mRSD-9基因参与细胞内吞功能的初步研究

目的:对新基因mRSD-9功能进行初步研究。方法:应用免疫共沉淀结合免疫荧光共定位技术对mRSD-9和endophlin 3的相互作用进行验证;ATP/GTP结合实验及体外网格蛋白释放实验对mRSD-9参与细胞内吞进行初步研究。结果:(1)过量表达的Myc-mRSD-9能被Flag-endophilin 3共沉淀,反之,过表达的Flag-endophilin 3也能被Myc-mRSD-9共沉淀。并且在激光共聚焦显微镜下mRSD-9-GFP融合蛋白与endophilin3-RFP融合蛋白在CHO细胞中共定位。(2)mRSD-9蛋白可以和ATP/GTP结合,而且结合是特异的,而突变体ΔmRSD-9则不能。(3)转染mRSD-9组细胞内吞转铁蛋白比周围未转染的细胞明显减少。而转染pDsRed1-N1-ΔmRSD-9组细胞内的转铁蛋白明显增多。结论:mRSD-9基因编码的蛋白可能对内吞具有抑制作用。