灰树花水溶物对EV71病毒的抑制作用

【目的】探讨灰树花水溶物(GFWE)的化学成分及其对EV71病毒的抑制作用,为促进灰树花综合利用、提高其经济附加值,以及开发预防和治疗EV71病毒感染的功能性食品提供依据。【方法】采用色谱法测定了GFWE的主要化学成分组成、多糖组成和分子质量。基于体外细胞培养采用CCK-8法确定了GFWE的安全上样量;以EV71病毒感染Vero细胞为模型,探究GFWE对EV71病毒的抑制率及对Vero细胞形态的影响,并采用荧光定量PCR检测了EV71病毒衣壳蛋白(VP1)编码基因mRNA的表达水平,初步评价了GFWE对EV71病毒的抑制作用。【结果】GFWE主要由低分子质量多糖、氨基酸、肽及其衍生物组成。GFWE富含的13种氨基酸中包含7种必需氨基酸;其多糖由葡萄糖、半乳糖、盐酸氨基葡萄糖和古罗糖醛酸4种单糖组成,物质的量比为0.907∶0.038∶0.029∶0.026,重均分子质量分别为15.67、10.10、6.60 ku和<1.00 ku。GFWE表现出较高的抗EV71病毒活性,100、200μg·mL^(-1) GFWE对EV71病毒的抑制率分别为91.32%、91.83%,25~400μg·mL^(-1) GFWE能显著降低EV71 VP1 mRNA的表达水平。【结论】GFWE主要由低分子质量多糖、氨基酸、肽及其衍生物组成,具有较高的抗EV71病毒活性,能够抑制感染EV71病毒的Vero细胞中VP1的合成。

T淋巴细胞亚群、炎症因子在感染EV71的手足口病患儿病情评估中的应用

目的研究T淋巴细胞亚群、炎症因子在感染EV71的手足口病患儿病情评估中的应用。方法选取2022年3月至2023年3月我院收治的78例感染EV71的手足口病患儿为研究对象,根据潜伏期患儿疾病严重程度分为观察组(重症病例)和对照组(普通病例)各39例。两组均检测T淋巴细胞亚群、血清炎症因子水平,绘制受试者工作曲线(ROC)分析评估效能。结果观察组患儿的炎症因子水平高于对照组,CD3^(+)、CD4^(+)水平更低于对照组,CD4^(+)/CD8^(+)水平高于对照组(P<0.05);ROC结果显示:感染EV71的手足口病患儿IL-1、IL-6、TNF-α、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均存在病情评估价值(P<0.05,AUC>0.5)。结论不同病情感染EV71的手足口病患儿T淋巴细胞亚群及炎症因子存在差异,检测上述指标有助于临床病情评估。

学龄前儿童接种肠道病毒71型(EV71)疫苗状况及家长对其接种意愿影响因素

目的:分析学龄前儿童接种肠道病毒71型(EV71)疫苗状况及家长对其接种意愿影响因素。方法:研究选取本区2022年1月至2023年12月行健康体检学龄前儿童300例为研究对象,采集其疫苗接种状况,采用单因素及Logistic回归分析家长对学龄前儿童接种意愿影响因素。结果:300例学龄前儿童中,接种EV71型疫苗儿童71例,接种率23.67%。学龄前儿童EV71型疫苗接种情况单因素分析结果显示,学龄前儿童EV71型疫苗接种情况与性别、年龄、少儿医保、足月分娩、出生体质量、儿童来源以及是否顺产等因素无统计学意义(P>0.05);学龄前儿童家长对EV71型疫苗接种意愿单因素分析结果显示,学龄前接种EV71型疫苗儿童与未接种疫苗儿童的家长对手足口病认知程度、对EV71型疫苗了解程度、家长学历、家庭月收入等差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,家长对手足口病认知程度、对EV71型疫苗了解程度、家长学历、家庭月收入是影响其接种意愿的独立影响因素(P<0.05)。结论:学龄前儿童EV71疫苗接种率相对较低,家长对手足口病及EV71疫苗的了解程度、家长学历以及家庭月收入等是影响家长对学龄前儿童接种EV71疫苗意愿的独立影响因素。

HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价

为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。

梧州市城区5岁以下儿童家长手足口病认知与EV71疫苗接种意愿调查研究

调查研究梧州市城区5岁以下儿童家长对手足口病的认知水平与EV71疫苗接种意愿。方法 调查研究起于2021.05,止于2022.05,通过整群随机抽样从梧州市城区12家社区卫生服务中心抽取8家,对卫生服务中心接种门诊日当天带领儿童前来接受预防接种的5岁及以下儿童家长进行面访,填写调查问卷。本次共调研对象1663人。调查内容为儿童家长手足口病认知情况,并分析影响其疫苗接种意愿的影响因素。结果 梧州市城区5岁以下儿童家长对手足口病的认知水平一般,有待接受健康教育,提升相关知识知晓率。有近84%的家长愿意带领孩子接种EV71型疫苗,表示多数家长的预防意识较强。结论 手足口病是危害幼儿的主要传染疾病之一,为保障孩子健康生长和发育,家长应当积极了解疾病相关知识,提高认知水平,并通过多种渠道了解疾病及其预防措施,主动带领幼儿接种EV71疫苗,能够实现良好的预防效果。

直肠滴入中药对CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病的疗效

目的观察直肠滴入中药对CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病的疗效。方法选取2019年8月—2022年8月贵州水矿控股集团有限公司总医院CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病患儿85例,按照随机数表法分为观察组(42例)和对照组(43例),其中对照组患儿给予利巴韦林治疗,观察组患儿给予直肠滴入中药治疗。对比两组患儿治疗前后口腔疱疹、发热、皮疹等症状的评分,治疗前后患儿炎症因子、免疫指标水平及两组患儿治疗后不良反应发生率。结果治疗前,两组患儿的口腔疱疹、发热、皮疹评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组患儿的口腔疱疹、发热、皮疹评分均降低,并且治疗后观察组患儿的以上症状评分低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α均降低,并且治疗后观察组患儿的以上降低幅度大于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿CD4^(+)、CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均升高,CD8^(+)水平降低,并且治疗后观察组患儿的变化幅度大于对照组(P<0.05);观察组患儿不良反应发生率为4.76%,对照组患儿不良反应发生率为18.60%,观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论给予CoxA16、EV71肠道病毒感染手足口病患儿直肠滴入中药治疗,能减轻患儿临床症状及炎性反应,改善免疫功能,且不良反应少,值得借鉴。

EV71阳性手足口病患儿131例临床特征及其EV71疫苗接种的预防效果

目的分析EV71阳性手足口病患儿临床特征及其EV71疫苗接种情况,探索重症发生和接种EV71疫苗的预防效果的关系。方法回顾性分析昆明市儿童医院2020年1月1日至2022年12月31日确诊的131例EV71阳性手足口病患儿临床资料,选取临床确诊手足口病患者的粪便做肠道病毒核酸检测,对结果为肠道病毒通用型阳性并且EV71阳性手足口病患儿的临床病例资料及其EV71疫苗接种情况进行分析。结果检出的131例阳性病例中包括116例轻症和15例重症,其中80例接受电话咨询其EV71疫苗接种情况的患儿中,17例接种疫苗,63例未接种疫苗,接种疫苗的患儿皆为轻症患者,未接种疫苗的患儿中有6例为重症患者。2020至2022年,每年4~9月为EV71阳性手足口病检出率高峰期(χ^(2)=125.705,P=0.000),小于1岁及大于5岁患儿阳性检出率高于1~5岁年龄段患儿(χ^(2)=8.765,P=0.033),男女阳性检出率无明显差异(χ^(2)=1.221,P=0.269)。结论接种EV71疫苗对减少重症病例出现具有重要意义。结合目前云南昆明地区该疫苗接种率仍然偏低的情况,提示相关机构仍需继续加大EV71疫苗接种的宣传力度。

小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素喷雾剂治疗EV71感染手足口病患儿的疗效及对核因子-κB、炎症因子的影响

