Ephrinb1-EphB2-Map2信号通路在柚皮素促进脑缺血后海马神经发生中的作用

目的探讨柚皮素(NAR)对脑缺血小鼠内源性海马神经发生的改善作用及可能机制。方法双侧颈总动脉夹闭法建立急性脑缺血模型;HE染色检测病理变化;Morris水迷宫评估认知功能;免疫荧光观察神经发生;RT-PCR和Western blotting检测海马ephrinb1、EphB2、Map-2表达。结果与假手术组相比,模型组小鼠脑缺血后海马CA1区锥体神经元损伤(P<0.01),学习记忆功能下降(P<0.01),这些结果提示,小鼠出现了脑缺血损伤。同时,模型组小鼠BrdU、DCX、BrdU/NeuN阳性表达增加(P<0.01),提示脑缺血后海马区出现神经发生。与模型组相比,NAR治疗后小鼠CA1区病理损伤改善,学习记忆能力提高,神经发生进一步得到促进。同时,海马ephrinb1、EphB2、Map-2的mRNA和蛋白表达水平分别上调(P<0.05)。结论NAR可促进脑缺血后海马神经发生,改善认知功能,其机制可能与ephrinb1/EphB2/Map-2通路的激活有关。

Eph/ephrin信号通路在耳鼻咽喉头颈疾病中的研究进展

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体(Eph/ephrin)信号通路是一种受体酪氨酸激酶信号通路,参与机体炎症、癌症进展、肿瘤血管生成、肠道环境稳定、免疫应答、肿瘤免疫、神经发育、损伤后神经再生抑制等多种病理生理机制。Eph/ephrin在听觉神经发育、听觉系统回路和拓扑结构的形成,慢性鼻窦炎的发展以及头颈肿瘤的侵袭、转移、复发和治疗中发挥核心作用,有可能成为耳鼻咽喉头颈疾病的诊断、预后指标和治疗的重要靶点,本研究就Eph/ephrin信号通路在耳鼻咽喉头颈疾病中作用的研究进展进行综述。

Eph受体在卵巢癌中的研究进展

促红细胞生成素肝细胞(erythropoietin-producing hepatocellular,Eph)受体是酪氨酸受体家族中的一员,广泛表达于人类多种组织或细胞中,具有调节细胞生长、迁移及血管形成的潜在作用。近年来研究发现,EphA2、EphB2、EphB4在卵巢癌中呈现高表达,这种高表达与肿瘤的增殖、转移、血管形成和侵袭性相关,与患者预后负相关,有可能成为卵巢癌患者的预后指标或治疗靶点。

Eph家族蛋白研究进展

Eph家族蛋白包括Eph受体和Ephrin配体,是蛋白酪氨酸激酶家族中的最大成员。由于其具有独特的受体-配体复合物的结构特点及其受体与配体间特有的相互作用模式,所以它们极有可能成为疾病治疗的药物靶标,故该蛋白家族的相关领域研究日益受到重视。该文首先从Eph家族蛋白的分类、表达特点、结构和受体-配体相互作用特点以及其在神经系统中的功能等几个方面简要综述了其相关领域的最新研究进展,进而从结构、作用模式、功能几方面对Eph家族蛋白在神经系统疾患防治中的潜在价值和未来的研究方向进行了探讨和展望。

Ephrin-A1、Ephrin-B1融合蛋白的构建、表达和活性测定

目的克隆并合成Eph受体的两个主要配体ephrinA1和ephrinB1的融合蛋白。方法利用RTPCR技术,分别扩增了ephrinA1、ephrinB1胞外序列和小鼠IgG2b的Fc序列,将其连接后,插入pAlterMax表达载体,得到两个重组子pAlterMaxephrinA1Fc和pAlterMaxephrinB1Fc,经序列测定,确认无突变产生后转染至293T细胞,使之表达分泌型ephrinA1Fc和ephrinB1Fc可溶性融合蛋白,并利用蛋白A琼脂糖凝胶纯化。利用免疫沉淀和Westernblot检测了ephrinA1Fc和ephrinB1Fc的相应受体的活性。结果EphrinA1和ephrinB1融合蛋白可以成功刺激其相应的Eph受体,使之发生磷酸化。结论制备得到的两个融合蛋白具有相应的生物活性,为进一步研究Eph受体酪氨酸激酶家族的功能打下了基础。

