黄杞叶提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用

目的研究黄杞叶提取物对一次性全身4 Gy137Cs γ射线照射导致的小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。方法 (1)体外实验。采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)和2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基体外清除实验检测黄杞叶提取物的体外抗氧化能力。(2)体内实验。①存活实验。将40只无特定病原体(SPF)级雄性C57BL/6小鼠按照区组随机法平均分为4组:照射组、照射+黄杞叶提取物低剂量(20 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物中剂量(40 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物高剂量(80 mg/kg)组, 4组均进行全身一次性7.2 Gy(致死剂量)137Cs γ射线照射, 记录照射后30 d小鼠的存活情况。②造血系统辐射损伤防护实验。将60只SPF级雄性C57BL/6小鼠按照区组随机法平均分为6组:对照组、照射组、黄杞叶提取物高剂量组(80 mg/kg)、照射+黄杞叶提取物低剂量(20 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物中剂量(40 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物高剂量(80 mg/kg)组, 其中对照组和黄杞叶提取物高剂量组不照射, 其余4组均进行一次性全身4 Gy137Cs γ射线照射。照射后第7天处死小鼠, 取外周血进行血常规检测, 取单侧股骨骨髓细胞进行骨髓有核细胞计数, 取另一侧股骨骨髓细胞进行骨髓DNA含量检测, 取胸腺和脾脏计算脏器指数, 取肝脏检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量。体内实验中各组小鼠均于照射前7 d和照射后6 d连续灌胃给药, 其中对照组和照射组给予0.5%羧甲基纤维素钠, 其余各组给予相应剂量的黄杞叶提取物。组间两两比较采用Studentt检验, 存活率采用Kaplan-Meier生存分析。结果 (1)在体外实验中, 当浓度分别为100 μg/ml和200 μg/ml时, 与Trolox相比, 黄杞叶提取物对DPPH自由基的清除率更高(89.83%对69.37%, 90.94%对68.53%);对ABTS自由基的清除率也更高(94.81%对71.35%, 94.46%对71.93%), 且差异均有统计学意义(t=19.58~33.26, 均P<0.001)。(2)在体内实验中, 与照射组相比, 照射+黄杞叶提取物低、中、高剂量组小鼠30 d存活率均明显升高, 且差异均有统计学意义(Kaplan-Meier生存分析, 均P<0.05), 存活天数亦均明显增加[(19.40±7.70)d对(12.50±3.59)d、(20.20±8.48)d对(12.50±3.59)d、(20.90±7.96)d对(12.50±3.59)d ], 且差异均有统计学意义(t=2.57、2.79、3.04, 均P<0.05);照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠脾脏和胸腺的脏器指数明显升高[(2.13±0.43)mg/g对(1.67±0.20)mg/g、(1.87±0.39)mg/g对(1.39±0.31)mg/g] , 且差异均有统计学意义(t=3.00、3.03, 均P<0.05);照射+黄杞叶中剂量组小鼠红细胞数量增加最为明显[(10.12± 1.71)×1012/L对(8.26±0.87)×1012/L], 且差异有统计学意义(t=2.89, P<0.05);照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠白细胞、红细胞数量明显增加[(1.76±0.45)×109/L对(1.17±0.23)×109/L、(9.59±0.85)×1012/L对(8.26±0.87)×1012/L], 血红蛋白含量亦明显升高[(144.40±14.61)g/L对(126.20±13.16)g/L] , 且差异均有统计学意义(t= 3.62、3.23、2.93, 均P<0.05);此外, 照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓DNA含量和肝脏还原型GSH含量均明显升高, 且差异均有统计学意义(t=3.28、3.93、3.07, 均P<0.05)。结论黄杞叶提取物对小鼠造血系统辐射损伤有一定的防护作用。