目的:研究小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素(rhIFN)-α2b喷雾剂治疗EV71病毒感染手足口病(HFMD)患儿疗效及对核因子-κB(NF-κB)、炎症因子的影响。方法:回顾性分析我院收治的130例被EV71病毒感染的轻症HFMD患儿的临床资料及随访资料,根据治疗方法不同将患儿分为对照组和观察组各65例,对照组采用rhIFN-α2b治疗,观察组在对照组治疗基础上加用小儿豉翘清热颗粒治疗,比较两组患儿临床疗效,症状消退时间,治疗前后NF-κB、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10水平变化,肝肾功指标及药物不良反应。结果:与对照组比较,观察组临床疗效更高(P<0.05);观察组症状消退时间均短于对照组(P<0.05);与治疗前比较,两组患儿治疗后血清NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-10水平均有所降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组患儿治疗前后丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)水平均为正常范围,但观察组治疗前后肝肾功能指标差值低于对照组(P<0.05);两组患儿均未发现明显药物不良反应。结论:小儿豉翘清热颗粒联合rhIFN-α2b喷雾剂治疗EV71病毒致儿童HFMD,能够有效提高治疗疗效,降低NF-κB、炎症因子,且对肝肾功能指标影响小,安全性高,值得临床推广应用。

高明地区手足口病EV71的分子流行病学情况及核酸序列同源性的进化性分析

目的:探究高明地区手足口病肠道病毒71型(EV71)的分子流行病学,并对其核酸序列同源性进行进化分析。方法:选择2020年1月-2022年12月高明区人民医院及疾控中心提供来源于1547例手足口病患者的标本共1547份,采用荧光定量RT-PCR对标本进行肠道病毒核酸检测,并对其进行EV71、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、非EV71/CA16(N)分类,从时间、地区、年龄、性别、疾病类型5个方面对EV71病毒引起手术口病的分子流行病学进行调查,分离部分EV71毒株进行全基因测序分析,另采用生活信息学软件对病毒基因特征进行分析。结果:5-7月为EV71病毒引起手足口病高发时间;高明地区与佛山市其他地区EV71病毒引起手足口病病例占比无显著差异;≤1岁患者为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例占比分别为36.36%和36.28%;男性为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例男女比例分别为2.140∶1和2.092∶1。基于全基因序列构建亲缘进化树,分离的6株EV71毒株与C4亚型毒株具有最近的亲缘性和最高的同源性。结论:2021-2022年EV71病毒是高明地区手足口病流行的主要病原,EV71毒株属C4型且遗传性较为稳定。

EV71型手足口疫苗对儿童手足口病的预防效果分析

分析EV71型手足口疫苗对儿童手足口病的预防效果,旨意为相关人员的研究工作提供参考资料。方法 本实验选择2020.5.6~2021.5.6我院收治的200例不存在接种禁忌、年龄适合、自愿接种疫苗的小儿为研究样本。现结合就诊顺序差异性,分为新式组100例、传统组100例。新式组小儿接种EV71手足口病疫苗,传统组小儿不接受任何处理。分析结果。结果 传统组1年之内出现疾病的概率为 7.00%,新式组为1.00 %。和传统组相比,新式组患者1年内出现疾病的概率更低,组间数据存在统计学意义,P<0.05;新式组小儿接种后0.5h、3d和28d之后,新式组小儿只出现了轻度局部表现和全身表现。不良反应事件等级不高。结论 在适龄儿童群体中,为其接种 EV71型手足口疫苗能取得满意的疾病预防成效,安全性强,其属于当前阶段用于预防手足口病的重要举措,该法值得进一步在临床内推广应用。

外泌体包裹的miR-19b抑制EV71复制的影响

[目的]探讨外泌体包裹的miR-19b对EV71病毒复制的影响,为EV71病毒的miRNA防治药物的开发提供参考.[方法]将游离的miR-19b-cy3.5分子和转染miR-19b-cy3.5的HT29细胞分泌的外泌体分别处理T98G细胞,观察进入细胞的效率;分别提取未处理的、转染mimic-n.c.和转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体,并给予T98G细胞孵育后,检测细胞内miR-19b的表达;分别以60 mg/L转染mimic-n.c.的HT29细胞分泌的外泌体、60 mg/L和40 mg/L转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体孵育T98G细胞并感染EV71病毒,检测病毒RNA载量;将携带包裹的miR-19b-cy3.5的HT29细胞来源的外泌体,通过尾静脉注射小鼠检测miR-19b在小鼠各个器官中的表达.[结果]miR-19b-cy3.5能够通过外泌体的形式进入T98G细胞中,而游离的miR-19b-cy3.5无法进入细胞;转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体在处理T98G细胞后,胞内miR-19b高表达,同时,外泌体处理后的T98G细胞中EV71病毒RNA复制量显著降低;动物实验中,外泌体包裹的miR-19b能够在小鼠的脑、肝及肺有效表达.[结论]外泌体包裹的miR-19b能够有效进入靶细胞中,并且可以抑制靶细胞中EV71病毒的复制;同时,外泌体包裹的miR-19b能够有效进入小鼠脑、肝以及肺等组织中并表达.