Eph受体相互作用蛋白B2-肝细胞激酶B4信号通路在正畸牙移动压力侧牙周改建中的作用

目的 探讨Eph受体相互作用蛋白B2(Ephrin B2)-肝细胞激酶B4(EphB4)信号通路在正畸牙移动(OTM)压力侧牙周改建中的作用。方法 36只大鼠分为对照组、OTM组和EphB4抑制剂(NVP-BHG712)组各12只。对照组应用相同未激活的正畸矫治器,OTM组和NVP-BHG712组建立OTM模型。NVP-BHG712组从应用正畸螺旋弹簧的第1天开始在左上颌第一磨牙附近牙周组织的颊舌侧皮下注射NVP-BHG712,连续治疗14天;对照组和OTM组只接受载体(0.1%乙酸)。比较三组OTM距离和骨密度、牙周膜结构、牙周组织炎症相关基因白细胞介素(IL)-1、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA表达。结果 与第0 d比较,OTM过程中第4、7、14 d时第一磨牙压力侧EphrinB2和EphB4蛋白表达增加,并在第7 d时达到峰值。与OTM组比较,NVP-BHG712组第一磨牙和第二磨牙的距离较低,骨体积/组织体积比值、骨密度、骨小梁数、骨小梁间隙较高,骨小梁厚度显著降低(P<0.05)。OTM组IL-1、IL-6和TNF-α的表达显著高于NVP-BHG712组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EphrinB2-EphB4信号抑制可以减少骨密度的下降,抑制炎症因子的表达,并在OTM期间排列牙周韧带,为临床正畸治疗提供了新的途径。

基于EphrinBs/EphBs通路探讨桃红四物汤治疗带状疱疹后遗神经痛大鼠模型的作用机制

目的观察桃红四物汤对带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠模型的影响,探讨EphrinBs/EphBs通路在其中的作用机制。方法60只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组(采用水痘-带状疱疹病毒慢性感染法构建PHN模型)、阳性组[建模后以普瑞巴林27 mg/(kg·d)灌胃]、治疗组[建模后以桃红四物汤5 g/(kg·d)灌胃],治疗+EphB2-Fc组[建模第3天鞘内注射EphB2-Fc 5μg后以桃红四物汤5 g/(kg·d)灌胃]和治疗+EphrinB2-Fc组[建模第3天鞘内注射EphrinB2-Fc 5μg后以桃红四物汤5 g/(kg·d)灌胃]。采用行为学法分别在给药后1 d、7 d和14 d时检测大鼠的机械痛阈值,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠脊髓组织中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测脊髓神经细胞凋亡,荧光法检测脊髓组织的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EphrinBs/EphBs通路相关蛋白EphrinB2和EphB2的表达。结果与空白组比较,建模后大鼠机械痛阈值明显降低,而大鼠脊髓中IL-1β、TNF-α水平、脊髓神经细胞凋亡指数、Caspase-3活性以及EphrinB2、EphB2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,给予桃红四物汤治疗的大鼠在给药后7 d和14 d时机械痛阈值均明显升高(P<0.05),而大鼠脊髓中IL-1β、TNF-α水平、脊髓神经细胞凋亡指数、Caspase-3活性以及EphrinB2、EphB2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。给予EphBs阻滞剂EphB2-Fc后大鼠脊髓组织中EphB2蛋白表达水平明显低于治疗组(P<0.05)。以EphBs激动剂EphrinB2-Fc作用后大鼠脊髓组织中EphrinB2蛋白表达水平明显低于治疗组,而EphB2蛋白表达水平明显高于治疗组(P<0.05)。结论桃红四物汤可能通过抑制EphrinBs/EphBs通路减少炎性因子的释放和脊髓神经细胞凋亡,对PHN大鼠发挥镇痛作用。

