海洋菌株Mitsuaria sp.SH-50产嗜热性壳聚糖酶CsnSH50的酶学性质表征及其应用

实验室从中国海南滨海虾蟹养殖区泥土样品中筛选到一株高产壳聚糖酶的海洋菌株Mitsuaria sp.SH-50,优化后该菌株产酶时间仅为12 h,产酶活性可达26.6 U/mL。该研究对其胞外壳聚糖酶进行分离纯化和酶学性质表征并进行壳寡糖制备的小试放大试验,以期进一步明确该菌株在壳寡糖生产上的实际意义。结果表明:壳聚糖酶CsnSH50分子量约为41 ku,纯化后CsnSH50比酶活力为7462.50 U/mg,最适反应pH值为4.5,温度为75℃,在pH值2.5~8.5及温度低于50℃条件下稳定性较好。最适条件下,稀释后CsnSH50的最大反应速率Vmax=29.41 U/mL,米氏常数Km=1.71 mg/mL,1 mmol/L的K^(+)、Ca^(2+)、Cu^(2+)、Fe^(3+)、Mn^(2+)对CsnSH50的酶活力有明显正激活效应,10 mmol/L的Mn^(2+)对其正激活效应可达412%。TLC和ESI-MS结果表明:CsnSH50水解壳聚糖的最终产物主要为壳二糖、三糖、四糖。小试放大试验结果显示:制备5%(m/V)壳寡糖溶液时,壳聚糖溶液的初始pH值3.5,温度75℃,水解120 min时壳寡糖产率达到92.1%,产物平均聚合度为10.2。综上,CsnSH50具有酶活性高、热稳定性好、耐酸等特性,同时是一种鲜有报道的嗜热性壳聚糖酶,具有良好的工业应用潜力。

经皮椎间孔镜手术对不同椎间孔镜下分型腰椎间盘突出症的疗效分析

目的:探讨经皮椎间孔镜技术治疗不同椎间孔镜下分型腰椎间盘突出症的手术疗效。方法:对128例行经皮椎间孔镜手术的腰椎间盘突出症患者进行椎间孔镜镜下分型,共分为4种:压迫型、瘢痕型、钙化型、侧隐窝狭窄型;并采用视觉模拟评分法(visual analog scale,VAS)、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)、日本骨科协会评估治疗分数(Japanese Orthopaedic Association Scores,JOA)及Mac Nab标准评估手术疗效。结果:经过平均(10.5±3.7)个月的随访,各分型患者腰腿痛VAS评分、ODI评分较术前均明显减低,JOA评分较术前明显升高,MacNab标准评定疗效优良率95.31%,VAS、ODI、JOA差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:经皮椎间孔镜技术对不同椎间孔镜下分型腰椎间盘突出症均有显著疗效,合理利用该分型可以使该手术最大程度地缓解患者的症状,有效提高手术疗效,显著减少术后复发率。

复方苦参结肠溶胶囊治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎的研究

目的评价复方苦参结肠溶胶囊治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎(UC)的有效性、安全性。方法采用随机、单盲、阳性药平行对照方法进行研究,并做非劣效性检验。将16例UC患者随机分为2组:试验组服用复方苦参结肠溶胶囊,对照组服用柳氮磺胺吡啶片,均连用8周,将患者临床症状、结肠镜检查结果、病理变化及粪便常规作为有效性指标进行疗效评价,根据患者血尿常规、肝肾功能及心电图的变化结合不良事件进行安全性评价。结果治疗8周后,试验组与对照组总有效率分别为88%(7/8)和75%(6/8),临床疗效试验组与对照组总有效率均为88%(7/8),中医证候疗效试验组与对照组总有效率分别为100%和88%。试验组1例发生不良反应,对照组无一例发生不良反应。结论复方苦参结肠溶胶囊能有效治疗湿热内蕴型UC,并且具有良好的安全性。

Peptidase Activities of Tripeptidyl Peptidase Ⅰ (TPP Ⅰ): Exopeptidase and Endopeptidase

The defect of TPP Ⅰ causes a disease, late infantile neuronal ceroid lipofuscinosis（LINCL, CLN2）. To investigate the bio-activity of tripeptidyl peptidase Ⅰ （TPP Ⅰ ） from rat kidneys, the effects of digestion of angiotensin Ⅱ （Ang Ⅱ ） and a synthetic endo-type substrate（ Gly^1-Lys-Pro^5-lie-Pro^5-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys^10） via TPP I were ana- lyzed by HPLC and TOF-MS. The data suggest that the degradation rate of Ang I1 can reach 18. 2% by the rat TPP I and DRV（Asp-Arg-Val） can be released from N-termini of Ang Ⅱ within 16 h. In addition, the synthetic endotype substrate is cleaved at the same position between Phe6 and Phe^7. Accordingly, TPP Ⅰ shows two kinds of peptidase activities. One is a tripeptidyl peptidase activity and the other is a pepstatin insensitive carboxyl endopeptidase activity. Tripeptidyl peptidase activity and pepstatin insensitive carboxyl endopeptidase activity seem to be dual phases of one enzyme, TPP Ⅰ.

