基于氨基酸及特征肽测定的不同产地鸡内金质量研究

目的:建立鸡内金氨基酸及特征肽的含量测定方法,对不同产地鸡内金进行质量评价。方法:采用高效液相色谱法对鸡内金的12个氨基酸类成分进行测定,同时采用超高效液相串联三重四级杆质谱法对鸡内金的2个特征肽进行测定,并采用偏最小二乘法分析(PLS-DA)对测定结果进行分析。结果:18批鸡内金的12种氨基酸成分总含量相对标准偏差(RSD)范围为2.84%~14.01%,鸡源多肽Ⅰ、鸡源多肽Ⅱ含量RSD分别为47.13%、14.62%,均呈现一定的波动,PLS-DA分析结果显示,3批产地山西和3批产地辽宁独自分为一类,9批产地山东与3批产地浙江的样品共同分为一类。结论:本研究建立的鸡内金氨基酸及特征肽的含量测定方法,能较好地评价不同产地的鸡内金质量,可为鸡内金及动物类药材的质量评价提供参考。

小儿复方鸡内金咀嚼片对幼龄大鼠28 d重复灌胃给药毒性研究

目的为小儿复方鸡内金咀嚼片临床安全用药的剂量设计和临床毒副反应监测提供参考。方法取幼龄SD大鼠120只,随机分为溶剂对照组(A组,羧甲基纤维素钠),小儿复方鸡内金咀嚼片低、中、高剂量组(B1组、B2组、B3组,六神曲鸡内金混合粉以生药计0.375,1.125,3 g/kg,相当于临床拟用剂量的6倍、18倍、48倍),按体质量每100 g灌胃给药1 mL,连续4周,恢复期30 d,给药结束和恢复期结束时剖杀,进行一般生理指标观察、临床病理学检查、组织病理学检查、神经行为测试。结果与A组比较,给药结束时雌鼠B1组的平均红细胞血红蛋白浓度显著降低(P<0.05);雌鼠B2组、B3组的甘油三酯均显著降低(P<0.05),雌鼠B3组的氯离子浓度显著升高(P<0.05),雌鼠B1组的钙离子浓度显著降低(P<0.05),雄鼠B1组的乳酸脱氢酶水平显著升高(P<0.05),雄鼠B3组的总胆固醇显著降低(P<0.05),雄鼠B1组、B3组的钠离子浓度均显著升高(P<0.05),但上述指标改变均无毒理学意义。各组大鼠组织病理学检查均未见与给药相关的蓄积性或延迟性毒性病理改变。结论小儿复方鸡内金咀嚼片未见明显毒性反应剂量为3 g/kg,相当于临床拟用剂量的48倍。

鸡内金药材及其伪品鉴别并质量研究

目的建立鉴别鸡内金药材及其伪品的方法,并研究药材质量。方法采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为Agilent Zorbax SB C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水(4∶1,V/V)-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃,进样量为2μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)绘制29批样品(正品18批,伪品11批)色谱图,确定共有峰并指认。采用SIMCA-P 14.0软件进行聚类分析,采用偏最小二乘法分析(PLS-DA)及主成分分析(PCA)法进行主成分分析与聚类。采用UPLC法测定指认出的成分含量,并比对鸡饲料主要成分与鸡内金药材的特征图谱,分析黄酮类成分来源。结果18批鸡内金药材特征图谱有9个共有峰,指认出其中4个黄酮类成分,包括染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素;聚类分析、PLS-DA法及PCA法均可将鸡内金药材及其伪品分别归类。鸡饲料主要成分与鸡内金药材图谱出现相同共有(特征)峰。结论所建立的方法可有效鉴别鸡内金药材及其伪品,初步推断鸡内金药材中黄酮类成分是因长期食用鸡饲料富集所得。

