产气肠杆菌几丁质酶的分离纯化及性质研究

从自然罹病死亡的草原毛虫 (Gynephorapruoergnesis)体内分离到一株产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes) ,它在几丁质的诱导下能产生较高活性的几丁质酶。发酵液经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析和SephadexG - 1 0 0柱层析分离出几丁质酶。用SDS PAGE测得该酶的分子量为 42 5kD。水解几丁质的Km 值为 2 88mg/mL- 1 。酶反应的最适温度为55℃ ,最适pH值为 6 0 ,金属离子对几丁质酶活性影响较大 ,其中Zn2 +、Ba2 +、Ca2 +和Mn2 +对酶有较强的激活作用 ,而Hg2 +、Co2 +和Mg2 +则有较强的抑制作用。

产气肠杆菌EAM-Z1尿苷磷酸化酶的分离纯化及性质研究

从产气肠杆菌 (Enterobacteraerogenes)突变株EAM Z1中分离出一种具有较高转移酶活性的尿苷磷酸化酶 (UPase)。经测定这种Upase的分子量为 1 2 .8× 1 0 4,亚基分子量为 4 .3×1 0 4,由 3个同型亚基组成。N端氨基酸序列为 :MRMVDLIATKRDGGE。等电点为 4 .46。对尿苷的Km为 0 .2 9mmol L。酶反应的最适pH为 7.8,最适温度为 50℃。该酶能磷酸化尿苷、胸苷、5 氟尿苷、2′ 脱氧 5 氟尿苷及尿嘧啶 β D 阿拉伯呋喃糖 ,且具有较高的转移酶活性 ,能将尿苷和 5 氟尿嘧啶转化成 5 氟尿苷 (一种抗癌药物的中间体 ) ,其转化率为 47%。该酶的这些特性对于酶法合成核苷类抗肿瘤药物和抗病毒药物是十分有用的。

一株产生几丁质酶细菌的分离与鉴定

作者从草原毛虫的尸体中，分离到一株能产生较高活性几丁质酶的细菌，该菌所产生的几丁质酶可抑制几种植物病原真菌的生长，对防治蝗虫具增效作用．经鉴定确认，该菌属肠杆菌属，是产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒａｅｒｏｇｅｎｅｓ）的一个变种．