影响家长对学龄前儿童接种EV71疫苗意愿的因素

目的 分析家长对学龄前儿童接种肠道病毒71型(EV71)疫苗意愿的影响因素。方法 前瞻性选取郑州市第七人民医院2022年1—5月就诊的136例学龄前儿童家长作为研究对象,通过调查问卷方式,统计家长的接种疫苗意愿情况,并分析影响因素。结果 136例家长中同意小儿接种者81例(59.56%);不同受教育程度、家庭年收入、获得育儿信息途径、手足口病为严重传染性疾病认知状况、知道EV71疫苗能预防EV71引发首手足口病状况、知道EV71疫苗状况、孩子患手足口病状况、孩子过敏体质状况、疫苗安全担忧状况、疫苗自费状况、疫苗不良反应状况、疫苗预防疾病认可状况的学龄前儿童家长EV71疫苗接种意愿不同(P<0.05);经logistic回归模型分析结果显示,家长高中及以下受教育程度、家庭年收入<5万、孩子过敏体质、有疫苗安全担忧、疫苗自费、疫苗有不良反应、不认可疫苗预防疾病为学龄前儿童家长EV71疫苗接种意愿的独立危险因素,而家长从手机APP获得育儿信息、知道手足口病为严重传染疾病、知道EV71疫苗能预防EV71引发手足口病、知道EV71疫苗、孩子有患手足口病史为学龄前儿童家长EV71疫苗接种意愿的保护因素(P<0.05)。结论 学龄前儿童家长EV71疫苗接种意愿有待提高,且受家长受教育程度、家庭年收入、家长获得育儿信息途径、手足口病为严重传染性疾病认知状况、知道EV71疫苗能预防EV71引发手足口病状况、知道EV71疫苗状况、孩子过敏体质、有疫苗安全担忧、疫苗自费、疫苗有不良反应、不认可疫苗预防疾病、孩子有手足口病史等因素影响。

2010—2019年肇庆市手足口病流行特征及EV71疫苗接种效果分析

目的:分析肇庆市2010—2019年手足口病流行特征及肠道病毒71(EV71)型疫苗接种效果,为完善手足口病防控策略提供科学依据。方法:收集手足口病病例资料和EV71型疫苗接种情况,采用描述性流行病学方法分析三间分布、病原构成和疫苗接种情况,保护效果采用疫苗保护效力评价。结果:肇庆市2010—2019年手足口病年均报告发病率为314.77/10万,发病以≤5岁儿童为主。肇庆市2016—2019年EV71疫苗估算接种率为6.80%,疫苗推广后报告发病率、重症比例较低,接种EV71疫苗是EV71所致手足口病的保护因素,总保护效果为92.70%。结论:EV71疫苗上市后肇庆市手足口病发病率有所下降,但仍处于较高水平,目标儿童疫苗估算接种率较低,应推广及时全程接种EV71疫苗,并加强重点人群手足口病知识健康宣教和病原学监测。

