 NOTCH信号通路 复制调控 重组信号序列结合蛋白J KAPPA 内皮细胞间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition endmt)
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艳山姜挥发油通过Nrf2/Notch1信号通路抑制高糖诱导的内皮间质转分化 被引量:10
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作者 赵爽 何丽 +5 位作者 黄梅 张嫩玲 姜丰 沈祥春 李玲 张彦燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期99-105,共7页
目的:分析艳山姜挥发油(EOFAZ)抑制高糖(HG)诱导的内皮间质转分化(EndMT)的作用及其机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分析EOFAZ对HG诱导EndMT及氧化应激损伤的药效学作用,设定空白组,EOFAZ低、高剂量组(1,4μg·L-1),... 目的:分析艳山姜挥发油(EOFAZ)抑制高糖(HG)诱导的内皮间质转分化(EndMT)的作用及其机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分析EOFAZ对HG诱导EndMT及氧化应激损伤的药效学作用,设定空白组,EOFAZ低、高剂量组(1,4μg·L-1),高糖组(35 mmol·L-1),EOFAZ预孵育2 h后加入HG共同孵育72 h复制EndMT细胞模型。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测波形蛋白(vimentin)和血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的蛋白表达水平,血管生成实验检测细胞迁移能力以分析EOFAZ对EndMT的影响;采用2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧(ROS)水平的变化以及试剂盒法检测细胞内丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)的含量,以分析EOFAZ对氧化应激的影响;采用Western blot检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2)与Notch1的蛋白表达水平。通过腺病毒(AD)转染实现Nrf2的过表达,进一步分析EOFAZ抑制EndMT的作用机制,设定空白组,AD-Nrf2+EOFAZ组(4μg·L-1),AD-Nrf2组,高糖组(35 mmol·L-1),EOFAZ组(4μg·L-1)。Nrf2基因重组腺病毒过表达质粒感染细胞6 h,更换为正常培养基24 h,EOFAZ预孵育2 h后加入HG共同孵育72 h诱导EndMT。通过Western blot检测Nrf2,CD31,vimentin,Notch1和Snail的蛋白表达。结果:与高糖组比较,EOFAZ干预给药后明显上调HG诱导的CD31蛋白表达水平和下调vimentin蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),降低细胞迁移能力(P<0.01),同时降低ROS和MDA的水平(P<0.05,P<0.01),提高CAT和SOD的水平(P<0.01)。此外,EOFAZ干预给药能够显著上调抗氧化信号Nrf2的蛋白表达水平(P<0.01),下调Notch1的蛋白表达水平(P<0.01)。通过稳定的腺病毒转染HUVECs可实现Nrf2的高表达,Western blot结果显示,与高糖组比较,各给药处理组显著提高Nrf2和CD31的蛋白表达水平(P<0.01),显著下调vimentin,Notch1和Snail蛋白表达水平(P<0.01);与AD-Nrf2组相比,AD-Nrf2+EOFAZ组能够进一步上调Nrf2和CD31的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),降低vimentin,Notch1和Snail蛋白表达水平(P<0.01)。结论:EOFAZ可改善HG诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤,从而抑制EndMT,其作用与Nrf2/Notch1信号通路相关。 展开更多
关键词 艳山姜 挥发油 氧化应激 内皮间质转分化(endmt) 核转录因子E2相关因子2(Nrf2) NOTCH信号 蛋白免疫印迹法
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内皮间充质转化的研究进展
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作者 闫飞 侯新国 陈丽 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期382-384,共3页
内皮间充质转化(EndMT)即内皮细胞在促成纤维刺激下可获得成纤维细胞样表型。EndMT不仅参与人体心脏正常发育,还参与诸多疾病的发生发展。本文就近年来EndMT发生机制及其相关疾病研究进展作一综述,以期为临床相关疾病治疗提供新靶点。
关键词 内皮间充质转化 肿瘤相关成纤维细胞 糖尿病心肌病 糖尿病肾病
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