HT患者血清TGA、TPOAbRIA与ECLEIA对比

目的:研究用定量的方法检测患者体内自身抗体对不同症状桥本氏甲状腺炎(HT)的临床诊断价值。方法:应用增强化学发光酶免分析(ECLEIA)检测不同临床症状HT患者体内的甲状腺球蛋白抗体(TGA)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的含量,同时用RIA方法作对比。结果:HT伴甲亢组12例TGA含量:(621±245)IU/ml阳性率83.3%,RIA阳性率:66.7%;TPOAb含量:(452±203)IU/ml阳性率100%,RIA阳性率:75.0%;HT伴甲减组50例TGA含量:(1152±420)IU/ml阳性率94.0%,RIA阳性率:88.0%;TPOAb含量:(482±302)IU/ml阳性率96.0%,RIA阳性率:90.9%;HT伴甲功正常组63例TGA含量:(230±186)IU/ml阳性率58.7%,RIA阳性率:38.1%;TPOAb含量:(302±201)IU/ml阳性率92.1%,RIA阳性率:63.5%。结论:定量分析患者血清中TGA和TPOAb含量,大大提高了HT的诊断率,避免了把不同临床症状的HT患者漏诊或误诊。

黄芩甙、茜草素、茶多酚和Trolox抗氧化能力的增强化学发光研究

应用辣根过氧化物－鲁米诺－过硼酸钠－对碘酚增强化学发光体系测量了四种抗氧化剂清除苯氧自由基的能力，并与其清除超氧阴离子和抗鼠肝微粒体脂质过氧化的能力相比较，结果表明，这四种抗氧化剂在不同系统中都有明显的抗氧化能力，抗氧化剂清除苯氧自由基比清除超氧阴离子的能力更接近于抗鼠肝微粒体脂质过氧化的能力，从而提示增强化学发光法在测定抗氧化剂的抗氧化能力上有良好的应用前景。

用夹心法化学发光免疫测定胰岛素

本文应用化学发光免疫测定法,以辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,采用夹心法,用鲁米诺-对碘苯酚-H_2O_2发光体系,测定0.0μU～30μU猪胰岛素,双对数标准曲线的相关系数为0.990,绝对检测限0.05μU,比国产胰岛素免放测定盒灵敏20倍。

S-TK1在乳腺癌患者新辅助化疗前后检测的意义

目的:探索乳腺癌患者新辅助化疗前后S-TK1含量的变化对预测新辅助化疗疗效的意义。方法:选取2007年7月到2007年12月中南大学湘雅医院乳腺科就诊的经巴德针穿刺病理证实的女性乳腺癌患者40例,均行新辅助化疗2～4个周期,新辅助化疗前(A1)及化疗两个周期结束后(A2)各留取一份血清标本。所有血清标本均采用化学发光点印迹法检测其S-TK1的含量。结果:乳腺癌患者行两个周期新辅助化疗后(A2组)S-TK1的含量为9.24±9.79pmol/L,明显低于新辅助化疗前(A1组)S-TK1的含量17.98±10.20pmol/L,差别有统计学意义(P<0.001)。总体临床客观反应(OR)组与无反应(NR)组新辅助化疗前后S-TK1含量减少的百分比分别为(65.71±20.25)%,(17.20±42.20)%,OR组明显高于NR组,差别有统计学意义(P<0.001),且Ⅱ期和Ⅲ期乳腺癌患者临床客观反应(OR)组S-TK1含量减少的百分比均明显高于无反应(NR)组,差别都具有统计学意义(P=0.013、0.007)。OR组与NR组新辅助化疗前S-TK1的含量差别无统计学意义(P=0.378)。结论:S-TK1的含量可以作为观察乳腺癌新辅助化疗疗效的指标,其与长期生存率的关系在进一步随访研究中。

流动注射化学发光增强法测定单宁酸

发现单宁酸对Luminol KIO4 Mn2 +碱性体系的化学发光有较强增敏作用 ,据此建立了流动注射化学发光增强法测定单宁酸的新方法。该法简单、快速、线性范围宽 ,测定单宁酸的检出限为 9× 10 -9mol/L ;线性范围为 3× 10 -8～ 5× 10 -6mol/L ,对于 1× 10 -6mol/L单宁酸测定的相对标准偏差 1 5 % (n =11)。应用于五倍子中单宁酸的测定 ,结果满意。