EV71感染致不同临床类型手足口病患儿肠道菌群分析

目的分析EV71感染后不同临床类型的手足口病患儿肠道菌群的丰度、种群结构、群落变化,以探讨EV71感染引起轻症与重症手足口病患儿肠道菌群差异。方法筛选经咽拭子核酸检测EV71阳性的手足口病确诊患儿,根据疾病的严重程度分为重型组S和轻型组M,同时纳入健康体检儿童为对照组N,采集患者发病3天内的大便标本,提取粪便基因组DNA,经16S rDNA测序并进行生物信息分析。结果拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门是儿童肠道微生物群落中最丰富的菌群,拟杆菌门相对丰度在正常儿童中均值为47.72%,手足口病患儿中轻症为55.62%,重症为61.17%,呈逐渐上升的趋势;而厚壁菌门和变形菌门的相对丰度则是随着疾病严重程度的加重,逐渐下降,差异无统计学意义。Alpha多样性分析结果显示三组间ace指数差异有统计学意义,S组的物种多样性较M、N组明显降低。结论EV71感染导致手足口病重症可能与患者肠道菌群多样性降低有关。

2017~2021年儿童手足口病流行病学特征及EV71疫苗接种效果分析

目的分析手足口病(HFMD)流行病学特征及EV71疫苗接种效果。方法通过查阅我市HFMD网络报告资料与监测资料,统计我社区2017年1月~2021年12月HFMD发病情况,通过中心卫生院预防接种门诊疫苗接种登记系统统计EV71疫苗接种情况,分析HFMD流行病学特征、EV71疫苗接种效果。结果2017年1月~2021年12月,我社区累计确诊HFMD患儿77例,其中重症2例,无死亡病例,其中男性患儿46例,占比69.05%,女性患儿31例,占比30.95%,年平均发病率497.86/10万。流行病学分析显示:HFMD患儿男女比例为1.35:1,男性年平均发病率575.22/10万、女性年平均发病率406.88/10万,<3岁儿童为主要发表人群,每年HFMD发病均主要集中在3~5月、9~11月。HFMD病原学分布:EV-A71感染27例,占比35.06%,CV-A16感染42例,占比48.05%,其他类型感染13例,占比16.88%;其中2017年、2018年EV-A71感染率较高分别为59.09%、55.00%,2019年、2020年、2021年EV-A71感染率逐渐降低,但CV-A16及其他类型感染有升高趋势。2017年~2021年EV71疫苗接种率分别为8.49%、12.76%、16.26%、23.05%、31.88%,不同年份间比较差异有统计学意义(P<0.05);HFMD发病率分别为732.36/10万、651.04/10万、482.16/10万、377.83/10万、245.93/10万,不同年份间比较差异有统计学意义(P<0.05);EV-A71阳性率分别为432.76/10万、292.97/10万、160.72/10万、94.46/10万、30.74/10万,不同年份间比较差异有统计学意义(P<0.05);HFMD重症率不同年份间比较无差异(P>0.05)。结论HFMD多发生于男童、<3岁儿童,3~5月和9~11月是发病高峰期,积极接种EV71疫苗能够有效降低HFMD发生率及重症率,有效防控HFMD。

2010—2020年马尾区手足口病流行病学特征及EV71疫苗接种效果分析

目的通过探讨福州市马尾区手足口病流行特征与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)疫苗接种的效果,为寻找更有效的防控策略提供科学依据。方法收集2010年1月1日—2020年12月31日马尾区手足口病疫情监测数据和2017—2020年EV71疫苗接种资料,采用描述性流行病学方法进行流行特征和疫苗接种效果分析。结果2010—2020年马尾区报告手足口病总共5482例,重症54例,死亡1例,年均发病率为206.82/10万。除2020年外,其余年份发病高峰为每年4—7月和9—10月;男性发病率高于女性,发病年龄主要聚集在3岁以下(占68.88%),发病人群以散居儿童和幼托儿童为主;感染的病毒类型主要为其他肠道病毒,不同年份病原构成比差异有统计学意义(χ^(2)=165.06,P<0.001)。2017—2020年马尾区接种EV71疫苗共11231剂次,平均估算接种率为10.63%,总体接种率偏低。结论福州市马尾区手足口病疫情防控形势仍旧严峻,相关部门需在发病高峰、重点场所对低龄儿童有针对性开展健康宣教工作;疫苗接种能有效降低发病率和重症发生率,建议通过多渠道提高疫苗接种率。

