聚酰胺颗粒分离纯化土茯苓总黄酮研究

目的:研究聚酰胺颗粒分离纯化土茯苓总黄酮的工艺条件。方法:以土茯苓总黄酮、落新妇苷、黄杞苷含量为指标,通过考察静态、动态吸附实验,筛选了聚酰胺颗粒分离纯化土茯苓总黄酮科学合理的工艺条件。结果:聚酰胺颗粒对土茯苓总黄酮的静态吸附2 h达到平衡,饱和吸附容量为144 mg/g;动态吸附时最佳上样量为128.125 mg/g,洗脱工艺为先以20 BV水洗脱,继以20 BV 95%乙醇洗脱,洗脱剂流速为1 BV/h,洗脱物中土茯苓总黄酮含量为71.84%,转移率为66.42%,落新妇苷含量为14.32%,转移率为75.50%,黄杞苷含量为1.08%,转移率为81.88%。结论:聚酰胺颗粒对土茯苓总黄酮吸附选择性高,操作简单,可用于土茯苓总黄酮的富集纯化。

正交试验优选土茯苓提取液的澄清工艺

目的考察Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂对土茯苓提取液的澄清工艺。方法采用正交试验设计,以HPLC法测定土茯苓中落新妇苷和黄杞苷保留率及澄清前后固形物清除率为考察指标,优选天然澄清剂的最佳工艺条件。结果Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂用于土茯苓提取液的最佳澄清工艺为先加入2%A组分,再加1%B组分,料液比1:10,澄清时间1 h,温度60℃。黄杞苷及落新妇苷保留率分别为98.71%和98.46%。结论Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂澄清方法较醇沉方法简单,活性成分损失少,适于土茯苓提取液的澄清工艺。

多指标综合评分法优选复方清血片的提取工艺

目的正交试验优选复方清血片的最佳提取工艺。方法采用正交试验设计法,以落新妇苷、黄杞苷、总黄酮的含量和浸膏得率为指标,考察乙醇浓度、提取时间、加醇倍量3个因素对乙醇提取效果的影响;以总多糖、没食子酸的含量和浸膏得率为指标,考察煎煮次数、煎煮时间、加水倍量3个因素对水提取效果的影响。采用层次分析法确定综合权重,对实验结果进行综合评价。结果复方清血片醇提的最佳工艺为10倍量70%乙醇,提取2次,每次2 h;最佳水提工艺为:加10倍量水,提取3次,每次1 h。结论验证试验表明优选出的提取工艺稳定,合理,可行。

菝葜高效液相色谱指纹图谱的建立

目的建立菝葜提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱测定方法,并同时对其中落新妇苷和黄杞苷的含量进行测定。方法采用DIKMA Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,体积流量1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长303 nm。结果落新妇苷和黄杞苷分别在0.08～20.52μg和0.08～20.28μg范围内线性关系良好,r分别为0.997和0.998。建立10个不同产地样品的HPLC指纹图谱。结论该方法准确、稳定、可靠,可用于菝葜的质量研究和评价。

高效液相色谱法测定菝葜散瘀颗粒中黄杞苷和落新妇苷的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定菝葜散瘀颗粒中落新妇苷、黄杞苷的含量.方法 色谱柱为Fortis Cortecstm C18（4.6mm×250mm,5μm）,0.05%KH2PO4-乙腈为流动相,梯度洗脱,液相流速1.0ml/min,柱温30℃,检测波长290nm.进样量20μl.结果 落新妇苷、黄杞苷分别在0.0022~0.044μg和0.0124~0.248μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,2种成分的平均加样回收率为97.0%、97.8%,RSD分别为1.61%,1.65%.结论 本方法灵敏度高、准确、重复性好、专属性强,可作为控制菝葜散瘀颗粒质量的重要方法.

土茯苓解重金属铅毒性物质基础的初步研究

目的探究土茯苓解重金属铅毒性的活性物质。方法以"总提取物-有效萃取部位-有效部位及有效成分"顺序逐一追踪解毒活性成分的研究思路,以急/慢性铅致小鼠毒性为动物模型,以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标,确认土茯苓解铅毒的活性部位。依据文献及前期化学研究基础,采用高效液相色谱(HPLC)法对活性部位进行主要成分分析。结果急性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总提物组和醋酸乙酯组小鼠血液、肝和肾脏中铅含量显著降低(P<0.05);血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量有所降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性有不同程度提高(P<0.05);小鼠肝和肾损伤程度均有改善。慢性铅中毒实验结果显示,与模型组相比,土茯苓总黄酮低、中、高剂量组小鼠血液、肝和肾脏铅含量均有下降(P<0.05),且呈剂量相关性;小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均有不同程度地降低(P<0.05),并以土茯苓总黄酮高剂量组最为显著;小鼠肝和肾损伤程度均有所改善,且土茯苓总黄酮高剂量组组织结构趋近正常。新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物为总黄酮部位的主要成分,占总黄酮的58.89%。结论土茯苓醋酸乙酯部位对铅致小鼠急性毒性有显著解毒作用,且醋酸乙酯部位优于总提物,提示醋酸乙酯部位为土茯苓解铅毒的有效萃取部位;土茯苓总黄酮具有较好的排铅作用,对铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用,且呈剂量相关性,提示总黄酮为土茯苓解重金属铅毒的活性部位。土茯苓总黄酮主要由新落新妇苷、落新妇苷、花旗松素、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷6个黄酮类化合物组成,提示上述化合物可能为土茯苓解铅毒的活性成分。