平面对接式边缘全瓷修复体修复后牙大面积缺损的短期临床修复效果

目的:采用平面对接式边缘的椅旁CAD/CAM全瓷修复体修复后牙大面积缺损,分析患者的短期修复效果。方法:回顾性分析椅旁CAD/CAM全瓷修复后牙大面积缺损患者的临床资料。共计患牙107颗,修复体均为平面对接式边缘,统计修复体类型。全部患牙均采用"改良美国公众健康服务标准"进行即刻检查以及12个月后的随访检查,比较即刻检查和复诊时修复体完整性、颜色匹配性、修复体固位、牙体完整性、邻接关系和牙周组织健康的A级构成比。结果:修复体包括32个髓高嵌体和75个髓超嵌体。即刻与复诊检查时各项指标的A级构成比比较,髓高嵌体的修复体完整性由100%下降至96.88%,颜色匹配性由84.38%增加至93.75%;髓超嵌体的修复体固位由100%下降至98.67%,颜色匹配性由89.33%增加至92.00%;2类修复体的基牙完整性、邻接关系及牙周组织健康A级构成比均保持100%;修复失败患者包括1例髓超嵌体脱落和1例髓高嵌体折裂。结论:对于大面积缺损的后牙髓高嵌体和髓超嵌体修复,采用平面对接式的边缘设计短期修复效果稳定,是较为理想的修复方式。

来自Yeosuana marina sp.JLT21内切型海藻酸裂解酶的异源表达及酶学表征

褐藻寡糖有着丰富的生物学功能,酶法制备功能性褐藻寡糖具有重要实践应用价值。为发掘高活性及稳定性的褐藻寡糖制备酶,对浅海热液嗜热菌Yeosuana marina sp.JLT21中的海藻酸裂解酶YMA-1的基因在大肠杆菌中进行表达、纯化及酶活鉴定。结果发现YMA-1由306个氨基酸残基构成,是多糖裂解酶家族7(PL7)新成员;重组YMA-1酶的最适催化条件是55℃,pH 9.0,比活力1.3×10^(4) U/mg,Cu^(2+)可有效促进酶活;在37℃,pH 9.0条件下,该酶对海藻酸钠、聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛酸的比活力分别达到(5201.21±86.46)U/mg、(6399.73±253.12)U/mg和(3751.68±116.25)U/mg,酶解海藻酸钠终产物多为不饱和三糖和四糖,表现出内切双功能型海藻酸裂解酶活性。YMA-1酶作为PL7家族中较宽底物谱、高活性及稳定性的内切海藻酸裂解酶,在高效绿色生产功能性褐藻寡糖上有着潜在应用价值。

津力达颗粒联合利拉鲁肽对胰岛素泵强化效果欠佳2型糖尿病的临床疗效及血脂和ET-1的影响

目的探讨津力达颗粒联合利拉鲁肽对胰岛素泵强化效果欠佳2型糖尿病的临床疗效及血脂和内皮素1(En-dothelin-1,ET-1)的影响。方法研究对象来源于2018年7月—2021年10月经胰岛素泵强化效果欠佳的2型糖尿病患者60例,依据随机编号法分入对照组和联合组各30例。对照组采用利拉鲁肽;联合组采用津力达颗粒联合利拉鲁肽,持续用药3个月。治疗前和治疗3个月抽血测定餐前血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平。治疗3个月后评价两组的临床疗效,记录不良反应状况。结果与治疗前比,两组治疗3个月FBG、PBG、HbA1c和HOMA-IR水平均下降,而且联合组治疗3个月FBG、PBG、HbA1c和HOMA-IR水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比,两组治疗3个月血清TC、TG、LDL-C水平均下降,血清HDL-C升高;联合组治疗3个月血清TC、TG、LDL-C水平低于对照组,血清HDL-C高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比,两组治疗3个月血清ET-1水平下降,血清NO水平升高;联合组治疗3个月血清ET-1水平低于对照组,血清NO水平高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。对照组的总有效率(80.00%,24/30)低于联合组(96.67%,29/30),差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论津力达颗粒联合利拉鲁肽可以进一步提高胰岛素泵强化效果欠佳2型糖尿病的临床疗效,改善糖脂代谢和内皮细胞功能,安全性高,值得大力推广。

海洋细菌Thalassomonas sp.LD5中新型褐藻胶裂解酶TsAly7C的研究

目的对来源于Thalassomonas sp.LD5的褐藻胶裂解酶TsAly7C进行研究,以期获得具有优良性质的褐藻胶裂解酶,适应工业需求。方法在生物信息学分析的基础上,对TsAly7C进行了重组表达和酶学性质研究。结果通过生物信息学分析,TsAly7C属于PL7家族的第一亚家族。对重组TsAly7C(rTsAly7C)酶学性质进行分析,rTsAly7C的最适温度是30℃,最适pH为8.0(Na_(2)HPO_(4)-NaH_(2)PO_(4)缓冲液),在底物中添加300 mmol/L NaCl时降解能力最强。rTsAly7C的pH稳定性和温度稳定性较好,在0~30℃保存1 h仍保有80%以上的酶活,是1种适低温性褐藻胶裂解酶。Cu^(2+)、Co^(2+)、Zn^(2+)、Ni^(2+)和十二烷基硫酸钠(SDS)对rTsAly7C的酶活有明显的抑制作用。rTsAly7C是1种双功能褐藻胶裂解酶,以内切形式裂解褐藻胶产生不饱和二糖和单糖。