鸡内金多糖对高糖诱导的胰岛β细胞活性和Nrf2信号通路的影响

目的探究鸡内金多糖对高糖诱导后胰岛β细胞相关活性和对超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及核因子E2相关因子2(Nrf2)等相关指标所产生的影响。方法取胰岛β细胞MIN6,培养检测其活性后分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)正常糖处理4 h)、高糖组(高脂高糖处理1 h,33.3 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸)、鸡内金多糖低剂量组(20μmol·L^(-1)鸡内金多糖预处理4 h+高脂高糖处理24 h)、鸡内金多糖高剂量组(80μmol·L^(-1)鸡内金多糖预处理4 h+高脂高糖处理24 h),采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组细胞增殖率,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,分析细胞周期,细胞划痕实验检测MIN6细胞迁移功能,检测MIN6细胞培养液中SOD、MDA水平,免疫印迹法检测MIN6细胞中Nrf2、醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测MIN6细胞中Nrf2、HO⁃1、NQO1 mRNA表达。结果与正常组比较,高糖组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白均降低,MDA及细胞凋亡率升高(P<0.05);与高糖组比较,鸡内金多糖低剂量组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白升高、MDA及细胞凋亡率降低(P<0.05);与鸡内金多糖低剂量组比较,鸡内金多糖高剂量组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白升高,MDA及细胞凋亡率降低(P<0.05)。与正常组比较,高糖组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)升高,S、G_(2)/M降低(P<0.05);与高糖组比较,鸡内金多糖低剂量组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)降低,S和G_(2)/M升高(P<0.05);与鸡内金多糖低剂量组比较,鸡内金多糖高剂量组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)降低,S、G_(2)/M升高(P<0.05)。划痕结果显示,0 h各组空白区无差异;24 h高糖组空白区增大;鸡内金多糖低剂量组空白区域有所缩小;鸡内金多糖高剂量组空白区域总体显著变窄。结论鸡内金多糖能够促进胰岛β细胞MIN6的增殖,抑制其凋亡,可能与抑制Nrf2等相关通路相关。

三金通淋排石颗粒质量标准的研究

目的 通过色谱法建立三金通淋排石颗粒质量控制方法。方法 应用薄层色谱法对三金通淋排石颗粒中炒栀子和鸡内金进行定性鉴别;应用高效液相色谱法对三金通淋排石颗粒中栀子苷进行定量测定。结果 薄层色谱法能特征性地鉴别炒栀子和鸡内金,结果清晰,分离度好,阴性无干扰;高效液相色谱法测定栀子苷的含量,并进行方法学研究,精密度、重复性、稳定性均符合相关规定,栀子苷进样量在130.1~1301.1 ng(r=0.9992)范围内呈现良好的线性关系,平均加样回收率为98.75%,RSD为0.61%。结论 此实验方法操作简便易行,专属性强,准确度高,重复性好。为三金通淋排石颗粒质量标准的建立,提供了实验依据,可应用于三金通淋排石颗粒的质量控制。

鸡内金淀粉酶理化特性研究

目的寻找鸡内金淀粉酶的最佳炮制工艺和理化性质。方法50℃烘干后,用磷酸缓冲液提取鸡内金淀粉酶,分别在不同温度、pH值、不同金属离子处理下测定酶活力,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果鸡内金淀粉酶的最适反应pH、最适反应温度和最适底物浓度分别为8.67、50℃和1.8g/mL;实验条件下,以淀粉为底物的Km是0.92;Ca2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+等金属离子对淀粉酶活性有抑制作用;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条谱带,表明鸡内金中可能无淀粉酶同工酶存在。结论鸡内金炮制加工过程中要注意金属离子的影响。

鸡内金粘多糖碱提工艺条件的探索

以常用动物中药鸡内金为原料，用氢氧化钠为溶剂提取得到动物多糖（粘多糖）。碱提取法可以从组织中对粘多糖进行较完全的提取，但粘多糖分子有可能从断裂的一端被碱进一步降解，因此所用碱的浓度、碱解温度及时间都应优选。本实验研究了料液比，提取温度，提取时间和碱解浓度对提取率的影响。用响应曲面进行优化，最佳提取条件为：碱浓度1．5mol／L、提取温度45℃，提取时间50min，料液比1：25，此条件下提取率可达1．98％。

鸡内金蛋白质类成分的提取与测定

目的 优化鸡内金蛋白质类成分的提取工艺进行 ,并对提取物进行分析。方法 用碱提取鸡内金蛋白质类成分 ,并用紫外分光光度法、氨基酸自动分析仪、柱层析等对提取物进行理化性质的分析。结果 经碱提取可获得产率较高的鸡内金提取物 ;其分子量均一 ,并含有一定量的必需氨基酸。结论 提取工艺简单易行 ,其提取物是一种很有前途的糖蛋白。