OSA1基因多态性与EV71所致中枢神经系统感染的关系

目的分析EV71引起的中枢神经系统感染过程中,其感染机制是否与OSA1基因多态性存在关系,为临床预防感染制定相关措施提供参考。方法收集2018年3月至2021年10月在本院就诊的EV71感染者,以及体检健康儿资料,使用SNP scan分析OAS1 rs2660和rs1131454 SNP分型。结果本次研究共收集86名EV71感染患儿纳入至观察组,另外收集60名健康体检患儿纳入至对照组。rs2660、rs1131454的基因型和等位基因分布之间比较,P>0.05。在OAS1 rs2660基因SNP方面,与轻度组进行比较,受累组与之比较存在显著差异(P<0.05),其中受累组AG基因型频率明显更高,OR为2.27,95%CI分布范围为1.07~4.85,受累组GG基因型频率明显更低,OR为0.27,95%CI分布范围为0.08~0.97。而受累组OAS1基因SNP与对照组进行对比无显著差异(P>0.05)。结论OAS1基因rs2660 SNP与CNS参与EV71感染的易感性。携带OAS1的儿童rs2660 AG基因型在EV71感染后存在CNS受累风险性更高。

Construction of Plant Expression Vector for Hand,Foot and Mouth Virus EV71-VP1 Gene and Its Expression in Tomato

EV71-type virus is one of the main pathogens causing the occurrence of hand,foot and mouth disease(HFMD),and VP1 protein,a factor that directly determines the antigenicity of the virus,has been isolated.The tomato was selected as a bioreactor for the production of an edible EV71 vaccine designed for the VP1 capsid protein.Using molecular biology techniques,the fusion gene EV71-VP1 was cut from vector PGEX-4T-2,a vector containing the p2300-EV71 gene with CaMV35S promoter and TL regulatory elements was constructed,and the hypocotyl and cotyledons of tomato were transformed using Agrobacterium(EHA105)-mediated method,screened,elongated and rooted,and finally 20 resistant tomato plants were obtained.Five transgenic positive seedlings were obtained by digestion and PCR assay,among which three plants were detected by RT-PCR to be capable of transcriptional translation at the RNA level.The experimental results aimed to explore new material support for the preparation of transgenic plant oral vaccines against EV71 infection and provide a theoretical basis for accelerating the development of transgenic plant vaccines in the future.

维生素D辅助治疗对EV71型HFMD患儿的疗效和安全性分析

目的:探讨维生素D辅助治疗对EV71型HFMD患儿的疗效和安全性。方法:选取2019年3月—2022年3月我院收治的80例EV71型HFMD患儿作为观察对象,根据数字随机法将患者分为两组,每组40例。对照组接受常规对症治疗,观察组使用维生素D辅助常规对症治疗。比较两组患者临床治疗总有效率、临床症状改善时间和临床体征改善时间、白细胞介素-6(IL-6)水平、白细胞介素-10(IL-10)水平、白细胞介素-13(IL-13)水平以及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平、不良反应发生情况。结果:观察组临床治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组临床症状消退时间、临床体征改善时间以及住院时间均明显短于对照组(P<0.05);治疗前两组IL-6、IL-10、IL-13水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组IL-6、IL-10、IL-13水平均明显降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗前两组免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等指标水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组IgA、IgG、IgM指标水平均有所上升,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论:维生素D辅助治疗EV71型HFMD,可改善临床疗效、临床症状以及临床体征,减轻细胞因子水平,提高免疫功能指标水平,值得临床进一步深入研究。

以EV71抗原检测方法验证浅析生物制品生物效价检测方法学验证

目的:本文以对生物制品生物效价检测进行规范的《中国药典》2020年版新增9401指导原则为标准进行EV71抗原检测方法的验证,进一步浅析生物制品生物活性/效价检测的方法学验证。方法:依据《中国药典》2020年版9401指导原则,结合EV71抗原检测方法特点及验证目的对其进行专属性、相对准确度、精密度、线性和范围5个方面进行方法学验证。结果:EV71抗原检测方法专属性强,6个效价水平几何变异系数为4.7%~13.0%,均小于15%,相对偏倚为-6.05%~9.03%,均在±15%范围内,定量范围为225%~31%,线性回归相关系数为0.999 5,5方面验证均符合要求,且适用于该检测方法的使用。结论:本原则可具体指导生物学检测方法验证,在对不同检测方法进行验证时,根据检测目的、方法的原理、方法的技术特点、被检物的成分等设计具体方案。