Eph受体家族及其配体的信号转导途径及功能

Eph受体是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体家族 ,Eph受体和其膜附着型配体 (ephrin)在发育过程中呈现不同的表达模式 ,近来研究证明 ,Eph受体和其配体在包括神经网络形成 ,神经管和轴旁中胚层的成型(patterning) ,细胞迁移导向和轴突路径导引 ,血管形成等许多的发育过程中起重要作用 .Eph受体及其配体也与肿瘤发生有关 。

单核细胞和内皮细胞上的Eph家族在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化是一种全身性炎症性疾病,其中单核细胞与内皮细胞的粘附和单核细胞迁移到内皮下层是形成动脉粥样硬化斑块的关键事件。Eph家族参与了与动脉粥样硬化相关的过程,包括单核细胞的趋化、粘附、迁移以及动脉粥样硬化炎症的调节等。Eph家族在单核细胞与内皮细胞之间构建了复杂的网络。本文将对这些关键事件进行综合概括,为未来的研究方向和寻找针对动脉粥样硬化的新治疗靶点提供新的见解。

骨吸收与骨形成耦联中Eph/ephrin信号转导的研究进展

破骨细胞的骨吸收活动与成骨细胞的骨形成活动相互作用调节,形成一种特殊的耦联机制,影响骨骼生长、发育及正常骨组织结构的维持.最近几年提出的Eph/ephrin双向信号转导在骨吸收与骨形成耦联中的研究越来越受到关注.从Eph/ephrin分子结构、信号转导机制及生物学意义等几方面对该理论作一阐述.

Hp感染的胃癌组织中Eph A2和Ephrin A1的表达与远处转移的关系

采用蛋白印迹法和逆转录-聚合酶链反应法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Eph A2、Ephrin A1和E-cadherin的蛋白及mRNA水平,分析其与临床资料的关系,初步探讨幽门螺杆菌(Hp)促进胃癌发展的机制。结果胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平显著高于正常胃黏膜组(P<0.05),且伴Hp感染组显著高于未伴Hp感染组(P<0.05);胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平与存在淋巴结转移呈正相关;Eph A2和Ephrin A1分别与E-cadherin蛋白表达量呈负相关。说明Hp可能通过诱导胃癌细胞合成更多的Eph A2和Ephrin A1,从而抑制E-cadherin蛋白的表达,使胃癌细胞通过淋巴系统发生转移。

Eph-ephrin介导反向信号传递的研究进展

双向信号传递是细胞间通讯领域中新近阐明的机制,酪氨酸激酶受体-配体(Eph-ephrin)介导的双向信号传递是此机制中的一个重要代表.Eph酪氨酸激酶家族受体及其配体ephrin家族成员是在神经发育、血管新生等方面起重要作用的分子,通过Eph向细胞内传递的信号称为正向信号,通过其配体ephrin的信号称为反向信号.Ephrin家族又可根据分子结构分为2个亚家族,其中ephrinB为跨膜蛋白,可通过酪氨酸磷酸化依赖和PDZ结合结构域介导2种方式向胞内传递反向信号,活化FAK、JNK、Wnt等信号通路,ephrinA为糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,也具有反向信号传递功能.

受体酪氨酸激酶EphA1的研究进展

EphA1基因是受体酪氨酸激酶Eph家族中第一个成员,不仅参与胚胎发育和血管生成,而且在正常成人组织中也广泛表达。其独特的受体和配体复合物的结构特点和信号转导模式,使其在肿瘤发生、发展和转移中的作用日益受到重视。在不同器官、不同组织类型的肿瘤,甚至在同一种肿瘤发展的不同阶段,EphA1基因表达状况也有很大差异,提示该基因功能的多元性。深入研究EphA1在血管生成和肿瘤发生、发展和转移中的作用,有可能为肿瘤的早期诊断和治疗提供新的靶点。