高效毛细管蛋白电泳法对鸡内金和穿山甲的鉴别

目的对鸡内金及其混淆品,穿山甲及其炮制品两种动物药材进行鉴别。方法采用高效毛细管电泳(HPCE)法对药材中酸性、中性和碱性蛋白进行电泳分析。电解缓冲液为150mmol·L-1硼酸盐溶液(pH8.5);电压为20KV;温度20℃;紫外检测波长200nm;重力进样5s。结果鸡内金与其混淆品之间蛋白质HPCE图谱有明显的差异,可有效地加以区分。穿山甲与炮制品之间中性蛋白和碱性蛋白提取液的HPCE图谱基本一致,而酸性蛋白提取液的HPCE图谱有一定差异,可有效加以区分。结论高效毛细管电泳法可作为中药鸡内金,穿山甲的生药鉴别方法。

中药“四金”治疗泌尿系结石的研究进展

综述海金沙、金钱草、鸡内金、郁金("四金")4味药物的研究进展及其组方配伍治疗泌尿系结石的相关文献报道,以明确中药"四金"治疗泌尿系结石的作用机制,更好地指导临床用药。

鸡内金活性炭对酸碱性染料的吸附

以鸡内金(ECGG)为原料,在氩气保护下,先在450℃下高温炭化,后添加KOH作为活化剂,分别选取800、900、1 000℃作为活化温度,制备出3种类型活性炭(ECGG-800、EGGG-900和EGGG-1000).对3种类型活性炭表征分析,并选取ECGG-900做酸性品红和亚甲基蓝的吸附饱和,进行2种最常用的吸附模型Freundlich和Langmuir的拟合.结果表明,用Freundlich吸附等温线模型能解释鸡内金活性炭对酸性染料的吸附;而对于碱性染料的吸附,则Langmuir吸附等温线模型更有说服力;且该活性炭对酸性品红、亚甲基蓝的吸附量分别可达1.682 g/g和2.045 g/g.随着吸附时间的延长,3种活性炭对染料的去除率也随即增大.鸡内金活性炭对处理酸性和碱性染料效果均佳,是一种具有发展潜力的吸附剂.

鸡内金治疗石淋之探讨

目的：探讨鸡内金治疗石淋的作用机理及临床应用。方法：检索近十年鸡内金治疗石淋的文献（2003~2013年）。结果：临床治疗石淋时多在大剂量使用金钱草的基础上加用鸡内金以化石消坚。结论：鸡内金治疗石淋不仅可以提高临床疗效,还可以改善体质,降低复发率,值得进一步研究。

鸡内金化学成分及药理作用研究进展

鸡内金作为一味药食同源两用之品,是由雉科动物家鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)的沙囊内壁干燥制得,其含有多种化学成分,且具有多种药理作用。现就鸡内金的化学成分、药理作用等方面的研究进展进行综述,为鸡内金未来的研究、开发、利用提供参考。

肾石通丸质量标准的研究

目的:研究肾石通丸的质量标准。方法:薄层鉴别木香、鸡内金、金钱草;RP-HPLC法测定丹参中丹酚酸B的含量。含量测定采用Waters C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59),流量1 mL.min-1,检测波长286 nm。结果:薄层鉴别阴性对照均无干扰;含量测定丹酚酸B在0.054 67～2.186 69μg范围内有良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为99.0%(n=6)。结论:所建方法简单、可靠,可用于肾石通丸的质量控制。

山楂鸡内金软糖对大、小鼠消化功能的影响

目的:探究山楂鸡内金软糖对大、小鼠消化功能的影响。方法:实验期间,每天给大、小鼠灌胃0.83 g·kg^(-1)、1.67 g·kg^(-1)、5.00 g·kg^(-1)剂量的山楂鸡内金软糖1次,连续30 d,进行小鼠小肠运动实验、大鼠消化酶测定实验。结果:与对照组相比较,在小鼠小肠运动实验方面,高剂量组小鼠墨汁推进率高于模型对照组,差异有极显著意义(P<0.01),说明山楂鸡内金软糖对小鼠小肠运动有增强作用;在大鼠消化酶测定实验方面,3个剂量组大鼠胃蛋白酶活性单位、胃蛋白酶排出量均高于对照组,差异有极显著意义(P<0.01)。结论:山楂鸡内金软糖对大、小鼠消化功能具有促进作用。