流动注射化学发光增强法测定奶粉中铁

在碱性条件下,KIO4氧化鲁米诺产生化学发光,本文系统讨论了Fe(Ⅱ)对鲁米诺-KIO4化学发光体系的影响,发现在一定条件下,Fe(Ⅱ)对鲁米诺-KIO4化学发光体系有较强的增强作用。据此建立了流动注射化学发光增强法测定铁的分析方法。该法测定Fe(Ⅱ)的线性范围为5.0×10-6～5.0×10-9mol/L,检出限为4.4×10-10mol/L。对2.0×10-7mol/L的铁(Ⅱ)进行11次平行测定,得该法的相对标准偏差为2.3%。应用于成功地用于奶粉中铁的测定,结果满意。

电化学发光免疫检测TSH,T3和T4之间相关性研究

目的观察电化学发光免疫检测血清TSH,T3,T4之间相关性。方法将515例临床标本分为治疗组和未治疗组进行TSH,T3,T4检测,并对此3项指标间相关性进行统计学分析。结果TSH/T3,TSH/T4,T3/T4之间的相关系数未治疗组分别为0.464,0.575,0.945,治疗组为0.229,0.262,0.868。结论此两组中TSH虽然与T3,T4间具有直线相关关系,但相关系数小,无医学意义;T3与T4间具有直线相关关系,且相关系数较大,具有一定的医学意义。

农产品中三唑磷农药残留化学发光酶免疫分析方法研究

运用棋盘法确定直接竞争CLEIA法抗体和酶标半抗原的最适工作浓度，以4-（咪唑-1-基）苯酚（4-IMP）作为增强剂，运用L2，（5^6）正交设计实验优化增敏液配方，建立了农产品中三唑磷农药残留的化学发光酶免疫分析方法。优化的最适工作条件：抗体包被浓度为2．0μg／mL，酶标半抗原浓度为0．006μg／mL；增敏液最佳配方为：6．4％DMF，0．01mmol／LpH9．0的Tris—HCl缓冲液，0．6mmol／L鲁米诺，2mmol／LH202，1mmol／L4-IMP。优化后方法灵敏度为0．489ng／mL，线性范围为0．16—20．00ng／mL，相关系数为0．9964。该方法能实现对苹果、节瓜、大米、柑橘、荔枝及甘蓝等样品中三唑磷残留的快速、灵敏检测，加标回收率为82．8％-118．4％，与GC—MS法的相关性（r2）为0．957。结果表明，该方法可用于农产品中三唑磷农药的快速筛查。

血清胸苷激酶1在肿瘤患者中的表达及临床意义

目的探讨血清胸苷激酶1(TK1)检测作为肿瘤细胞增殖标志物对肿瘤早期预测的意义,探讨血清TK1的含量与肿瘤病种、复发转移、临床分期及临床治疗效果评估的关系。方法应用酶免疫点印迹化学发光法测定144例肿瘤患者(肿瘤患者组)和67例健康对照者(对照组)血清TK1的水平,分析血清TK1与肿瘤患者各生物学行为参数的关系。结果肿瘤患者组和对照组在血清TK1水平及阳性表达率间的差异均有统计学意义(P<0.01),且TK1浓度与年龄呈正相关性(P<0.01)。肿瘤患者TK1的表达在不同病种之间的差异有统计学意义(P<0.05),有复发或转移的患者血清TK1阳性表达率与无复发或转移的患者比较差异有统计学意义(P<0.01),大肠癌及肺癌的Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期,各组血清TK1阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。大肠癌患者治疗后不同临床疗效(完全缓解,部分缓解,疾病进展)的患者血清TK1水平的差异有统计学意义(P<0.01)。结论 TK1可用于对恶性肿瘤的早期筛查。血清TK1检测可作为临床上对肿瘤增殖程度及复发监测的手段之一。

氧化锌修饰铅笔芯电极电致化学发光法测定苯酚的研究

采用滴涂法将氧化锌纳米颗粒滴涂在自制铅笔芯电极上制成氧化锌修饰铅笔芯电极,当以过硫酸根为共反应剂时,该修饰电极在氢氧化钠溶液中具有良好的电致化学发光(ECL)行为,对其发光机理进行了考察。基于苯酚对该修饰电极的ECL具有抑制作用,建立了一种测量苯酚的新方法,当苯酚浓度为2×10^(-8)~2×10^(-6)mol/L时,发光强度与苯酚浓度的对数呈线性关系,检出限为1×10^(-8)mol/L。该方法具有灵敏度高、方法简单、快速、稳定性好等优点,将其应用于工业废水中苯酚浓度的检测,回收率为96.5%~104.5%。

