多聚酶链反应分析溶组织内阿米巴的致病性

从急性阿米巴痢疾患者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴虫株SH-3、SH-6、SH-8的DNA和包囊携带者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴 SH-5、SH-7的 DNA应用多聚酶链反应技术扩增30个周期后作琼脂糖凝胶电泳分析,发现致病性引物 P_(11)、P_(12)可使SH-8虫株的DNA增殖;而非致病性引物P_(13)、P_(14)可使SH-3、SH-5、SH-6和SH-7虫株的DNA增殖。另外,酶株群分析和单克隆抗体反应也显示SH-8为致病性虫株,而另4株虫株均属于非致病性虫株,与多聚酶链反应的结果相一致。提示,致病性虫株与非致病性虫株的基因有区别,多聚酶链反应对溶组织内阿米巴进行基因分析是一种敏感和特异的新方法。

我国某些地区溶组织内阿米巴酶株群的分布

对来源于北京、天津、福建等地急性阿米巴痢疾患者和包囊携带者粪便中的5株溶组织内阿米巴的磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、己糖激酶(HK)和L-苹果酸:辅酶Ⅱ氧化还原酶(ME)的同工酶谱进行比较分析。结果表明:5株溶组织内阿米巴均属于致病性的酶株群ⅩⅣ。提示,我国主要的致病性溶组织内阿米巴的酶株群是酶株群ⅩⅣ。

单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴的致病性

用由溶组织内阿米巴致病株（ＨＭ－１：ＩＭＳＳ）为免疫原诱导产生的特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）４Ｇ６，与从急性阿米巴痢疾患者或包囊携带者分离的溶组织内阿米巴（Ｅｈ）滋养体进行间接荧光抗体反应和淀粉凝胶电泳同工酶分析。显示，从有发热、腹泻、脓血便患者体内分离的虫株与ＭｃＡｂ４Ｇ６出现阳性反应，滴度达１：５１２０；同工酶分析也属于致病性酶株群Ⅱ。而有发热、腹泻、无脓血便患者体内分离的虫体与ＭｃＡｂ４Ｇ６均为阴性反应，且为非致病性酶株群Ⅰ。提示，致病性虫株与非致病性虫株的免疫原性不同，应用本法可准确鉴别致病性虫株，且简便、价廉、快速，还可用于流行病学调查。

溶组织内阿米巴同工酶的初步研究

用3株溶组织内阿米巴及1株侵入内阿米巴以琼脂糖凝胶电泳法检测其四种酶的同工酶,即:苹果酸酶、葡萄糖磷酸异构酶、磷酸葡萄糖变位酶、己糖激酶,以酶谱来区别不同的酶株群。结果显示:3株溶组织内阿米巴与侵入内阿米巴的同工酶谱有显著差异,但3株溶组织内阿米巴的酶谱几无差异,属于强致病的酶株群ⅩⅣ,对来源不同的溶组织内阿米巴,却属同一酶株群的原因进行了讨论。