侵袭性大肠杆菌诊断方法的初步研究

105株EIEC血清凝集的大肠杆菌,其生化、血清、侵袭力测定、质粒检测及侵袭性基因探针杂交试验结果表明:赖氨酸脱羧酶试验阴性、动力阴性(包括O_(124):H30动力阳性株)、EIEC血清凝集的大肠杆菌,属于EIEC。此实验结论与杨正时提出的观点相一致。以赖氨酸脱羧酶试验、动力试验和血清学试验诊断EIEC为该病流行病学调查、临床实验诊断提供了方便。

哈尔滨市部分鲜奶中致泻性大肠埃希氏菌的分离与鉴定

为了解哈尔滨市鲜奶中致泻性大肠埃希氏菌(E.coli)的病原学特征,分别在10家奶站和牛场采集鲜奶共550份,通过菌落形态、生化特性、血清型及动物实验等一系列的鉴定,确认为致泻性大肠埃希氏菌的为5株。其中3株为肠致病性E.coli(EPEC),2株为肠侵袭性E.coli(EIEC)。

多重实时荧光PCR检测三种致泻性大肠埃希菌和志贺菌方法的建立

目的:建立一种多重实时荧光PCR同时检测EPEC、EIEC、EHEC三种致泻性大肠埃希菌和志贺菌的方法。方法:于GenBank数据库中查找三种致泻性大肠埃希菌及志贺菌毒力基因stx1、stx2、eaeA及ipaH基因序列并使用软件进行比对后设计四套引物及探针,建立四重实时荧光PCR检测EPEC、EIEC、EHEC和志贺菌的方法,并对方法反应体系及反应条件进行优化,对方法的特异性、敏感性及重复性进行分析。结果:显示该方法具有检测灵敏度高、特异性强,结果与细菌培养结果完全一致,均为100%。结论:四重实时荧光PCR检测体系可同时检测EPEC、EIEC、EHEC和志贺菌,具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可广泛应用于临床检验、卫生检验、食品检验等领域,对快速有效的实施针对治疗,预防食物中毒,保障公众健康具有重大意义。

婴幼儿腹泻致泻大肠埃希菌PCR毒力基因检测

目的:了解引起2007年浙江省婴幼儿腹泻的致泻性大肠埃希菌EIEC、EPEC、ETEC血清型分布情况及其毒力基因携带状况。方法:将粪便接种到不加新生霉素的EC肉汤中,增菌后用EMB分离培养,可疑菌经生化鉴定后,进行血清学分型;根据不同血清型,以PCR检测相应的毒力基因。结果:200份腹泻粪便标本中共分离出EIEC 6株、EPEC 25株、ETEC 20株,其检出率分别为3.0%、12.5%、10.0%。其中EIEC侵袭质粒抗原H基因(ipaH)阳性1株,检出率为16.7%(1/6);EPEC束状菌毛A基因(BfpA)阳性9株,检出率为36.0%(9/25),其中携带紧密粘附素(eaeA)的2株,检出率为8.0%(2/25);ETEC耐热肠毒素(ST)阳性1株,检出率为5.0%(1/20),不耐热肠毒素(LT)未检出。结论:我省2007年引起婴幼儿腹泻的主要致泻性大肠埃希菌为携带BfpA毒力基因的O1、O126型EPEC;因此,有必要在传统细菌鉴定的基础上,增加对致泻大肠埃希菌进行PCR毒力基因检测,为进一步确诊和防控致泻大肠埃希菌引起的婴幼儿腹泻提供更有力的实验室依据。