电化学发光法测定盐酸普鲁卡因

基于盐酸普鲁卡因对鲁米诺在中性介质中铂电极上电化学发光的催化增敏作用 ,建立了测定盐酸普鲁卡因电化学发光新方法。电化学发光强度与盐酸普鲁卡因质量浓度在 4 .0× 1 0 -7～6 .0× 1 0 -6g mL范围内有良好的线性关系 ,检测限为 2 .0× 1 0 -7g mL,相对标准偏差为 4 .4 %。

印刷碳电极电致化学发光法对多巴胺的测定

利用丝网印刷技术制备了碳印刷电极,采用浓NaOH溶液对该电极进行活化处理,处理后的印刷电极电荷传递阻抗明显降低,对铁氰化钾响应的峰电位差由400 mV降低至84 mV,峰电流逐渐增大,氧化与还原峰电流值之比接近1∶1,说明电极基本达到可逆.考察了电极处理前后[Ru（bpy）3]2＋的电致化学发光行为,其发光强度增大至原来的3.6倍.研究发现,在不加入共反应剂的硼酸盐-联吡啶钌缓冲体系中,多巴胺对该体系的发光行为有明显的增强作用,从而构建了多巴胺电致化学发光传感器.考察了pH值对该体系电致发光行为的影响.在最佳实验条件下,该体系的电致发光强度与多巴胺浓度的对数在一定范围内成正比,线性范围为1.0×10-10～5.0×10-7 mol/L,检出限为5.0×10-11 mol/L.将该方法应用于多巴胺注射液样品的测定,加标回收率为95％ ～ 102％.该方法具有电极制备简单、成本低、可批量生产、方法的灵敏度高和稳定性好等优点.

梅毒实验诊断中增强化学发光技术与其它血清学比对以及在急诊筛查流程的探讨

目的 通过分析梅毒螺旋体血清学比对试验,探讨增强化学发光技术（enhanced chemiluminescence technologies,ECT）在急诊化验室筛查流程.方法 增强化学发光技术与梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）法同时检测2013年4月～2014年5月间257例患者血清标本梅毒螺旋体抗体,二者不相符的检测结果,使用梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）进行验证.结果 ECT与TP-PA比对敏感度为98.9％,特异度为88％,二者具有较高的一致性（K=0.921,P＜0.05）;二者结果不符标本11例（4.28％）,ECT阳性TP-PA阴性的不符标本9例中,FTA-ABS IgG抗体9例均为阴性,RPR检测阳性1例;ECT阴性TP-PA阳性的不符标本2例,RPR检测与FTA-ABSIgG抗体均为阴性.经FTA-ABS验证后的ECT敏感度为100％,特异度为88.3％.结论 ECT敏感度高,特异度较好,且简便快速的方法学适用于急诊化验室梅毒血清学试验筛查.ECT阳性时,建议使用RPR检测以确定疾病的活动性.

食品中沙门氏菌的化学发光免疫快速检验

本文筛选出聚氯乙烯平片作载片固定细菌,再与一抗及 HRP 标记二抗温育,以化学发光免疫法测定了食品中沙门氏菌。以 P/N≥3作为阳性标准,测定了62份食品样品,结果与常规培养法相比,符合率为85.5%。如均不考虑增菌时间,用本法测定沙门氏菌仅需8～4h,约为传统方法所需时间的1/10。