Eph家族在哺乳动物皮肤毛囊中的研究进展

Eph家族蛋白包括Eph受体和Ephrin配体,是已知的蛋白酪氨酸激酶家族中最大的成员,而哺乳动物的毛囊是皮肤的重要附属结构,是产生被毛的组织,它的性状和组织结构决定着动物被毛的品质和产量。近年来的研究显示,Eph家族在哺乳动物皮肤毛囊的发育中具有十分重要的作用,可能参与毛囊的形成过程,对Ehp家族在哺乳动物毛囊中的表达及作用的深入研究可以指导毛用动物的选育进程,故该蛋白家族的相关领域研究日益受到重视。本文对Eph家族蛋白的分类及结构特点、Eph-Ephrin系统的信号传导和生物功能等相关领域的研究进展进行了简要综述,并对Eph家族在毛囊的形成过程及育种工作中的潜在价值和未来的研究方向进行了探讨和展望,以期为相关研究提供参考。

Eph/ephrin与中枢神经可塑性

Eph/ephrin是目前已知的具有最多成员的蛋白受体酪氨酸激酶家族,在胚胎期表达可促进中枢神经系统分层解剖构造和功能塑造;在成年期表达可通过改变突触可塑性、影响神经干细胞增殖和分化以及调节神经再生等机制影响中枢神经可塑性。激活或抑制Eph/ephrin,可能对脑卒中等中枢神经系统损伤的治疗和康复产生重要影响。

Eph家族及其在脊髓损伤中作用的研究进展

Eph家族（Eph受体和ephrin配体）是最大的受体酪氨酸蛋白激酶亚族,在胚胎期具有调节细胞粘连或排斥、细胞迁移、轴突导向、突触形成、骨稳态调节、血管形成等多种作用。近年来的研究发现,Eph家族蛋白在脊髓损伤后表达升高,可能参与神经再生活动[1]。

EPH受体与ephrin配体在肿瘤中的研究进展

Eph受体是已知最大的酪氨酸激酶受体家族,与ephrin配体结合产生双向信号在胚胎成形、神经轴突导向、血管发育中起着关键作用。最近一些基因缺失及体外血管形成实验表明EphB和ephrinB在胚胎血管分化及成人病理性血管形成中发挥重要作用,并且Eph和ephrin基因在各种肿瘤中不同程度的表达与肿瘤的恶性进展有关,如:侵袭力增强,更易于发生转移,血管化程度更明显等,由此而导致患者预后差。本文简要回顾了近来Eph受体家族与其配体在肿瘤发生方面的最新进展。

Eph在颞叶癫痫大鼠齿状回苔藓纤维出芽机制中的作用

目的:探讨匹罗卡品致痫大鼠Eph A5和ephrin A3在海马齿状回的表达变化与苔藓纤维出芽和突触重建的关系。方法:急性诱导癫痫持续状态及慢性颞叶癫痫形成后,采用Neo-Timm银染观察苔藓纤维出芽及突触重建,并用原位杂交方法检测ephrin A3基因的动态变化,用免疫组织化学方法检测Eph A5蛋白的动态变化。结果:在内嗅皮质区(EC)仅有Eph A5的表达,致痫后第7天,Eph A5的表达下调,降至最低点(P<0.01),此后逐渐回升,但第15天时仍低于对照组(P<0.05),第30天时回归至对照组水平(P>0.05)。在齿状回(DG),Eph A5及ephrin A3在致痫后第7天明显较对照组降低(P<0.01),此后逐渐回升,但第15天时仍低于对照组,在第30天和第60天与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:内嗅皮质区EphA5和齿状回Eph A5及ephrin A3的表达下调可能是癫痫持续状态(SE)后苔藓纤维出芽至齿状回内分子层的分子学机制之一。

骨肉瘤中ephrinB2/EphB4的表达及其与血管生成的关系

目的 探讨ephrinB2及其受体EphB4在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法 采用免役组化S P法检测 80例骨肉瘤组织中EphB4、ephrinB2等蛋白表达 ,并根据CD3 4和FⅧ RAg染色结果记数微血管密度。结果 EphB4及ephrinB2的蛋白表达定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞胞质 ,呈异质性分布 ;两种蛋白在Ⅲ级骨肉瘤中的表达均明显高于Ⅰ、Ⅱ级 (P <0 .0 1)。EphB4和ephrinB2强表达组中的MVD均显著高于相应的EphB4、ephrinB2弱表达组 (P <0 .0 1)。结论 EphB4 ephrinB2在骨肉瘤发生、演进过程中起着重要作用 ,并与肿瘤血管密切相关。