鸡内金多糖对尖吻鲈幼鱼生长、消化、肠道抗氧化能力和血清生化指标的影响

该研究探讨了鸡内金多糖(Polysaccharide from Endothelium corneum gigeriae galli, PEGG)对尖吻鲈(Lates calcarifer)幼鱼生长、消化、肠抗氧化能力和血清生化指标的影响,以为PEGG在尖吻鲈健康养殖中的应用提供参考依据。在饲料中添加0 (对照组)、5 (低剂量组)、20 (中剂量组)和80 g·kg^(-1) (高剂量组)的PEGG饲喂体质量(11.85±1.66) g的尖吻鲈幼鱼8周。结果表明,相较于对照组,拌喂PEGG能:1)明显提高尖吻幼鱼终末体质量、增重率和特定生长率,且高剂量组差异显著(P<0.05);2)显著提升胃肠道中消化酶活性(P<0.05);3)改善肠道组织结构,皱襞高度、肌层厚度和皱襞宽度显著增加(P<0.05);4)提升肠道抗氧化能力,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶活性(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)浓度和总抗氧化能力(TAOC)显著升高,丙二醛(MDA)浓度显著下降(P<0.05);5)改善血清学指标,其中,各处理组胆固醇浓度显著降低,中剂量组谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性明显下降(P<0.05)。综上,拌喂PEGG能够显著提升尖吻鲈幼鱼的消化和肠道抗氧化能力、改善血清生化水平,进而促进生长性能。在该实验条件下,PEGG最适添加量为20 g·kg^(-1)。

中药鸡内金的现代研究进展

鸡内金来源于雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus Brisson的干燥砂囊内壁,主要含有蛋白质、氨基酸、多糖等成分以及微量元素。作为药食同源中药,鸡内金不仅是一味消食化积的良药,在治疗口腔溃疡、石淋、腹泻、妇科疾病等方面也取得很好的疗效,具有广阔的药食开发前景。本文对鸡内金的来源、炮制加工、化学成分、质量评价、药理作用、临床应用以及综合利用等方面的研究进展进行了归纳总结,为其后续的深入研究及开发利用提供参考。

中西医结合治疗胆道感染胆石症

中西医结合治疗胆道感染、胆石症，非手术疗法采用三金汤为主的小总攻方案治疗，手术疗法则首选ｏｄｄｉ氏括约肌成形术，对其疗效及其特点作了讨论。

基于体外模拟消化与蛋白质组学技术的鸡内金研究与分析

目的:通过体外模拟消化研究与蛋白质组学技术,分析鸡内金的促消化作用及其蛋白质组成,为完善鸡内金质量评价体系提供参考。方法:采集市售鸡内金,鉴定其性别来源、测量其厚度、记录其颜色;利用静态多室多酶体外消化模型,考察不同性状鸡内金对底物消化率的影响,并利用蛋白组学技术鉴定鸡内金中蛋白质组分。结果:添加鸡内金后,底物干物质消化率与能量消化率分别增加了5.8%和8.2%;鸡内金颜色及原动物性别对底物干物质消化率与能量消化率均无显著影响;厚度与干物质消化率相关性显著(P<0.05),但未遵循线性规律。鸡内金厚度与淀粉酶活力呈极显著正相关(P<0.01),随厚度增加,淀粉酶活力上升。共从鸡内金中鉴定到1541种蛋白质,相对丰度较高的蛋白有胃动蛋白2、富含半胱氨酸的分泌蛋白、埃兹蛋白等。所测蛋白质主要富集在代谢、核糖体、碳代谢、蛋白酶体、三羧酸循环等京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路上,其中富集到代谢通路上的蛋白质最多(240种)。结论:体外模拟消化实验在一定程度上可体现鸡内金促消化能力,可为鸡内金或其他消食类中药质量评价提供参考;推测胃动蛋白2和埃兹蛋白与鸡内金健脾消食的功效有关。

鸡内金糖苷酶水解大豆异黄酮的研究

从鸡内金中分离得到鸡内金糖苷酶,以大豆异黄酮为水解底物,HPLC法测定大豆异黄酮的水解转化率。结果表明:鸡内金糖苷酶对大豆异黄酮苷(至少6种异构体)能进行有效水解,水解率达99%,结果为进一步研究鸡内金糖苷酶的水解特性奠定了良好的基础。