快慢转法及不同滤膜和显色检测法在Western blotting中的应用分析

目的探讨快、慢转法及不同滤膜和显色检测法在Western blotting中的应用及各实验环节分析。方法采用MDA-MB-231细胞制备细胞蛋白,应用不同印迹膜[硝酸纤维素膜、聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜]分别采用快转法和慢转法进行增强化学发光法(ECL)和DAB化学显色法检测,并对Western blotting的各实验环节进行了分析。结果(1)在快、慢转法中硝纤膜的蛋白预染marker条带略强于尼龙膜,而尼龙膜又略强于PVDF膜;PVDF膜和尼龙膜的正反面易于混淆,而硝纤膜的正反面不易混淆。(2)在快、慢转法中,PVDF膜的DAB化学显色法图像略强于尼龙膜和硝纤膜,而尼龙膜和硝纤膜无明显差异;与慢转法相比,快转的硝纤膜和尼龙膜中的蛋白条带略呈波浪状。(3)在慢转法中三种膜化学发光法的图像无明显背景,但在快转法中尼龙膜的背景较明显,而硝纤膜和PVDF膜亦无明显背景。结论应根据实验需要选用不同的印迹膜;慢转法通常优于快转法,增强化学发光法优于DAB化学显色法;增强化学发光法特异胜强、灵敏度高,是分析蛋白质表达较为理想的方法。

鲁米诺-铁氰化钾化学发光体系测定间苯二酚

在碱性条件下,铁氰化钾(K3Fe(CN)6)氧化鲁米诺(Luminol)产生化学发光,间苯二酚对该体系的化学发光有显著的增强作用.基于此,并结合流动注射技术,建立了测定间苯二酚的新方法.该方法具有很高的灵敏度,检测限为5.7×10-9kg/L(IUPAC),线性范围为1.0×10-8～1.0×10-6kg/L,对1.0×10-7kg/L间苯二酚标准溶液平行测定11次,其相对标准偏差为3.8%.

鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光体系研究

采用流动注射-化学发光(FI-CL)联用技术系统研究了19种酚类化合物对鲁米诺-铁氰化钾(lumi-nol-K3Fe(CN)6)体系化学发光的影响,发现其大部分能抑制或增强体系化学发光强度,且抑制或增强化学发光强度的能力与化学发光体系溶液的介质、pH值以及酚类化合物的浓度、分子结构等有关;根据化学发光光谱和紫外-可见吸收谱,讨论了体系化学发光强度抑制或增强的机理,推测抑制或增强可能是由于酚类化合物的氧化反应及瞬时产物影响了鲁米诺化学发光反应通道;若联接分离技术,鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光体系具有同时测定数个酚类有机化合物的潜力.

聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

目的 建立聚合酶链反应 -增强化学发光法 (polymerasechainreaction enhancedchemilumine cence ,PCR ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法。方法 以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的 4 19bp片段为靶序列 ,PCR体系经优化 ,直接酶标法标记探针 ,增强化学发光检测 (ECL)进行分子杂交。结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性 ,PCR体系灵敏度为 5fgDNA分子。ECL体系灵敏度为 0 .5pgDNA分子。采用模拟痰样 ,可检至 10个以下结核杆菌。结论 建立了结核杆菌的PCR ECL快速检测方法 。

用化学发光法测定辣根过氧化物酶几种体系的研究

作者采用四种体系,确定了用化学发光法测定辣根过氧化物酶(HRP)的最佳测定条件和操作步骤。用鲁米诺-H_2O_2(NaOH)可以方便地测定0.05～4pmol HRP,绝对检测限16fmol。用邻苯二酚-H_2O_2(pH6.5)体系可测定0.1～100pmol HRP,绝对检测限3～17fmol。用鲁米诺-H_2O_2-对碘苯酚(pH8.5)体系,可由1分钟时的光强度测定10～50fmol HRP,绝对检测限10fmol。用对羟基联苯代替对碘苯酚,测1或3分钟时的光强度可测定6～40fmol HRP,绝对检测限6.5或3.3fmol.

增强型酶催化发光免疫分析法高灵敏测定血清中心肌肌钙蛋白Ⅰ

基于辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2-Luminol系统,对一种新型酚类衍生物4-(1,2,4-三氮唑-1-基)苯酚对化学发光的增强作用进行了研究.用HRP标记急性心肌梗死标志物心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)单克隆抗体,通过cTn Ⅰ的双抗体夹心免疫反应,建立了简单、灵敏和快速检测人血清中的cTn Ⅰ含量的增强型酶发光免疫分析方法.实验结果表明,cTn Ⅰ在1.2 ～ 24 ng/mL浓度范围内与增强型发光强度具有良好的线性关系(R=0.99),变异系数(n=8)为4.7％.最后,使用该方法对人血清样品中的cTn Ⅰ含量进行测定,测试结果具有较好的稳定性和精度,能够满足临床检测要求.